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用于胃癌標(biāo)志物檢測(cè)的納米電化學(xué)免疫傳感器研究

發(fā)布時(shí)間:2017-07-02 10:11

  本文關(guān)鍵詞:用于胃癌標(biāo)志物檢測(cè)的納米電化學(xué)免疫傳感器研究,由筆耕文化傳播整理發(fā)布。


【摘要】:胃癌(Gastric cancer)是最常見(jiàn)的惡性腫瘤之一,其發(fā)病率和死亡率分別位居第二位和第三位。因而早期診斷水平將對(duì)提高胃癌患者的生存質(zhì)量及總體治療效果評(píng)價(jià)具有重大意義。納米電化學(xué)免疫傳感器是一種結(jié)合納米技術(shù)、電化學(xué)分析法與免疫學(xué)技術(shù)的新興生物傳感器,其操作簡(jiǎn)單、分析速度快、靈敏度高、選擇性好。隨著研究的不斷深入,新型高靈敏度和高選擇性的納米電化學(xué)免疫傳感器件正得以快速發(fā)展,以適應(yīng)生命科學(xué)研究和臨床醫(yī)學(xué)的需要。同時(shí),為滿(mǎn)足臨床檢測(cè)需求,發(fā)展靈敏、準(zhǔn)確、經(jīng)濟(jì)、高通量的多種腫瘤標(biāo)志物聯(lián)合檢測(cè)的分析方法是腫瘤診斷長(zhǎng)期追求的目標(biāo)。本論文以胃癌早期檢測(cè)為目標(biāo),結(jié)合免疫分析技術(shù)、納米技術(shù)及電化學(xué)傳感技術(shù),從納米材料的功能化制備、信號(hào)增強(qiáng)的免疫傳感新技術(shù)、新型傳感界面的構(gòu)建等方面進(jìn)行探索和研究,構(gòu)建了兩種用于胃癌標(biāo)志物快速、靈敏檢測(cè)的納米電化學(xué)免疫傳感器,并建立了靈敏、快速、便攜及經(jīng)濟(jì)的雙胃癌標(biāo)志物聯(lián)合檢測(cè)的新方法。具體開(kāi)展了如下研究工作:1.基于多重信號(hào)放大技術(shù)構(gòu)建的電化學(xué)免疫傳感器用于胃癌標(biāo)志物CA72-4檢測(cè)的實(shí)驗(yàn)研究本實(shí)驗(yàn)將納米技術(shù)、免疫技術(shù)及電化學(xué)傳感分析技術(shù)相結(jié)合,以具有良好的導(dǎo)電性能的硫化鎢-還原氧化石墨烯-殼聚糖(WS2-Gr-CS)復(fù)合膜修飾電極作為抗體固定基底,利用良好生物相容性、導(dǎo)電性的納米金-四氧化三鐵-聚多巴胺(Au-Fe3O4-PDA)復(fù)合納米材料標(biāo)記二抗,再結(jié)合銀放大技術(shù)制得“三明治”型多重信號(hào)放大的高靈敏電化學(xué)免疫傳感器。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明,最佳實(shí)驗(yàn)條件下,在0.0001~5 U/mL范圍內(nèi)的CA72-4抗原濃度,其對(duì)數(shù)值與檢測(cè)的電流響應(yīng)信號(hào)扣除空白后的差值,呈現(xiàn)良好的線性關(guān)系,檢測(cè)限低至3×10-5 U/mL,且該傳感器特異性高、穩(wěn)定性強(qiáng)、重現(xiàn)性好。因此,本實(shí)驗(yàn)制備的多重信號(hào)放大免疫傳感器顯著地提高了傳感器檢測(cè)的靈敏度,降低了檢測(cè)限。2.基于雙納米信號(hào)探針構(gòu)建的電化學(xué)免疫傳感器用于胃癌雙標(biāo)志物聯(lián)合檢測(cè)的研究本實(shí)驗(yàn)首先設(shè)計(jì)并制備了金納米粒子 甲苯胺藍(lán) 氧化石墨烯(AuNPs-TB-GO)和金納米粒子-羧基二茂鐵-二硫化鎢(AuNPs-FMC-WS2)納米復(fù)合物,并分別標(biāo)記CEA和CA72-4,作為兩種具有不同電化學(xué)信號(hào)的探針。以具有磁性性能的生物素化磁珠(IMBs)作為一抗固定基質(zhì),通過(guò)外磁場(chǎng)作用將免疫磁珠牢牢固定于電極表面,再利用生物素-親和素之間的親和鍵作用實(shí)現(xiàn)CEA與CA72-4雙抗體分子在電極表面的有效固定,從而構(gòu)建了一種簡(jiǎn)單高效的雙組分免疫傳感界面。在上述傳感界面基礎(chǔ)上進(jìn)一步通過(guò)夾心免疫反應(yīng)將上述雙納米信號(hào)探針結(jié)合在傳感器表面,根據(jù)檢測(cè)電流信號(hào)值的變化,實(shí)現(xiàn)對(duì)胃癌腫瘤標(biāo)志物CEA與CA72-4的高靈敏同時(shí)檢測(cè)。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明,在最佳實(shí)驗(yàn)條件下,該雙組分免疫傳感器對(duì)CEA檢測(cè)線性范圍為0.01~120 ng/mL,檢測(cè)限是0.003 ng/mL;對(duì)CA72-4檢測(cè)線性范圍為0.05~35 U/mL,檢測(cè)限是0.016 U/mL,且該傳感器具有選擇性好、靈敏性高等優(yōu)點(diǎn),成功實(shí)現(xiàn)了對(duì)胃癌腫瘤標(biāo)志物CEA與CA72-4的高靈敏、快速、同時(shí)檢測(cè)。本實(shí)驗(yàn)為多腫瘤標(biāo)志物的聯(lián)合快速檢測(cè)提供新的方法,并為最終用于胃癌早期診斷提供科學(xué)的研究基礎(chǔ)。
【關(guān)鍵詞】:胃癌標(biāo)志物 納米材料 電化學(xué)免疫傳感器 多重信號(hào)放大 雙組分同時(shí)檢測(cè)
【學(xué)位授予單位】:福建醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2015
【分類(lèi)號(hào)】:R735.2;TP212
【目錄】:
  • 附錄 英文縮寫(xiě)字表5-6
  • 中文摘要6-8
  • 英文摘要8-10
  • 第一章 前言10-22
  • 參考文獻(xiàn)15-22
  • 第二章 基于多重信號(hào)放大技術(shù)構(gòu)建的電化學(xué)免疫傳感器用于胃癌標(biāo)志物CA72-4 檢測(cè)的實(shí)驗(yàn)研究22-39
  • 2.1 主要儀器與試劑23-26
  • 2.1.1 主要儀器23-24
  • 2.1.2 主要試劑24-25
  • 2.1.3 溶液配制25-26
  • 2.2 實(shí)驗(yàn)方法26-28
  • 2.2.1 WS2-Gr復(fù)合納米材料的制備26
  • 2.2.2 CS溶液的配制26
  • 2.2.3 Au-Fe3O4-PDA納米復(fù)合物標(biāo)記CA72-4 二抗26-27
  • 2.2.4 夾心型免疫傳感器的構(gòu)建27
  • 2.2.5 電化學(xué)信號(hào)檢測(cè)27-28
  • 2.3 結(jié)果與討論28-34
  • 2.3.1 WS2-Gr納米復(fù)合材料的表征28-29
  • 2.3.2 Au-Fe3O4-PDA納米復(fù)合材料的表征29-30
  • 2.3.3 修飾電極的表征30-32
  • 2.3.4 實(shí)驗(yàn)條件優(yōu)化32-33
  • 2.3.5 免疫傳感器的性能33-34
  • 2.4 結(jié)論34-35
  • 參考文獻(xiàn)35-39
  • 第三章 基于雙納米信號(hào)探針構(gòu)建的電化學(xué)免疫傳感器用于胃癌雙標(biāo)志物聯(lián)合檢測(cè)的研究39-56
  • 3.1 主要儀器與試劑40-43
  • 3.1.1 主要儀器40-41
  • 3.1.2 主要試劑41-42
  • 3.1.3 溶液配制42-43
  • 3.2 實(shí)驗(yàn)方法43-45
  • 3.2.1 二抗標(biāo)記物的制備43-44
  • 3.2.2 雙組分免疫傳感器的構(gòu)建44-45
  • 3.2.3 雙組分免疫傳感器雙抗體夾心法的測(cè)試過(guò)程45
  • 3.3 結(jié)果與討論45-52
  • 3.3.1 ATG納米復(fù)合材料的表征45-47
  • 3.3.2 AFW納米復(fù)合材料的表征47-48
  • 3.3.3 修飾電極的電化學(xué)表征48-50
  • 3.3.4 實(shí)驗(yàn)條件優(yōu)化50-51
  • 3.3.5 免疫傳感器的性能51-52
  • 3.4 結(jié)論52-53
  • 參考文獻(xiàn)53-56
  • 綜述 用于胃癌腫瘤標(biāo)志物檢測(cè)的免疫傳感器的研究進(jìn)展56-65
  • 參考文獻(xiàn)61-65
  • 致謝65

【相似文獻(xiàn)】

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3 李楠;胃癌診斷敏感性從不足30%提高到57.4%[N];健康報(bào);2008年

4 通訊員 李楠;胃癌“轉(zhuǎn)化醫(yī)學(xué)”研究見(jiàn)成效[N];上海科技報(bào);2008年

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6 胡德榮;新型胃癌分子標(biāo)志物研究獲突破[N];中國(guó)醫(yī)藥報(bào);2010年

7 本報(bào)記者 周芳;改善飲食習(xí)慣 早發(fā)現(xiàn)早治療[N];吉林日?qǐng)?bào);2006年

8 中南大學(xué)湘雅二醫(yī)院 楊燕貽;胃癌防治有哪些錯(cuò)誤觀念[N];大眾衛(wèi)生報(bào);2005年

9 特約記者 程守勤;胃癌診斷又有新方法[N];家庭醫(yī)生報(bào);2003年

10 重慶萬(wàn)州 黃瓊;胃癌的手術(shù)治療[N];上海中醫(yī)藥報(bào);2013年

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  本文關(guān)鍵詞:用于胃癌標(biāo)志物檢測(cè)的納米電化學(xué)免疫傳感器研究,,由筆耕文化傳播整理發(fā)布。



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