本文關(guān)鍵詞：膠質(zhì)瘤干細(xì)胞誘導(dǎo)宿主肝組織內(nèi)腫瘤間質(zhì)細(xì)胞惡性轉(zhuǎn)化的實(shí)驗(yàn)研究，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：第一部分:雙色熒光示蹤人膠質(zhì)瘤干細(xì)胞肝臟異位移植模型的建立及生物學(xué)特征分析目的:通過建立紅、綠雙色熒光示蹤膠質(zhì)瘤干細(xì)胞異位肝臟移植模型,為進(jìn)一步研究異位移植瘤的腫瘤微環(huán)境奠定基礎(chǔ)。方法:將攜帶紅色熒光蛋白(RFP)基因的慢病毒轉(zhuǎn)染人膠質(zhì)瘤干細(xì)胞SU3,獲得穩(wěn)定高表達(dá)RFP的SU3-RFP細(xì)胞株,接種于表達(dá)綠色熒光蛋白(GFP)的轉(zhuǎn)基因裸小鼠肝臟內(nèi),致瘤后取部分荷瘤鼠載瘤肝臟,于熒光成像系統(tǒng)觀察;其它荷瘤鼠用4%多聚甲醛心臟灌注后,取載瘤肝臟固定脫水,OCT包埋后做連續(xù)冰凍切片,HE及DAPI染色后,在普通光鏡、熒光顯微鏡和共聚焦激光掃描顯微鏡下觀察移植瘤組織病理特征。結(jié)果:轉(zhuǎn)染RFP基因后所得SU3-RFP細(xì)胞仍保持其干細(xì)胞特性。SU3-RFP的肝臟移植成功率為15/18(約83%)。腹腔解剖病理及活體熒光成像顯示SU3-RFP易向肝內(nèi)及肝外臟器侵襲;在移植瘤冰凍切片中,表達(dá)RFP的腫瘤細(xì)胞和表達(dá)GFP的宿主細(xì)胞相互交織存在,共同參與組成腫瘤微環(huán)境;雙色熒光示蹤清晰顯示了腫瘤細(xì)胞侵襲宿主血管、遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移及其與宿主細(xì)胞的融合或吞噬。結(jié)論:該模型的建立為深入研究異位移植膠質(zhì)瘤微環(huán)境奠定了基礎(chǔ);同時(shí)雙色熒光示蹤在異位移植瘤腫瘤組織重構(gòu)中的應(yīng)用對(duì)研究腫瘤細(xì)胞侵襲、轉(zhuǎn)移及其與宿主細(xì)胞相互作用等方面具有很高的實(shí)用價(jià)值。第二部分:膠質(zhì)瘤干細(xì)胞可誘導(dǎo)宿主肝組織內(nèi)膠質(zhì)瘤間質(zhì)細(xì)胞惡性轉(zhuǎn)化目的:在已報(bào)道的腦內(nèi)原位移植的膠質(zhì)瘤干細(xì)胞可誘導(dǎo)宿主膠質(zhì)細(xì)胞發(fā)生惡性轉(zhuǎn)化的基礎(chǔ)上,進(jìn)一步探索此類惡變的發(fā)生是否與腫瘤移植部位特異性微環(huán)境相關(guān)。方法:將轉(zhuǎn)有紅色熒光蛋白(RFP)基因的人膠質(zhì)瘤干/祖細(xì)胞SU3-RFP接種于全身表達(dá)綠色熒光蛋白(GFP)的裸小鼠肝臟,致瘤后取移植瘤組織做常規(guī)病理檢測和細(xì)胞培養(yǎng),從中單克隆具永生化的GFP+細(xì)胞和GFP+/RFP+雙陽性細(xì)胞傳代,做細(xì)胞表型分析和致瘤試驗(yàn)。結(jié)果:取肝內(nèi)異位生長的移植瘤組織再培養(yǎng)獲得永生化的宿主鼠源間質(zhì)細(xì)胞,并建立了B4、B9、B10三株高增殖性單克隆細(xì)胞株,其中B4為共表達(dá)GFP/RFP的融合細(xì)胞,還同時(shí)表達(dá)CD1a、CD83、CD86等樹突狀細(xì)胞標(biāo)記蛋白;B9表達(dá)GFP和巨噬細(xì)胞標(biāo)記蛋白CD68、F4/80;B10表達(dá)GFP和成纖維細(xì)胞標(biāo)記蛋白FAP-α、α-SMA、S100,均為鼠源宿主細(xì)胞。3株細(xì)胞遺傳學(xué)檢測均為異倍體,在裸小鼠皮下致瘤率均為100%。結(jié)論:在裸小鼠肝組織內(nèi)建立的膠質(zhì)瘤干細(xì)胞異位移植模型中,膠質(zhì)瘤干細(xì)胞在組織重構(gòu)中可誘導(dǎo)其微環(huán)境中的間質(zhì)細(xì)胞惡性轉(zhuǎn)化,表明這種惡性轉(zhuǎn)化在中樞神經(jīng)系統(tǒng)之外亦能發(fā)生,而且間質(zhì)細(xì)胞惡性轉(zhuǎn)化應(yīng)為腫瘤異質(zhì)性的主要原因,對(duì)進(jìn)一步研究腫瘤發(fā)生、演進(jìn)與腫瘤微環(huán)境的關(guān)系具有重要意義。
【關(guān)鍵詞】：膠質(zhì)瘤干細(xì)胞 雙色熒光示蹤 移植瘤模型 腫瘤微環(huán)境 轉(zhuǎn)基因熒光裸小鼠 雙色熒光示蹤 膠質(zhì)瘤干細(xì)胞 熒光裸小鼠 腫瘤微環(huán)境 惡性轉(zhuǎn)化
【學(xué)位授予單位】：蘇州大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號(hào)】：R739.4
【目錄】：

• 中文摘要4-6
• abstract6-10
• 序言10-13
• 參考文獻(xiàn)11-13
• 第一部分：雙色熒光示蹤人膠質(zhì)瘤肝臟異位移植模型的建立及生物學(xué)特征13-26
• 引言13
• 材料和方法13-17
• 實(shí)驗(yàn)結(jié)果17-22
• 討論22-24
• 參考文獻(xiàn)24-26
• 第二部分：膠質(zhì)瘤干細(xì)胞可誘導(dǎo)宿主肝組織內(nèi)膠質(zhì)瘤間質(zhì)細(xì)胞惡性轉(zhuǎn)化26-49
• 引言26
• 材料和方法26-34
• 結(jié)果與分析34-44
• 討論44-46
• 參考文獻(xiàn)46-49
• 研究小結(jié)49-50
• 綜述50-59
• 參考文獻(xiàn)55-59
• 中英文對(duì)照縮略詞表59-60
• 攻讀碩士學(xué)位期間公開發(fā)表的論文60-61
• 攻讀碩士學(xué)位期間參加的學(xué)術(shù)會(huì)議61-62
• 致謝62-63

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3 仝海波,江澄川,唐鎮(zhèn)生,金一尊;膠質(zhì)瘤細(xì)胞化學(xué)增敏作用實(shí)驗(yàn)研究[J];山西臨床醫(yī)藥;2000年07期

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5 梁一鳴,郭國慶,鄭少俊,沈偉哉;膠質(zhì)瘤血管內(nèi)皮生長因子表達(dá)的調(diào)節(jié)[J];臨床與實(shí)驗(yàn)病理學(xué)雜志;2001年02期

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7 黃強(qiáng),董軍;膠質(zhì)瘤的分子外科治療[J];中國微侵襲神經(jīng)外科雜志;2001年04期

8 葉明,周岱,周幽心,王瑋,傅建新,黃煜倫;血管內(nèi)皮生長因子在膠質(zhì)瘤中的表達(dá)[J];腫瘤;2002年06期

9 顧宇翔,陳銜城,王宇倩;膠質(zhì)瘤對(duì)親細(xì)胞非均質(zhì)分子脂質(zhì)和幾種藥物敏感性的比較[J];復(fù)旦學(xué)報(bào)(醫(yī)學(xué)版);2003年02期

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9 張所軍;神經(jīng)干細(xì)胞向膠質(zhì)瘤干細(xì)胞遷移及對(duì)其生長特性的影響[D];華中科技大學(xué);2011年

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  本文關(guān)鍵詞：膠質(zhì)瘤干細(xì)胞誘導(dǎo)宿主肝組織內(nèi)腫瘤間質(zhì)細(xì)胞惡性轉(zhuǎn)化的實(shí)驗(yàn)研究，，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

本文編號(hào)：502595