本文關(guān)鍵詞：尼美舒利聯(lián)和絲裂霉素C對膀胱癌細胞的促凋亡的作用，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：膀胱癌是指發(fā)生在膀胱粘膜上皮的惡性腫瘤,是泌尿系統(tǒng)常見腫瘤,其在惡性腫瘤發(fā)病率的世界排名中位居第九。其高復(fù)發(fā)和高轉(zhuǎn)移的生物學特性,使患者的生存期大大縮短,嚴重威脅著人類的健康。尋找更有效的化療藥物,不僅可以提高不能手術(shù)的患者治療的有效率,同時還為應(yīng)用術(shù)后輔助治療的患者在降低復(fù)發(fā)轉(zhuǎn)移及改善預(yù)后方面提供了更有效的解決方案。本實驗中采用國內(nèi)外較少研究的絲裂霉素聯(lián)合尼美舒利作為研究對象,以膀胱癌EJ細胞為實驗對象,探討該聯(lián)合用藥的有效率。絲裂霉素是從上世紀開始采用的一代化療藥物,屬抗生素類化療藥物,由鏈霉菌提取,化學結(jié)構(gòu)具有苯醌、乙酰亞胺基及氨甲酰三個活性基團,作用與烷化劑相似,與DNA鏈形成交聯(lián),抑制DNA復(fù)制,對RNA也有抑制作用,從而抑制細胞的有絲分裂過程,抗腫瘤形成。屬細胞周期非特異性藥物。主要用于各種實體腫瘤如胃癌、結(jié)腸癌、肝癌、胰腺癌、非小細胞肺癌、乳腺癌和癌性胸、腹水等。其治療效果明確,是表淺性膀胱癌術(shù)灌注化療及晚期復(fù)發(fā)轉(zhuǎn)移和不能手術(shù)的膀胱癌患者全身化療的常用的化療藥物之一。尼美舒利是一種非甾體類抗炎藥,屬于環(huán)氧化酶II抑制劑。其作用機制為可以選擇性抑制環(huán)氧合酶Ⅱ,近年來相關(guān)研究表明,環(huán)氧化酶II(cyclooxygenase-2,COX-2)在惡性腫瘤細胞的生長、增殖過程中起重要作用,它可促進腫瘤細胞增殖,抑制腫瘤細胞凋亡,促進腫瘤的侵襲、轉(zhuǎn)移等。例如,有研究發(fā)現(xiàn)在膀胱癌細胞中環(huán)氧化酶-2表達增高,參與腫瘤細胞的生長增殖及凋亡,同時在腫瘤組織血管生成、生物性轉(zhuǎn)移過程中有重要作用。選擇性環(huán)氧化酶-2抑制劑如塞來昔布、尼美舒利可明顯抑制膀胱癌細胞生長增殖、誘導(dǎo)凋亡、抑制新生血管和淋巴管生成等,從而抑制腫瘤侵襲和轉(zhuǎn)移。另有研究證實,在卵巢癌治療的體內(nèi)外研究中,選擇性環(huán)氧化酶-2抑制劑同樣可以通過抑制瘤體內(nèi)環(huán)氧化酶-2的表達,降低VEGF的表達,減少血管生成及促進細胞凋亡發(fā)揮抗腫瘤作用。因此,針對膀胱癌中高表達的環(huán)氧化酶-2,可以選用選擇性環(huán)氧化酶-2抑制劑來治療。目的:本實驗主要探討尼美舒利(選擇性環(huán)氧化酶-2抑制劑)聯(lián)合絲裂霉素對膀胱癌ej細胞的抑制作用。應(yīng)用以上兩種藥物體外作用于ej細胞,通過測定凋亡相關(guān)基因caspase-3/bax/bcl-2在ej細胞上的表達,觀察對膀胱癌ej細胞促凋亡作用。方法:1.細胞來源:人膀胱癌ej細胞株(購自上海美軒生物科技有限公司),藥物培養(yǎng)時間分別為24h、48h、72h。2.實驗分組:采用隨機對照原則分對照組和實驗組,對照組即不做處理的細胞培養(yǎng)液作陰性對照,實驗組按實驗藥物不同分3組:絲裂霉素c組,濃度為2mg/l;尼美舒利組,濃度為300umol/l;絲裂霉素c(2mg/l)聯(lián)合尼美舒利組(300umol/l)。3.對照組和實驗組培養(yǎng)24h,48h,72h,q-pcr法測定各干預(yù)組細胞bcl-2mrna、baxmrna及caspase3mrna表達的差異。4.對照組和實驗組培養(yǎng)24h,48h,72h,westernblot法測定各干預(yù)組細胞bcl-2蛋白、bax蛋白及caspase3蛋白表達的差異。5.統(tǒng)計分析:實驗數(shù)據(jù)使用spss19.0,分別用均數(shù)±標準差(x±s)的數(shù)據(jù)進行表示。多組之間的比較使用單因素析因方差分析法,兩組之間的比較使用snk法,p0.01則表示差異有統(tǒng)計學意義。結(jié)果:1.q-pcr法測各實驗組及空白對照組膀胱癌ej細胞中bcl-2mrna、baxmrna及caspas3mrna的表達:分別作用24h、48h、72h后,與空白對照組相比,各實驗組的bcl-2mrna的表達均降低,baxmrna及caspase3mrna均升高,差異有統(tǒng)計學意義。其中與單藥組相比,聯(lián)合組的bcl-2mrna的表達最低,同時baxmrna及caspase3的表達最高(p0.01,差異具有統(tǒng)計學意義);且隨作用時間的延長,聯(lián)合組中bcl-2mrna的表達逐漸降低,baxmrna及caspase3mrna的表達逐漸升高,作用72h時作用最明顯(p0.01,差異有統(tǒng)計學意義)。western-blot法測各實驗組及空白對照組膀胱癌EJ細胞中Bcl-2、Bax及Caspas3蛋白的表達:分別作用24h、48h、72h后,與空白對照組相比,各實驗組的Bcl-2蛋白的表達均降低,Bax及Caspase3蛋白均升高,差異有統(tǒng)計學意義。其中與單藥組相比,聯(lián)合組的Bcl-2蛋白的表達最低,同時Bax及Caspase3蛋白的表達最高(P0.05,差異具有統(tǒng)計學意義);且隨作用時間的延長,聯(lián)合組中Bcl-2蛋白的表達逐漸降低,Bax及Caspase3蛋白的表達逐漸升高,作用72h時作用最明顯(P0.05,差異有統(tǒng)計學意義)。結(jié)論:絲裂霉素C聯(lián)合尼美舒利在抑制膀胱癌EJ細胞的生長,促進細胞凋亡的過程中有協(xié)同作用,且隨作用時間的延長抑制作用增強。作用機制主要與凋亡相關(guān)基因Bcl-2、Bax及Caspase3的表達相關(guān)。
【關(guān)鍵詞】：尼美舒利 絲裂霉素 環(huán)氧化酶-2抑制劑 膀胱癌EJ細胞 Bcl-2/Bax Caspase3
【學位授予單位】：承德醫(yī)學院
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2016
【分類號】：R737.14
【目錄】：

• 中文摘要5-8
• 英文摘要8-12
• 英文縮寫12-13
• 前言13-14
• 材料與方法14-26
• 結(jié)果26-28
• 附圖28-31
• 附表31-34
• 討論34-40
• 結(jié)論40-41
• 參考文獻41-44
• 綜述44-50
• 參考文獻48-50
• 致謝50-51
• 個人簡歷51

【相似文獻】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 王瑞雪;王樹華;朱麗艷;;尼美舒利β-環(huán)糊精包合物的制備[J];中國煤炭工業(yè)醫(yī)學雜志;2008年12期

2 張麗霞;;尼美舒利治療兒科高熱的療效和安全性[J];中國醫(yī)藥導(dǎo)刊;2008年07期

3 陳新梅,高曉黎,白麗;用藥效學試驗篩選尼美舒利新劑型[J];中國藥學雜志;2003年11期

4 高曉黎,陳新梅;紫外分光光度法測定尼美舒利栓的含量[J];中國藥師;2003年05期

5 胡云飛;王玲瓏;楊嗣星;劉修垣;錢輝軍;張孝斌;;尼美舒利治療男性慢性盆腔疼痛綜合征臨床試驗[J];藥物流行病學雜志;2005年06期

6 王井和;胡國華;;小兒清熱寧與尼美舒利聯(lián)合治療小兒急性上呼吸道感染[J];醫(yī)藥導(dǎo)報;2006年12期

7 周妍;陳洋;;尼美舒利對呼吸科發(fā)熱患者退熱療效觀察[J];實用藥物與臨床;2006年06期

8 陳新梅;;紫外分光光度法測定尼美舒利栓中尼美舒利含量(英文)[J];中國現(xiàn)代應(yīng)用藥學;2007年02期

9 朱錦秀;石慶平;邢蓉;劉雁;許善初;;尼美舒利口服制劑國內(nèi)文獻不良反應(yīng)分析[J];中國醫(yī)藥導(dǎo)報;2008年36期

10 王長遠;秦儉;孫長怡;王晶;;尼美舒利導(dǎo)致多臟器功能不全綜合征死亡[J];藥物不良反應(yīng)雜志;2008年02期

中國重要會議論文全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 蔣肖男;;12歲以下兒童禁止使用尼美舒利[A];2011全國中醫(yī)藥科普高層論壇文集[C];2011年

2 韓丹;代菲;儲文功;;247例尼美舒利所致藥物不良反應(yīng)報告的分析[A];2013年中國藥學會藥事管理專業(yè)委員會年會暨“醫(yī)藥安全與科學發(fā)展”學術(shù)論壇論文集（下冊）[C];2013年

3 黃海強;;40例尼美舒利所致不良反應(yīng)的文獻分析[A];海南省藥學會2011年學術(shù)年會論文集[C];2011年

4 陳小平;永星;李小剛;;尼美舒利對大鼠腦出血后腦水腫基質(zhì)金屬蛋白酶2的影響[A];中華醫(yī)學會第十三次全國神經(jīng)病學學術(shù)會議論文匯編[C];2010年

5 田家軍;徐偉;于亮;逯素梅;;尼美舒利抑制喉癌轉(zhuǎn)移機制探討[A];2010全國耳鼻咽喉頭頸外科中青年學術(shù)會議論文匯編[C];2010年

6 趙優(yōu)曼;趙會英;馬馳;;熱熔擠出法制備尼美舒利固體分散體[A];2011年中國藥學大會暨第11屆中國藥師周論文集[C];2011年

7 何用忠;楊林;;尼美舒利凝膠劑的制備與質(zhì)量控制[A];2011年全國醫(yī)藥學術(shù)論壇交流會暨臨床藥學與藥學服務(wù)研究進展培訓班論文集[C];2011年

8 張麗媛;章竹君;;毛細管電泳與微超濾技術(shù)聯(lián)用檢測人體血清中的尼美舒利[A];第八屆全國發(fā)光分析暨動力學分析學術(shù)研討會論文集[C];2005年

9 宮愛霞;關(guān)鳳林;于春紅;劉敏;呂申;;姜黃素、尼美舒利聯(lián)合應(yīng)用對胰腺癌細胞增殖的抑制作用[A];第九屆全國中西醫(yī)結(jié)合普通外科學術(shù)交流大會暨膽道胰腺疾病新進展學習班論文匯編[C];2005年

10 楊美燕;郭繼芬;范云周;白雪茜;靳海明;賀紹瓏;高春生;;尼美舒利口服雙相釋藥系統(tǒng)體內(nèi)外評價研究[A];第十一屆全國青年藥學工作者最新科研成果交流會論文集[C];2012年

中國重要報紙全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 本報記者 唐聞佳;尼美舒利：毒和效哪個大？[N];文匯報;2011年

2 記者 柳志梅;20家尼美舒利生產(chǎn)企業(yè)在津發(fā)布聯(lián)合聲明[N];中國醫(yī)藥報;2011年

3 Piyush Gupta H.P.S. Sachdev(作者系印度兒科醫(yī)師學會主席) 洪麗萍 陳云飛;兒童口服尼美舒利的安全性評價[N];醫(yī)藥經(jīng)濟報;2006年

4 葉子　海嘯;尼美舒利：國內(nèi)企業(yè)主導(dǎo)市場[N];中國醫(yī)藥報;2009年

5 康文;尼美舒利肝安全有效 療效收益大于風險[N];醫(yī)藥經(jīng)濟報;2009年

6 商報記者 肖瑋;“尼美舒利”風波調(diào)查[N];北京商報;2011年

7 本報記者 陳雅瓊;藥品下架拖累康芝藥業(yè)昨日跌幅第一 多家藥店尼美舒利未下架 董秘稱有人想毀掉這個產(chǎn)業(yè)[N];證券日報;2011年

8 本報記者 劉凌林;“尼美舒利事件”風波再起[N];中國企業(yè)報;2011年

9 記者 鐘可芬　陸晉源;尼美舒利說明書或修改 康芝藥業(yè)主業(yè)面臨危機[N];第一財經(jīng)日報;2011年

10 記者 龔雯;康芝藥業(yè)：何時走出“尼美舒利”陰影[N];經(jīng)濟參考報;2011年

中國碩士學位論文全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 周璇;抑制COX-2對非酒精性脂肪肝細胞凋亡與衰老的影響[D];南華大學;2015年

2 曹園園;尼美舒利聯(lián)和絲裂霉素C對膀胱癌細胞的促凋亡的作用[D];承德醫(yī)學院;2016年

3 陳君;獸用尼美舒利注射的制備與初步評價[D];西南大學;2011年

4 陳鐵;尼美舒利對牙周炎作用的實驗研究及臨床療效評價[D];暨南大學;2005年

5 彭芳;尼美舒利對大鼠HSC-T6細胞Rassf1基因表達的影響[D];南華大學;2013年

6 范云周;尼美舒利口服雙相釋藥系統(tǒng)研究[D];河南大學;2011年

7 田家軍;尼美舒利抑制下咽癌細胞生長和轉(zhuǎn)移的實驗研究[D];山東大學;2011年

8 袁園;尼美舒利溫度敏感凝膠的制備與評價[D];河北醫(yī)科大學;2010年

9 宋哲;新型超分子材料磺丁基醚-β-環(huán)糊精與尼美舒利包合物研究及軟膏劑制備[D];重慶大學;2013年

10 吳慧哲;聯(lián)用尼美舒利對5-氟尿嘧啶在大鼠體內(nèi)藥代動力學的影響[D];中國醫(yī)科大學;2006年

  本文關(guān)鍵詞：尼美舒利聯(lián)和絲裂霉素C對膀胱癌細胞的促凋亡的作用，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

，

本文編號：500591