本文關(guān)鍵詞：RNA結(jié)合蛋白QKI抑制腎透明細(xì)胞癌演變的機(jī)制探究，，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：腎細(xì)胞癌(renal cell carcinoma,RCC)簡稱腎癌,是起源于腎小管上皮的惡性腫瘤,占腎臟惡性腫瘤的80%-90%。腎癌約占成人惡性腫瘤的2%-3%,世界各國各地區(qū)腎癌的發(fā)病率差異明顯,發(fā)達(dá)國家發(fā)病率高于發(fā)展中國家,我國各地區(qū)腎癌的發(fā)病率及死亡率差異也較大。腎癌的病因未明。其發(fā)病與遺傳,吸煙,肥胖,高血壓等危險因素相關(guān),遺傳性腎癌或家族性腎癌占腎癌總數(shù)的2%-4%。染色體3p25-26的VHL基因與腎透明細(xì)胞癌的發(fā)生有密切關(guān)系。目前,腎癌的治療主要是手術(shù),放化療,免疫治療和靶向治療,但是這些方法對于某些晚期和轉(zhuǎn)移性腎癌患者收效甚微。因此,我們急需要發(fā)現(xiàn)新的治療和診斷腎透明細(xì)胞癌的靶點,以達(dá)到早發(fā)現(xiàn)早治療的目的,從而延長患者的生存時限并且提高患者的生存質(zhì)量。HIF-1α是低氧誘導(dǎo)因子HIF(hypoxia inducible factor)家族的一員,是由編碼紅細(xì)胞生成素的基因發(fā)現(xiàn)低氧調(diào)控區(qū)域HRE而得來的。HIF-1α在低氧條件下與HIF-1β結(jié)合形成異源二聚體并且轉(zhuǎn)移進(jìn)入細(xì)胞核,從而調(diào)控下游靶基因表達(dá)。研究證實HIF-1α可促進(jìn)多種腫瘤細(xì)胞增殖,轉(zhuǎn)移和血管生成。HIF是腎透明細(xì)胞癌中VHL信號通路的重要組成部分,其中HIF-1α過表達(dá)誘導(dǎo)的血管生成時腎透明細(xì)胞癌發(fā)生機(jī)制的重要環(huán)節(jié)并且導(dǎo)致較差的臨床治療效果。RNA結(jié)合蛋白QKI是信號轉(zhuǎn)導(dǎo)和激活家族(STAR家族)成員之一。qki基因可以編碼多種蛋白,主要有三種亞型QKI-5、QKI-6和QKI-7。以往的研究表明QKI在神經(jīng)系統(tǒng)發(fā)育中發(fā)揮重要作用。我們實驗室的研究也表明,QKI促進(jìn)了結(jié)腸上皮,巨噬細(xì)胞和肌肉細(xì)胞的分化過程。同時QKI在胃癌,前列腺癌和舌癌中還扮演著抑癌基因的角色�；谝陨涎芯�,本課題意在探討QKI在腎癌發(fā)生發(fā)展中的作用,能否作為診斷,治療和預(yù)后的潛在靶點。目的:1)利用腎透明細(xì)胞癌以及匹配的癌旁臨床組織樣本,檢測RNA結(jié)合蛋白QKI的表達(dá)量是否存在差異,同時在腫瘤細(xì)胞系和正常細(xì)胞中檢測QKI表達(dá)是否存在差異。2)觀察過表達(dá)和干涉QKI對腫瘤細(xì)胞增殖凋亡以及周期的影響3)在上述功能變化的基礎(chǔ)上,進(jìn)一步探索RNA結(jié)合蛋白QKI發(fā)揮上述作用的分子機(jī)制。4)最后通過組織芯片技術(shù)收集腎透明細(xì)胞癌組織并進(jìn)行免疫組化半定量和統(tǒng)計學(xué)分析,探討RNA結(jié)合蛋白QKI與患者的分級分期以及生存時間是否存在相關(guān)性。方法和結(jié)果:1)針對腎癌臨床樣本的免疫組織化學(xué)染色結(jié)果表明,QKI在腎透明細(xì)胞癌中的表達(dá)量低于癌旁組織;并且QKI的表達(dá)水平與腎癌的惡性程度呈負(fù)相關(guān):對腫瘤組織以及癌旁組織進(jìn)行Western Blot檢測結(jié)果顯示,腎癌患者的癌旁組織中QKI的表達(dá)水平明顯高于腫瘤組織。同時,我們通過RT-PCR和Western Blot在細(xì)胞水平檢測QKI的表達(dá),結(jié)果顯示QKI的表達(dá)趨勢與組織水平相一致。2)MTT結(jié)果顯示,過表達(dá)QKI使786-0和Caki-1細(xì)胞增殖受到抑制;流式細(xì)胞術(shù)結(jié)果顯示,過表達(dá)QKI使786-0和Caki-1細(xì)胞凋亡率增加。RT-PCR和Westernblot結(jié)果顯示過表達(dá)QKI使周期相關(guān)蛋白cyclin D1表達(dá)降低,而p27表達(dá)增高;流式細(xì)胞術(shù)結(jié)果顯示,過表達(dá)QKI后786-0和Caki-1腫瘤細(xì)胞中S期細(xì)胞比例降低。同時,干涉QKI后與過表達(dá)結(jié)果相反。3)RT-PCR和Western Blot結(jié)果顯示,在低氧(5%)和常氧(20%)條件下,過表達(dá)QKI使低氧誘導(dǎo)因子HIF-1α表達(dá)均受到抑制;RT-PCR結(jié)果顯示,在同樣的條件下,HIF-1α下游靶基因GLUT-1,VEGF,PGK-1表達(dá)同樣受到抑制;同時,在干涉QKI后得到與過表達(dá)結(jié)果相反。RT-PCR結(jié)果顯示,在過表達(dá)QKI的同時使用si-RNA-HIF-1α干涉掉HIF-1α后,其下游靶基因變化趨勢不再明顯。4)對腎癌臨床樣本進(jìn)行免疫組化染色,并對染色結(jié)果進(jìn)行半定量分析,以25%陽性率為界值點,將QKI表達(dá)分為低表達(dá)(≤25%)和高表達(dá)(25%)。通過統(tǒng)計學(xué)分析,QKI高表達(dá)與腫瘤分級呈負(fù)相關(guān),而與分期無明顯相關(guān)性,QKI高表達(dá)的患者生存率明顯高于QKI低表達(dá)患者。結(jié)論:通過實驗研究,我們首次發(fā)現(xiàn)了RNA結(jié)合蛋白QKI在腎透明細(xì)胞癌中發(fā)揮著抑癌的作用。我們發(fā)現(xiàn)QKI在臨床腎癌腫瘤組織中表達(dá)下調(diào),并且QKI的表達(dá)水平與腫瘤的分級呈負(fù)相關(guān),與患者的生存期呈正相關(guān);細(xì)胞實驗表明,過表達(dá)QKI能夠抑制腎癌細(xì)胞的增殖,促進(jìn)腫瘤細(xì)胞的凋亡以及抑制腫瘤細(xì)胞周期;同時,過表達(dá)QKI能夠抑制低氧誘導(dǎo)因子HIF-1α表達(dá),進(jìn)而影響HIF-1α的下游促血管生成和糖代謝的相關(guān)靶基因VEGF,GLUT-1,PGK-1的表達(dá)。通過上述作用RNA結(jié)合蛋白QKI抑制了腎透明細(xì)胞癌的發(fā)生和發(fā)展。為QKI成為腎透明細(xì)胞癌獨立的預(yù)后指標(biāo)的治療靶點提供了理論基礎(chǔ)。
【關(guān)鍵詞】：RNA結(jié)合蛋白QKI 腎透明細(xì)胞癌 低氧誘導(dǎo)因子HIF-1α 增殖和凋亡
【學(xué)位授予單位】：第四軍醫(yī)大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號】：R737.11
【目錄】：

• 縮略語表5-7
• 中文摘要7-10
• ABSTRACT10-14
• 前言14-16
• 文獻(xiàn)回顧16-26
• 實驗一 RNA結(jié)合蛋白QKI在腎透明細(xì)胞癌中的表達(dá)變化26-37
• 1 材料26-27
• 2 方法27-31
• 3 結(jié)果31-35
• 4 討論35-37
• 實驗二 QKI對腎透明細(xì)胞癌生物學(xué)行為的影響37-53
• 1 材料37-38
• 2 方法38-41
• 3 結(jié)果41-51
• 4 討論51-53
• 實驗三 QKI通過調(diào)控HIF-1Α 表達(dá)的方式抑制腎透明細(xì)胞癌發(fā)展53-64
• 1 材料53-54
• 2 方法54-57
• 3 結(jié)果57-62
• 4 討論62-64
• 實驗四 QKI與腎癌患者臨床數(shù)據(jù)的相關(guān)性分析64-70
• 1 材料64
• 2 方法64-65
• 3 結(jié)果65-68
• 4 討論68-70
• 小結(jié)70-72
• 參考文獻(xiàn)72-77
• 個人簡歷和研究成果77-78
• 致謝78

【相似文獻(xiàn)】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 易仁亮;老年雙腎透明細(xì)胞癌1例報告[J];實用老年醫(yī)學(xué);2005年03期

2 楊華,王華慶;腎透明細(xì)胞癌的全身治療現(xiàn)狀及進(jìn)展[J];國外醫(yī)學(xué).外科學(xué)分冊;2005年06期

3 李云輝,林華歡;腎透明細(xì)胞癌術(shù)后遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移3例[J];廣東醫(yī)學(xué);2005年01期

4 胡蜀雯;劉華麗;;超聲診斷以囊性病變?yōu)橹鞯哪I透明細(xì)胞癌1例[J];臨床超聲醫(yī)學(xué)雜志;2007年03期

5 石泓哲;李長嶺;;紅色膠狀腎透明細(xì)胞癌的臨床及病理特點——附2例報告[J];癌癥進(jìn)展;2007年06期

6 歐陽可雄;陳偉良;黃志權(quán);李勁松;張樹標(biāo);;腎透明細(xì)胞癌伴下頜骨轉(zhuǎn)移1例報告[J];中國口腔頜面外科雜志;2008年01期

7 祖強(qiáng);洪寶發(fā);;受體酪氨酸激酶抑制劑對于晚期腎透明細(xì)胞癌的靶向治療作用[J];中國藥物應(yīng)用與監(jiān)測;2008年02期

8 藍(lán)建發(fā);陳一戎;潘華;史葆光;段國蘭;;小窩蛋白-1與血小板反應(yīng)蛋白在腎透明細(xì)胞癌中的表達(dá)及其意義[J];現(xiàn)代泌尿外科雜志;2009年03期

9 趙彥博;李麗;;腎透明細(xì)胞癌的螺旋CT表現(xiàn)與病理對照分析[J];中國煤炭工業(yè)醫(yī)學(xué)雜志;2011年11期

10 閔鋼;王小進(jìn);;腎透明細(xì)胞癌多層螺旋CT表現(xiàn)及診斷[J];中國臨床研究;2012年02期

中國重要會議論文全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 劉婧;;腎透明細(xì)胞癌伴全身轉(zhuǎn)移在全身擴(kuò)散加權(quán)成像的影像規(guī)律[A];中華醫(yī)學(xué)會第16次全國放射學(xué)學(xué)術(shù)大會論文匯編[C];2009年

2 耿江;方祖軍;吳忠;姜昊文;鄭捷;丁強(qiáng);;腎透明細(xì)胞癌術(shù)后遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移(附15例報告)[A];第十五屆全國泌尿外科學(xué)術(shù)會議論文集[C];2008年

3 桂定文;張青漢;;腎透明細(xì)胞癌頭皮轉(zhuǎn)移一例報告[A];第七次中國中西醫(yī)結(jié)合泌尿外科學(xué)術(shù)年會暨第二次廣東省中西醫(yī)結(jié)合泌尿外科學(xué)術(shù)年會論文集[C];2009年

4 凌月蓉;葉軍;;腎透明細(xì)胞癌彩色多普勒超聲表現(xiàn)分析[A];中國超聲醫(yī)學(xué)工程學(xué)會第八屆全國腹部超聲學(xué)術(shù)會議論文匯編[C];2010年

5 吳俊;梅長林;趙海丹;戴兵;劉亞偉;;多囊蛋白-1在腎透明細(xì)胞癌及常染色體顯性多囊腎病患者體液中含量的比較研究[A];中華醫(yī)學(xué)會腎臟病學(xué)分會2006年學(xué)術(shù)年會論文集[C];2006年

6 柏瑞;歐陜興;林偉光;;雙腎透明細(xì)胞癌胰腺轉(zhuǎn)移一例報告[A];中華醫(yī)學(xué)會第十三屆全國放射學(xué)大會論文匯編（下冊）[C];2006年

7 尹森琴;鄭勇明;江時忠;朱斌;陳立忠;章明圖;;腎透明細(xì)胞癌的螺旋CT表現(xiàn)與病理對照研究[A];2007年浙江省放射學(xué)學(xué)術(shù)年會論文匯編[C];2007年

8 畢偉;徐麗偉;徐春媚;董曉秋;;腎透明細(xì)胞癌超聲造影模式及定量指標(biāo)分析[A];中國超聲醫(yī)學(xué)工程學(xué)會第七屆全國腹部超聲學(xué)術(shù)會議學(xué)術(shù)論文匯編[C];2007年

9 徐麗偉;徐春媚;畢偉;董曉秋;;腎透明細(xì)胞癌超聲造影模式與其病理分化程度的相關(guān)性[A];中國超聲醫(yī)學(xué)工程學(xué)會第七屆全國腹部超聲學(xué)術(shù)會議學(xué)術(shù)論文匯編[C];2007年

10 鄭宇朋;;腎透明細(xì)胞癌三次轉(zhuǎn)移至鼻腔[A];第十五屆全國泌尿外科學(xué)術(shù)會議論文集[C];2008年

中國重要報紙全文數(shù)據(jù)庫 前2條

1 張中橋;Survivin在腎透明細(xì)胞癌中起重要作用[N];中國醫(yī)藥報;2006年

2 王茜;隱瞞病情可能更會嚇壞患者,好心態(tài)是良藥[N];新華每日電訊;2007年

中國博士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 趙作輝;腎透明細(xì)胞癌的蛋白質(zhì)組學(xué)研究[D];山東大學(xué);2015年

2 王暉;腎透明細(xì)胞癌硬脂酰輔酶A去飽和酶I對AKT信號通路的調(diào)控機(jī)制的研究[D];上海交通大學(xué);2014年

3 董德鑫;磁珠聯(lián)合MALDI-TOF MS技術(shù)在腎透明細(xì)胞癌血清和尿液差異蛋白的研究[D];中國協(xié)和醫(yī)科大學(xué);2010年

4 蔣照輝;色素上皮衍生因子在腎透明細(xì)胞癌中的表達(dá)及影響[D];復(fù)旦大學(xué);2010年

5 熊祖泉;腎透明細(xì)胞癌及癌旁組織轉(zhuǎn)錄組差異表達(dá)的初步分析[D];復(fù)旦大學(xué);2012年

6 宮方超;微陣列比較基因組雜交技術(shù)研究腎透明細(xì)胞癌的基因組異常[D];吉林大學(xué);2013年

7 楊軼凡;水通道蛋白1、2、3在腎透明細(xì)胞癌中的表達(dá)及意義[D];吉林大學(xué);2007年

8 陳起引;腎透明細(xì)胞癌血管內(nèi)皮生長因子、內(nèi)皮抑素的表達(dá)與超聲造影相關(guān)性研究[D];天津醫(yī)科大學(xué);2012年

9 王娜;應(yīng)用新一代測序技術(shù)對腎透明細(xì)胞癌轉(zhuǎn)錄組的研究[D];吉林大學(xué);2012年

10 張宗亮;Ⅰ：谷氨酰半胱氨酸連接酶在腎透明細(xì)胞癌中表達(dá)的研究；Ⅱ：原位球形回腸膀胱術(shù)的尿動力學(xué)研究[D];山東大學(xué);2013年

中國碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 秦杰;腎透明細(xì)胞癌3、7、8、9、17號染色體的雜合性缺失研究[D];大連醫(yī)科大學(xué);2009年

2 丁家寶;E2F1及EGR-1在腎透明細(xì)胞癌中的表達(dá)及意義[D];河北醫(yī)科大學(xué);2015年

3 郭巖松;ERCC1在腎透明細(xì)胞癌中的表達(dá)及其意義[D];河北醫(yī)科大學(xué);2015年

4 朱鑫;HDAC1及E2F1在腎透明細(xì)胞癌中的表達(dá)及意義[D];河北醫(yī)科大學(xué);2015年

5 趙輝;DECT皮髓早期增強(qiáng)序列圖像對腎透明細(xì)胞癌的診斷價值[D];寧夏醫(yī)科大學(xué);2015年

6 魏晉艷;能譜CT成像在腎透明細(xì)胞癌術(shù)前分級評估 中的價值研究[D];蘭州大學(xué);2015年

7 高裕;CREPT在腎透明細(xì)胞癌的作用機(jī)制研究[D];寧夏醫(yī)科大學(xué);2015年

8 王鵬;緊密連接蛋claudin-4在腎透明細(xì)胞癌中的表達(dá)及其預(yù)后意義[D];中國人民解放軍軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院;2015年

9 牛少曦;miR-223在腎透明細(xì)胞癌中的表達(dá)和作用[D];中國人民解放軍醫(yī)學(xué)院;2015年

10 李金濤;腫瘤干細(xì)胞ALDH1和ABCG2在腎透明細(xì)胞癌中的表達(dá)及其臨床意義[D];新鄉(xiāng)醫(yī)學(xué)院;2015年

  本文關(guān)鍵詞：RNA結(jié)合蛋白QKI抑制腎透明細(xì)胞癌演變的機(jī)制探究，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

本文編號：498018