家蠅幼蟲抗菌肽defensin對食管癌細胞增殖、侵襲遷移的抑制作用研究
發(fā)布時間:2017-06-29 13:15
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【摘要】:目的:明確家蠅防御素成熟蛋白MD對食管癌細胞的抑制作用以及其可能的作用機制。方法:1.將成功構(gòu)建的p GEX-6P-1/MD表達載體轉(zhuǎn)化入大腸桿菌感受態(tài)細胞BL21,IPTG誘導MD蛋白表達,純化目的蛋白。2.將不同濃度的MD蛋白作用于食管癌細胞以及正常食管上皮細胞,檢測細胞增殖、侵襲遷移能力。3.利用原子力顯微鏡(Atomic Force Microscope,AFM)檢測MD蛋白作用前后食管癌細胞與正常食管上皮細胞的生物力學改變。結(jié)果:1.MD蛋白能抑制食管癌細胞KYSE150增殖,但對正常食管上皮細胞SHEE無影響;2.家蠅防御素成熟蛋白MD能夠抑制食管癌細胞KYSE150侵襲能力,但對正常食管上皮細胞SHEE無明顯影響;3.家蠅防御素成熟蛋白MD能夠抑制食管癌細胞KYSE150遷移能力,但對正常食管上皮細胞SHEE無明顯影響影響;4.原子力顯微鏡觀察家蠅防御素成熟蛋白MD作用前后的細胞形態(tài)發(fā)現(xiàn),MD蛋白作用后食管癌細胞KYSE150表面變粗糙,而正常食管上皮細胞SHEE無明顯變化;5.作用后食管癌細胞KYSE150粘性升高,而正常食管上皮SHEE無明顯變化;6.作用后食管癌細胞KYSE150彈力降低,而正常食管上皮細胞SHEE無明顯變化。結(jié)論:MD蛋白通過增高食管癌細胞細胞膜表面粘性、降低細胞膜表面彈力來抑制腫瘤細胞的增殖、侵襲遷移,發(fā)揮腫瘤抑制作用,且不影響正常細胞,可以作為腫瘤靶向治療的替代藥物。
【關鍵詞】:抗菌肽 防御素 食管癌細胞 增殖 侵襲遷移 原子力顯微鏡
【學位授予單位】:山西醫(yī)科大學
【學位級別】:碩士
【學位授予年份】:2015
【分類號】:R735.1
【目錄】:
- 中文摘要6-8
- 英文摘要8-10
- 常用縮略詞中英文對照表10-11
- 前言11-12
- 1 實驗材料與方法12-27
- 1.1 實驗材料12-18
- 1.2 實驗方法18-24
- 1.3 細胞功能學相關實驗24-26
- 1.4 原子力顯微鏡檢測26
- 1.5 數(shù)據(jù)統(tǒng)計分析26-27
- 2 結(jié)果27-33
- 2.1 MD蛋白的誘導表達與純化鑒定27
- 2.2 MD蛋白能抑制食管癌細胞的增殖能力,并呈現(xiàn)出劑量依賴性,但對正常食管上皮細胞無影響27-28
- 2.3 家蠅防御素成熟蛋白MD能抑制食管癌細胞的遷移能力,且對正常食管上皮細胞無影響28-29
- 2.4 MD蛋白抑制食管癌細胞侵襲能力,對正常食管上皮細胞無影響29-30
- 2.5 MD蛋白作用后KYSE150 細胞膜表面粗糙度增加,而SHEE細胞膜表面粗糙度變化不明顯30-31
- 2.6 MD蛋白作用后KYSE150 細胞膜粘性增大,而SHEE細胞膜粘性無明顯變化31
- 2.7 家蠅防御素成熟蛋白MD作用后KYSE150 彈力下降,而SHEE無明顯變化31-33
- 3 討論33-36
- 4 結(jié)論36-37
- 參考文獻37-39
- 綜述39-50
- 參考文獻45-50
- 致謝50-51
- 研究成果51-52
- 個人簡歷52
【參考文獻】
中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前4條
1 劉麗君,彭建新,洪華珠,葉雯,喬媛媛;線粒體在細胞凋亡中的變化與作用[J];細胞生物學雜志;2005年02期
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4 金小寶;朱家勇;馬艷;劉雷山;;家蠅抗菌肽基因Cecropin在COS-7細胞中的表達及產(chǎn)物活性初步研究[J];中國人獸共患病學報;2007年06期
本文關鍵詞:家蠅幼蟲抗菌肽defensin對食管癌細胞增殖、侵襲遷移的抑制作用研究,由筆耕文化傳播整理發(fā)布。
本文編號:498033
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