本文關鍵詞：TRA2β與膠質(zhì)瘤的相關性研究，，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：目的:研究TRA2β在膠質(zhì)瘤組織中的表達及其在膠質(zhì)瘤細胞中對腫瘤生物學特征的影響,旨在尋找與膠質(zhì)瘤發(fā)生、發(fā)展相關的新的靶基因。方法:(1)運用Western blot方法,檢測在人正常腦組織和膠質(zhì)瘤組織中TRA2β的表達情況;收集80例膠質(zhì)瘤手術標本,應用免疫組化方法檢測TRA2β和增殖指標Ki-67的表達情況,將兩者的表達情況與患者的臨床病理因素進行相關性分析。通過Kaplan-Meier法分析TRA2β的表達與膠質(zhì)瘤患者的生存率之間的相關性;(2)選取高表達TRA2β的膠質(zhì)瘤細胞株作為研究對象,建立血清饑餓釋放模型,處理后運用Western blot方法檢測TRA2β蛋白表達水平變化,探究其在膠質(zhì)瘤細胞增殖中的潛在作用。(3)通過小干擾的方式下調(diào)細胞中TRA2β的內(nèi)源性表達,然后采用細胞流式分析、CCK-8、Transwell等方法檢測TRA2β表達的下調(diào)對細胞周期、增殖以及遷移的影響。結果:(1)Western blot及免疫組化均顯示,TRA2β在膠質(zhì)瘤組織中的表達明顯增高。統(tǒng)計學分析提示TRA2β的表達強度與膠質(zhì)瘤組織學分級之間的關系有統(tǒng)計學意義(P0.05),相關性分析表明TRA2β與Ki-67表達呈正相關(r=0.440;P0.045);Kaplan-Meier分析顯示TRA2β在膠質(zhì)瘤中的高表達與患者低生存率的顯著相關(P0.01);(2)通過血清饑餓的方式使膠質(zhì)瘤細胞生長周期停滯,血清釋放后刺激細胞增殖;Western blot結果顯示TRA2βPCNA等蛋白隨著細胞周期的進展表達增加;si RNA分析顯示,TRA2β表達的下調(diào)可引起PCNA、cyclin A表達降低,同時使細胞周期的停滯、增殖水平及遷移能力的下降。結論:(1)TRA2β在膠質(zhì)瘤組織中表達增加;TRA2β的高表達增加腫瘤分級正相關并提示不良預后;說明TRA2β可能與膠質(zhì)瘤的發(fā)生發(fā)展相關。(2)TRA2β的表達在血清饑餓的膠質(zhì)瘤細胞中逐漸增加,提示其與細胞的增殖過程相關。si RNA干擾TRA2β的內(nèi)源性表達后,可能通過使膠質(zhì)瘤細胞周期停滯來影響其增殖;TRA2β表達下調(diào)后,細胞增值、遷移能力下降。
【關鍵詞】：膠質(zhì)瘤 TRA2β 增殖 遷移 預后
【學位授予單位】：蘇州大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2015
【分類號】：R739.41
【目錄】：

• 摘要4-6
• Abstract6-10
• 第一章 前言10-14
• 論文的主要研究內(nèi)容13-14
• 第二章 材料和方法14-29
• 2.1 材料14-19
• 2.1.1 組織標本14
• 2.1.2 細胞14
• 2.1.3 試劑14-19
• 2.1.4 實驗儀器19
• 2.2 方法19-29
• 2.2.1 Western blot操作流程19-21
• 2.2.2 病理切片的免疫組化21-24
• 2.2.3 細胞株的培養(yǎng)24
• 2.2.4 TRA2β基因的si-RNA質(zhì)粒24-25
• 2.2.5 利用脂質(zhì)體Lipofectamine 2000 介導基因轉染25
• 2.2.6 RT-PCR25-27
• 2.2.7 流式細胞儀（FCM）檢測細胞周期的分布27-28
• 2.2.8 CCK-8（cell counting kit-8）法檢測細胞增殖活性28
• 2.2.9 Transwell遷移實驗28-29
• 第三章 結果29-39
• 3.1 TRA2β在膠質(zhì)瘤組織中的表達29-31
• 3.1.1 Western blot檢測TRA2β在膠質(zhì)瘤中的表達情況29
• 3.1.2 免疫組化技術檢測TRA2β和Ki-67 在膠質(zhì)瘤石蠟切片組織中的表達29-30
• 3.1.3 TRA2β和Ki-67 在膠質(zhì)瘤組織中表達的相關性分析30-31
• 3.2 TRA2β與臨床病理學參數(shù)的關系31-32
• 3.3 TRA2β的表達對膠質(zhì)瘤患者生存率的影響32
• 3.4 TRA2β在膠質(zhì)瘤細胞中的表達32-33
• 3.5 TRA2β對膠質(zhì)瘤細胞增值的影響33-37
• 3.5.0 血清饑餓釋放對U87 細胞株的細胞周期影響33-34
• 3.5.1 TRA2β在U87 細胞增殖過程中表達的變化34
• 3.5.2 TRA2β表達下調(diào)對膠質(zhì)瘤細胞周期及其相關蛋白的影響34-36
• 3.5.3 CCK-8 法檢測TRA2β與膠質(zhì)瘤細胞株增殖情況36-37
• 3.6 TRA2β對膠質(zhì)瘤細胞遷移的影響37-39
• 第四章 討論39-43
• 第五章 結論43-44
• 參考文獻44-49
• 英文縮寫詞表49-51
• 綜述51-63
• 綜述參考文獻59-63
• 攻讀碩士期間公開發(fā)表的論文63-64
• 致謝64-65

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