TRA2β與膠質(zhì)瘤的相關(guān)性研究
本文關(guān)鍵詞:TRA2β與膠質(zhì)瘤的相關(guān)性研究,,由筆耕文化傳播整理發(fā)布。
【摘要】:目的:研究TRA2β在膠質(zhì)瘤組織中的表達(dá)及其在膠質(zhì)瘤細(xì)胞中對(duì)腫瘤生物學(xué)特征的影響,旨在尋找與膠質(zhì)瘤發(fā)生、發(fā)展相關(guān)的新的靶基因。方法:(1)運(yùn)用Western blot方法,檢測(cè)在人正常腦組織和膠質(zhì)瘤組織中TRA2β的表達(dá)情況;收集80例膠質(zhì)瘤手術(shù)標(biāo)本,應(yīng)用免疫組化方法檢測(cè)TRA2β和增殖指標(biāo)Ki-67的表達(dá)情況,將兩者的表達(dá)情況與患者的臨床病理因素進(jìn)行相關(guān)性分析。通過(guò)Kaplan-Meier法分析TRA2β的表達(dá)與膠質(zhì)瘤患者的生存率之間的相關(guān)性;(2)選取高表達(dá)TRA2β的膠質(zhì)瘤細(xì)胞株作為研究對(duì)象,建立血清饑餓釋放模型,處理后運(yùn)用Western blot方法檢測(cè)TRA2β蛋白表達(dá)水平變化,探究其在膠質(zhì)瘤細(xì)胞增殖中的潛在作用。(3)通過(guò)小干擾的方式下調(diào)細(xì)胞中TRA2β的內(nèi)源性表達(dá),然后采用細(xì)胞流式分析、CCK-8、Transwell等方法檢測(cè)TRA2β表達(dá)的下調(diào)對(duì)細(xì)胞周期、增殖以及遷移的影響。結(jié)果:(1)Western blot及免疫組化均顯示,TRA2β在膠質(zhì)瘤組織中的表達(dá)明顯增高。統(tǒng)計(jì)學(xué)分析提示TRA2β的表達(dá)強(qiáng)度與膠質(zhì)瘤組織學(xué)分級(jí)之間的關(guān)系有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05),相關(guān)性分析表明TRA2β與Ki-67表達(dá)呈正相關(guān)(r=0.440;P0.045);Kaplan-Meier分析顯示TRA2β在膠質(zhì)瘤中的高表達(dá)與患者低生存率的顯著相關(guān)(P0.01);(2)通過(guò)血清饑餓的方式使膠質(zhì)瘤細(xì)胞生長(zhǎng)周期停滯,血清釋放后刺激細(xì)胞增殖;Western blot結(jié)果顯示TRA2βPCNA等蛋白隨著細(xì)胞周期的進(jìn)展表達(dá)增加;si RNA分析顯示,TRA2β表達(dá)的下調(diào)可引起PCNA、cyclin A表達(dá)降低,同時(shí)使細(xì)胞周期的停滯、增殖水平及遷移能力的下降。結(jié)論:(1)TRA2β在膠質(zhì)瘤組織中表達(dá)增加;TRA2β的高表達(dá)增加腫瘤分級(jí)正相關(guān)并提示不良預(yù)后;說(shuō)明TRA2β可能與膠質(zhì)瘤的發(fā)生發(fā)展相關(guān)。(2)TRA2β的表達(dá)在血清饑餓的膠質(zhì)瘤細(xì)胞中逐漸增加,提示其與細(xì)胞的增殖過(guò)程相關(guān)。si RNA干擾TRA2β的內(nèi)源性表達(dá)后,可能通過(guò)使膠質(zhì)瘤細(xì)胞周期停滯來(lái)影響其增殖;TRA2β表達(dá)下調(diào)后,細(xì)胞增值、遷移能力下降。
【關(guān)鍵詞】:膠質(zhì)瘤 TRA2β 增殖 遷移 預(yù)后
【學(xué)位授予單位】:蘇州大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2015
【分類號(hào)】:R739.41
【目錄】:
- 摘要4-6
- Abstract6-10
- 第一章 前言10-14
- 論文的主要研究?jī)?nèi)容13-14
- 第二章 材料和方法14-29
- 2.1 材料14-19
- 2.1.1 組織標(biāo)本14
- 2.1.2 細(xì)胞14
- 2.1.3 試劑14-19
- 2.1.4 實(shí)驗(yàn)儀器19
- 2.2 方法19-29
- 2.2.1 Western blot操作流程19-21
- 2.2.2 病理切片的免疫組化21-24
- 2.2.3 細(xì)胞株的培養(yǎng)24
- 2.2.4 TRA2β基因的si-RNA質(zhì)粒24-25
- 2.2.5 利用脂質(zhì)體Lipofectamine 2000 介導(dǎo)基因轉(zhuǎn)染25
- 2.2.6 RT-PCR25-27
- 2.2.7 流式細(xì)胞儀(FCM)檢測(cè)細(xì)胞周期的分布27-28
- 2.2.8 CCK-8(cell counting kit-8)法檢測(cè)細(xì)胞增殖活性28
- 2.2.9 Transwell遷移實(shí)驗(yàn)28-29
- 第三章 結(jié)果29-39
- 3.1 TRA2β在膠質(zhì)瘤組織中的表達(dá)29-31
- 3.1.1 Western blot檢測(cè)TRA2β在膠質(zhì)瘤中的表達(dá)情況29
- 3.1.2 免疫組化技術(shù)檢測(cè)TRA2β和Ki-67 在膠質(zhì)瘤石蠟切片組織中的表達(dá)29-30
- 3.1.3 TRA2β和Ki-67 在膠質(zhì)瘤組織中表達(dá)的相關(guān)性分析30-31
- 3.2 TRA2β與臨床病理學(xué)參數(shù)的關(guān)系31-32
- 3.3 TRA2β的表達(dá)對(duì)膠質(zhì)瘤患者生存率的影響32
- 3.4 TRA2β在膠質(zhì)瘤細(xì)胞中的表達(dá)32-33
- 3.5 TRA2β對(duì)膠質(zhì)瘤細(xì)胞增值的影響33-37
- 3.5.0 血清饑餓釋放對(duì)U87 細(xì)胞株的細(xì)胞周期影響33-34
- 3.5.1 TRA2β在U87 細(xì)胞增殖過(guò)程中表達(dá)的變化34
- 3.5.2 TRA2β表達(dá)下調(diào)對(duì)膠質(zhì)瘤細(xì)胞周期及其相關(guān)蛋白的影響34-36
- 3.5.3 CCK-8 法檢測(cè)TRA2β與膠質(zhì)瘤細(xì)胞株增殖情況36-37
- 3.6 TRA2β對(duì)膠質(zhì)瘤細(xì)胞遷移的影響37-39
- 第四章 討論39-43
- 第五章 結(jié)論43-44
- 參考文獻(xiàn)44-49
- 英文縮寫詞表49-51
- 綜述51-63
- 綜述參考文獻(xiàn)59-63
- 攻讀碩士期間公開(kāi)發(fā)表的論文63-64
- 致謝64-65
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