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嗎啡和氯胺酮對結直腸癌患者離體T輔助淋巴細胞分化的影響

發(fā)布時間:2017-06-26 15:15

  本文關鍵詞:嗎啡和氯胺酮對結直腸癌患者離體T輔助淋巴細胞分化的影響,由筆耕文化傳播整理發(fā)布。


【摘要】:目的探討結直腸癌患者免疫系統(tǒng)中輔助性T淋巴細胞亞群(Th1細胞和Th2細胞)的變化,以及嗎啡和不同濃度氯胺酮對結直腸癌患者Th1細胞和Th2細胞的影響。方法健康志愿者20例,結直腸癌患者20例,年齡45-65歲,BMI 18-25 kg/m2。清晨空腹下抽取受試者靜脈血(健康志愿者10m L,結直腸癌患者20m L),用淋巴細胞分離液分離外周血單個核細胞(PBMCs)。臺盼藍染色法檢測細胞存活率大于95%。將健康志愿者每份血樣分離出的PBMCs分為2組(n=20):對照組(P1組、C1組)加入等容積0.9%氯化鈉。將結直腸癌患者每份血樣分離出的PBMCs隨機分為6組(n=20):嗎啡組(M組,終濃度為50ng/m L);氯胺酮不同終濃度組(K1組、K2組和K3組,終濃度分別為25μM,50μM,100μM);對照組(P2組、C2組)加入等容積0.9%氯化鈉。孵育0.5h后,分別向各組中加入佛波醇-十四酸酯-乙酸酯(PMA)和離子霉素2μL/mL及相對應濃度的嗎啡、氯胺酮或0.9%氯化鈉(P1組、P2組除外),P1組和P2組中均不加入PMA和離子霉素。各組細胞繼續(xù)孵育。4h后收集細胞。采用三色熒光流式細胞技術(CD3+CD8-IFN-γ+標記為Th1細胞,CD3+CD8-IL-4+標記為Th2細胞)測定Th1細胞和Th2細胞數(shù)量比例,并計算二者比值(Th1/Th2)。結果在健康志愿者組中,加刺激劑組C1組與未加刺激劑P1組比較,Th1細胞和Th2細胞數(shù)量明顯增加(均P0.001)。在結直腸癌組中,加刺激劑組C2組與未加刺激劑P2組比較,Th1細胞和Th2細胞數(shù)量明顯增加(均P0.001)。在PMA和離子霉素刺激下,結直腸癌組中C2組與健康志愿者組中C1組相比,Th1細胞數(shù)量和Th1/Th2比值降低(均P0.001),差異有統(tǒng)計學意義。結直腸癌M組與其對照組C2組比較,Th1細胞、Th1/Th2比值降低(均P0.001),Th2細胞數(shù)量無明顯變化(P=0.37)。與對照組C2組比較,結直腸癌K1組中Th1細胞、Th2細胞和Th1/Th2比值均無明顯變化(P=0.57、0.71、0.81);K2組中Th1/Th2比值由1.63升高至1.71(P0.01);K3組中Th1細胞、Th2細胞數(shù)量降低,Th1/Th2比值升高(均P0.01)。隨著氯胺酮濃度的增加,Th1/Th2比值不斷增高(從1.64 25μM到1.71 50μM,從1.71 50μM到2.03 100μM,P值均0.01)。結論結直腸癌誘導免疫應答,使Th1/Th2平衡向Th2偏移。在體外PMA和離子霉素的刺激下,小劑量氯胺酮對結直腸患者的Th1細胞數(shù)量,Th2細胞數(shù)量,Th1/Th2比值影響不大;鎮(zhèn)痛濃度下嗎啡和氯胺酮能抑制Th細胞分化,但嗎啡降低Th1/Th2比值,氯胺酮增加Th1/Th2比值,且隨著濃度的增加,氯胺酮對Th細胞分化的影響越大。本研究結果提示小劑量氯胺酮與嗎啡聯(lián)合應用在提高癌痛患者鎮(zhèn)痛質量,減少其不良反應發(fā)生的前提下,并不會增加對免疫系統(tǒng)中Th細胞分化的抑制程度。
【關鍵詞】:嗎啡 氯胺酮 輔助性T細胞 Th1/Th2比值 結直腸癌
【學位授予單位】:濟南大學
【學位級別】:碩士
【學位授予年份】:2016
【分類號】:R614;R735.34
【目錄】:
  • 摘要6-8
  • Abstract8-10
  • 主要符號表10-11
  • 前言11-13
  • 第一章 實驗材料與方法13-19
  • 1.1 材料13-14
  • 1.2 實驗方法14-19
  • 第二章 結果19-24
  • 2.1 研究對象臨床特點19
  • 2.2 各組細胞活性19
  • 2.3 PMA和離子霉素刺激前,各組CD3~+細胞數(shù)量19
  • 2.4 有無PMA和離子霉素刺激下,正常對照組與結直腸癌對照組Th細胞亞群比較19
  • 2.5 PMA和離子霉素刺激下,,結直腸癌組中嗎啡對Th1細胞和Th2細胞的影響19-20
  • 2.6 PMA和離子霉素刺激下,結直腸癌組中氯胺酮對Th1細胞和Th2細胞的影響20-24
  • 第三章 討論24-31
  • 3.1 結直腸癌的流行病學24
  • 3.2 Th細胞分化及其在結直腸癌中免疫調節(jié)作用24-26
  • 3.3 流式細胞術用于Th細胞分化亞群的檢測26-27
  • 3.4 疼痛與免疫27-28
  • 3.5 嗎啡與免疫28-29
  • 3.6 氯胺酮與免疫29-31
  • 第四章 結論31-32
  • 參考文獻32-36
  • 附錄36-38
  • 攻讀學位期間取得的研究成果38-39
  • 致謝39

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  本文關鍵詞:嗎啡和氯胺酮對結直腸癌患者離體T輔助淋巴細胞分化的影響,由筆耕文化傳播整理發(fā)布。



本文編號:486624

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