白血病腫瘤相關(guān)抗原特異性細胞毒T細胞的體外擴增及殺傷功能的實驗研究
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【摘要】:目的:探索體外擴增白血病腫瘤相關(guān)抗原特異性細胞毒T細胞(tumor-associated antigen-specific cytotoxic T lymphocytes,TAA-CTL)的可行性,并驗證其特異性殺傷作用。方法:采用密度梯度離心法分離出健康志愿者外周血單個核細胞,誘導培養(yǎng)樹突狀細胞(dendritic cells,DC)并負載白血病相關(guān)抗原WT1、PRAME、NY-ESO-1混合多肽,然后與自體T淋巴細胞共培育,擴增出TAA-CTL。用流式細胞術(shù)檢測TAA-CTL表型及多種細胞因子的分泌率,細胞毒實驗檢測TAA-CTL對負載腫瘤相關(guān)抗原的自體靶細胞的殺傷力。結(jié)果:1體外誘導培養(yǎng)的TAACTL擴增倍數(shù)為3.81±1.61;流式細胞術(shù)檢測其中CD3+細胞平均為(97.22±0.71)%,CD3+CD4+占(41.47±27.08)%,CD3+CD8+占(56.40±11.15)%,CD3-CD56+占(0.50±0.31)%,CD19+僅占(0.14±0.20)%,與對照組細胞表型分析比較差異無統(tǒng)計學意義(P0.05)。2流式細胞術(shù)檢測經(jīng)抗原刺激后TAA-CTL分泌的胞內(nèi)細胞因子,CD8+TAA-CTL分泌的IFN-γ和TNF-α水平分別為(27.67±2.21)%和(34.2±0.71)%,CD4+TAA-CTL分泌的IFN-γ和TNF-α分別為(21.6±2.55)%和(9.97±3.44)%;對照組CD8+CTL分泌的IFN-γ和TNF-α水平分別為(1.36±0.04)%和(5.58±0.03)%,CD4+CTL分泌的IFN-γ和TNF-α分別為(0.91±0.06)%和(1.60±0.07)%,均明顯低于TAA-CTL組,其差異有統(tǒng)計學意義(P0.01)。TAA-CTL在效靶比為5∶1、10∶1、20∶1和40∶1時對負載TAA的自體靶細胞的殺傷率分別為(26.85±5.25)%、(60.55±2.45)%、(67.4±3.60)%和(77.00±1.00)%,對未負載TAA的自體靶細胞未見明顯殺傷作用(P0.05)。結(jié)論:來源于健康志愿者的外周血單個核細胞體外可以成功誘導擴增出TAA-CTL并具有特異性殺傷功能。
【作者單位】: 安徽醫(yī)科大學附屬省立醫(yī)院安徽省立醫(yī)院血液科;
【關(guān)鍵詞】: 急性白血病 腫瘤相關(guān)抗原 細胞毒T淋巴細胞 免疫治療
【分類號】:R733.71
【正文快照】: J Exp Hematol 2015;(3):814-820急性白血病高強度化療的應(yīng)用,使急性白血病的完全緩解率高達60%-80%,除M3及兒童B-ALL外,但緩解后復發(fā)率高仍是臨床工作中面臨的棘手問題。近年來,細胞免疫療法治療急性白血病受到越來越多的關(guān)注。樹突狀細胞(DC)作為體內(nèi)最強的抗原提呈細胞,研
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本文編號:484854
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