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白血病腫瘤相關(guān)抗原特異性細(xì)胞毒T細(xì)胞的體外擴(kuò)增及殺傷功能的實(shí)驗(yàn)研究

發(fā)布時(shí)間:2017-06-26 05:03

  本文關(guān)鍵詞:白血病腫瘤相關(guān)抗原特異性細(xì)胞毒T細(xì)胞的體外擴(kuò)增及殺傷功能的實(shí)驗(yàn)研究,,由筆耕文化傳播整理發(fā)布。


【摘要】:目的:探索體外擴(kuò)增白血病腫瘤相關(guān)抗原特異性細(xì)胞毒T細(xì)胞(tumor-associated antigen-specific cytotoxic T lymphocytes,TAA-CTL)的可行性,并驗(yàn)證其特異性殺傷作用。方法:采用密度梯度離心法分離出健康志愿者外周血單個(gè)核細(xì)胞,誘導(dǎo)培養(yǎng)樹(shù)突狀細(xì)胞(dendritic cells,DC)并負(fù)載白血病相關(guān)抗原WT1、PRAME、NY-ESO-1混合多肽,然后與自體T淋巴細(xì)胞共培育,擴(kuò)增出TAA-CTL。用流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)TAA-CTL表型及多種細(xì)胞因子的分泌率,細(xì)胞毒實(shí)驗(yàn)檢測(cè)TAA-CTL對(duì)負(fù)載腫瘤相關(guān)抗原的自體靶細(xì)胞的殺傷力。結(jié)果:1體外誘導(dǎo)培養(yǎng)的TAACTL擴(kuò)增倍數(shù)為3.81±1.61;流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)其中CD3+細(xì)胞平均為(97.22±0.71)%,CD3+CD4+占(41.47±27.08)%,CD3+CD8+占(56.40±11.15)%,CD3-CD56+占(0.50±0.31)%,CD19+僅占(0.14±0.20)%,與對(duì)照組細(xì)胞表型分析比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。2流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)經(jīng)抗原刺激后TAA-CTL分泌的胞內(nèi)細(xì)胞因子,CD8+TAA-CTL分泌的IFN-γ和TNF-α水平分別為(27.67±2.21)%和(34.2±0.71)%,CD4+TAA-CTL分泌的IFN-γ和TNF-α分別為(21.6±2.55)%和(9.97±3.44)%;對(duì)照組CD8+CTL分泌的IFN-γ和TNF-α水平分別為(1.36±0.04)%和(5.58±0.03)%,CD4+CTL分泌的IFN-γ和TNF-α分別為(0.91±0.06)%和(1.60±0.07)%,均明顯低于TAA-CTL組,其差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.01)。TAA-CTL在效靶比為5∶1、10∶1、20∶1和40∶1時(shí)對(duì)負(fù)載TAA的自體靶細(xì)胞的殺傷率分別為(26.85±5.25)%、(60.55±2.45)%、(67.4±3.60)%和(77.00±1.00)%,對(duì)未負(fù)載TAA的自體靶細(xì)胞未見(jiàn)明顯殺傷作用(P0.05)。結(jié)論:來(lái)源于健康志愿者的外周血單個(gè)核細(xì)胞體外可以成功誘導(dǎo)擴(kuò)增出TAA-CTL并具有特異性殺傷功能。
【作者單位】: 安徽醫(yī)科大學(xué)附屬省立醫(yī)院安徽省立醫(yī)院血液科;
【關(guān)鍵詞】急性白血病 腫瘤相關(guān)抗原 細(xì)胞毒T淋巴細(xì)胞 免疫治療
【分類號(hào)】:R733.71
【正文快照】: J Exp Hematol 2015;(3):814-820急性白血病高強(qiáng)度化療的應(yīng)用,使急性白血病的完全緩解率高達(dá)60%-80%,除M3及兒童B-ALL外,但緩解后復(fù)發(fā)率高仍是臨床工作中面臨的棘手問(wèn)題。近年來(lái),細(xì)胞免疫療法治療急性白血病受到越來(lái)越多的關(guān)注。樹(shù)突狀細(xì)胞(DC)作為體內(nèi)最強(qiáng)的抗原提呈細(xì)胞,研

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  本文關(guān)鍵詞:白血病腫瘤相關(guān)抗原特異性細(xì)胞毒T細(xì)胞的體外擴(kuò)增及殺傷功能的實(shí)驗(yàn)研究,由筆耕文化傳播整理發(fā)布。



本文編號(hào):484854

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