免疫金納米籠子介導(dǎo)熱療誘導(dǎo)人乳腺癌細(xì)胞凋亡的研究
發(fā)布時(shí)間:2017-06-23 21:04
本文關(guān)鍵詞:免疫金納米籠子介導(dǎo)熱療誘導(dǎo)人乳腺癌細(xì)胞凋亡的研究,,由筆耕文化傳播整理發(fā)布。
【摘要】:目的:經(jīng)過(guò)激光照射之后,免疫金納米籠子可以將光能量轉(zhuǎn)化為熱能從而殺死腫瘤細(xì)胞。由于免疫金納米籠子具有上述物理和生物學(xué)特性,本實(shí)驗(yàn)觀察了將Anti-CK19抗體鏈接到金納米籠制成的符合材料的細(xì)胞毒性,并探討其對(duì)人乳腺癌細(xì)胞靶向殺傷效應(yīng),我們以MCF-7、MDA-MB-231、MCF-7/TMA三種細(xì)胞為例,檢測(cè)了免疫金納米籠子對(duì)人不同乳腺癌細(xì)胞株熱療效果的差異性,并檢測(cè)熱療后細(xì)胞內(nèi)caspase-9蛋白的表達(dá)量,初步探索這種殺傷乳腺癌細(xì)胞的可能的信號(hào)通路,本實(shí)驗(yàn)可能為這種納米粒子的進(jìn)一步研究和應(yīng)用提供相應(yīng)的理論學(xué)基礎(chǔ)。方法:免疫組化方法檢測(cè)驗(yàn)證了MCF-7細(xì)胞膜表面表達(dá)CK19抗原,我們將Anti-CK19抗體連接到金納米籠上,制成了具有生物靶向性能的納米結(jié)構(gòu)。我們將近紅外光的功率密度設(shè)定為1.5 W/cm2、其波長(zhǎng)調(diào)至為808 nm,用其照射鏈接有免疫金納米籠的細(xì)胞,時(shí)間為30 min;在熒光顯微鏡下觀察免疫金納米籠子光熱殺傷乳腺癌細(xì)胞的效果,我們用AV/PI染色后在流式細(xì)胞儀上檢測(cè)其對(duì)上述三種乳腺癌細(xì)胞株光熱殺傷的效果是否具有差異性,用免疫組化方法檢測(cè)在不同納米籠濃度下熱療后乳腺癌細(xì)胞內(nèi)caspase-9蛋白的表達(dá)量,通過(guò)MTT法探究納米籠子對(duì)MCF-7細(xì)胞的濃度-毒性效應(yīng)。結(jié)果:本實(shí)驗(yàn)通過(guò)免疫組化的方法證實(shí)了MCF-7細(xì)胞膜富含表達(dá)CK19抗原。免疫金納米籠子通過(guò)光熱作用可以明顯提高溫度達(dá)到殺傷乳腺癌細(xì)胞效果;該光熱作用所導(dǎo)致的凋亡率在MCF-7、MCF-7/TAM、MDA-MB-231中無(wú)明顯差異(F=0.84,P=0.456);在溫度為37℃時(shí),caspase-9的表達(dá)量較低,在低于43℃時(shí),隨著溫度的升高caspase-9的表達(dá)量明顯升高(F=14.914,P=0.000);MTT法顯示高劑量免疫金納米籠子可抑制乳腺癌細(xì)胞的增殖(F=5.774,P=0.000),且存在時(shí)間-效應(yīng)(F=42.378,P=0.000)和劑量-效應(yīng)(F=76.440,P=0.000)關(guān)系。結(jié)論:(1)本實(shí)驗(yàn)證實(shí)了人乳腺癌細(xì)胞株MCF-7細(xì)胞膜表面富含CK19抗原;(2)本實(shí)驗(yàn)證實(shí)了用上述功率密度和波長(zhǎng)的激光照射鏈接有免疫金納米籠子的細(xì)胞,可以經(jīng)過(guò)光熱轉(zhuǎn)化作用殺傷細(xì)胞,且對(duì)本實(shí)驗(yàn)證實(shí)功率密度為1.5 W/cm2、波長(zhǎng)為808 nm的激光對(duì)正常乳腺癌細(xì)胞是安全有效的;(3)上調(diào)caspase-9的表達(dá)是免疫金納米籠子介導(dǎo)的熱療誘導(dǎo)乳腺癌細(xì)胞凋亡的機(jī)制之一;(4)免疫金納米籠介導(dǎo)的熱療效果與細(xì)胞的耐藥性以及雌激素受體是否陽(yáng)性均無(wú)關(guān)。
【關(guān)鍵詞】:光熱治療 金納米籠 乳腺癌 生物毒性 caspase-9
【學(xué)位授予單位】:安徽醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2015
【分類號(hào)】:R737.9
【目錄】:
- 英文縮略詞表5-6
- 中文摘要6-8
- Abstract8-10
- 引言10-13
- 材料和方法13-24
- 結(jié)果24-29
- 討論29-33
- 結(jié)論33-34
- 參考文獻(xiàn)34-40
- 附錄40-42
- 致謝42-43
- 綜述43-53
- 參考文獻(xiàn)49-53
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1 楊守京,劉彥仿;用直接免疫金銀法檢測(cè)組織內(nèi)流行性出血熱病毒抗原[J];第四軍醫(yī)大學(xué)學(xué)報(bào);1992年01期
2 張淑春,肖煥才,張薇,安連兵;電鏡免疫金微波快速染色法[J];第一軍醫(yī)大學(xué)學(xué)報(bào);1993年04期
3 王伯l
本文編號(hào):476280
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