本文關鍵詞：地西他濱與硼替佐米聯合治療急性T淋巴細胞白血病的機制研究，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：目的：白血病是血液系統(tǒng)的一種惡性疾病,病情險惡,嚴重威脅人類的健康。白血病細胞由于自我更新能力增強,增殖失控,分化障礙,凋亡受阻,侵襲并破壞人類各臟器系統(tǒng)。隨著科學技術的進步,目前對白血病的認識已更加深入、系統(tǒng)和全面,但仍存在許多亟待解決的問題,如：白血病起病的原因、發(fā)病機制、如何預防及徹底根治等�；熀驮煅杉毎浦踩允悄壳鞍籽≈委煹闹饕椒�,隨著多項新技術的開展,白血病的療效得到了提升。如生物靶向治療：抗CD20、 CD33、CD52的單克隆抗體,針對BCR/ABL、PML-RARa融合基因靶向藥物的應用,凋亡調節(jié)因子的靶向治療(針對bel-2)等,使白血病患者明顯受益。盡管如此,但成人急性T淋巴細胞白血病(T-ALL)的治療目前仍缺乏有效的治療手段,且預后差。我們實驗室前期工作已證實硼替佐米可抑制急性T淋巴細胞白血病的腫瘤性增生,但移植后的致瘤小鼠最終仍死于白血病,考慮存在其它的致瘤機制,值得進一步探討。尋找治療急性T淋巴細胞白血病的新的作用靶點,具有重大意義。方法：CCK-8法檢測去甲基化藥物地西他濱或聯合硼替佐米對Notch1高表達的急性T淋巴細胞白血病細胞株MOLT-4的增殖的影響Annexin-V/PI雙染法檢測細胞凋亡；PI染色檢測細胞周期；二代測序／轉錄組高通量測序法篩選用藥前后兩組間差異基因；RT-PCR法檢測Pax5. NF-κB(p65)及Notch1下游靶基因Hes1 mRNA的表達情況；構建攜帶Pax5過表達基因載體的慢病毒：侵染MOLT-4細胞；CCK-8法檢測細胞增殖情況；RT-PCR法檢測目的基因Pax5 mRNA的表達,蛋白免疫印跡法(Western blot)檢測Notchl通路下游蛋白如Hes1及凋亡蛋白如Caspase3和Caspase9的表達量。結果：不同濃度的地西他濱作用于MOLT-4細胞4天,隨著時間延長和劑量的加大,地西他濱對MOLT-4細胞株的增殖抑制作用越明顯。Annexin-V/PI雙染法檢測細胞凋亡增多,PI染色檢測檢測G0/G1期細胞比例增多,細胞被阻滯在G0/G1期。且地西他濱與硼替佐米兩藥共同作用MOLT-4細胞比單用一種藥物的抑制效果更明顯。地西他濱對MOLT-4細胞增殖的作用結果顯示0.5nmol/L地西他濱作用72小時后,MOLT-4細胞的增殖活力為對照組的30.2±2.2%(P0.01)。以此細胞為實驗對象,與未加藥處理的MOLT-4細胞對照,篩選兩組間差異表達基因。篩選結果顯示Pax5Sfrp2、Sulfl基因的表達量較用藥前升高,進一步PT-PCR驗證Pax5mRNA表達量較用藥前升高更明顯。構建攜帶Pax5高表達載體的慢病毒導入MOLT-4細胞,細胞的增殖變緩,增殖活力下降。蛋白免疫印跡法(Western blot)結果顯示Notch1通路下游蛋白Hes1的表達量減少,凋亡蛋白Caspase3和Caspase9表達量增加。結論：地西他濱聯合硼替佐米較單藥能更有效抑制MOLT-4細胞的增殖,誘導細胞凋亡、阻滯細胞周期于GO/G1期。其可能機制是促進了Pax5的高表達,抑制T細胞特異性的Notch1信號通路,從而抑制腫瘤生長。
【關鍵詞】：地西他濱 硼替佐米 MOLT-4細胞 急性T淋巴細胞白血病 Pax5 Notch1
【學位授予單位】：第二軍醫(yī)大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2015
【分類號】：R733.71
【目錄】：

• 中文摘要5-7
• 英文摘要7-9
• 中英文縮略詞匯表9-10
• 前言10-14
• 參考文獻11-14
• 第一部分14-32
• 材料與方法15-22
• 結果22-27
• 討論27-28
• 參考文獻28-32
• 第二部分32-47
• 材料與方法33-37
• 結果37-43
• 討論43-44
• 參考文獻44-47
• 第三部分47-65
• 材料與方法47-57
• 結果57-62
• 討論62-63
• 參考文獻63-65
• 結論65-66
• 綜述66-73
• 參考文獻70-73
• 在讀期間發(fā)表論文73-74
• 致謝74

【共引文獻】

中國碩士學位論文全文數據庫 前1條

1 徐艷玲;Pax5基因在急性淋巴細胞白血病中突變、缺失的相關研究[D];華中科技大學;2013年

  本文關鍵詞：地西他濱與硼替佐米聯合治療急性T淋巴細胞白血病的機制研究，，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

本文編號：470927