長鏈非編碼RNA FBXL19-AS1在結(jié)直腸癌中的作用及分子機制研究
發(fā)布時間:2024-12-21 06:43
目的探討長鏈非編碼RNA(long noncoding RNA,antisense lnc RNA)FBXL19-AS1在結(jié)直腸癌(colorectal cancer,CRC)組織中的表達及其潛在的臨床價值;探討FBXL19-AS1對CRC細胞生物學功能的影響;探討FBXL19-AS1與其正義鏈FBXL19相互作用的關系及其在Wnt信號通路中的作用機制。方法使用熒光定量PCR(qRT-PCR)的方法檢測FBXL19-AS1在59例CRC患者癌組織及相應癌旁組織的表達量,分析FBXL19-AS1在CRC組織中的表達與臨床病理參數(shù)的相關性;qRT-PCR及FISH法檢測FBXL19-AS1在細胞中的定位;檢測CRC細胞株中FBXL19-AS1的表達水平;構(gòu)建FBXL19-AS1短發(fā)夾RNA干擾載體,以及過表達載體轉(zhuǎn)染入CRC細胞株,檢測干擾及其過表達效率;通過CCK-8及平板克隆方法檢測CRC細胞增殖能力;流式細胞術檢測FBXL19-AS1對CRC細胞周期及凋亡的影響;Transwell小室檢測FBXL19-AS1對CRC細胞遷移與侵襲能力;對FBXL19-AS1在CRC細胞中的生物學功能進...
【文章頁數(shù)】:68 頁
【學位級別】:碩士
【部分圖文】:
本文編號:4018571
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圖2-1RIP技術路線圖
圖2-1RIP技術路線圖2.2.16細胞免疫熒光實驗(1)將細胞爬片置于24孔板底,培養(yǎng)適量細胞,實驗前使細胞融合度達60%-70%,注意爬片與底板間不能產(chǎn)生細胞;(2)用1×PBS清洗細胞2次,每次5min;(3)用4%的固定液固定爬片20min,1×....
圖3-1Real-timePCR檢測FBXL19-AS1在CRC癌組織及癌旁組織中的表達(p<0.05)
通大學碩士學位論文第三章結(jié)第三章結(jié)果.1結(jié)直腸癌組織中FBXL19-AS1的相對表達量檢測收集59對新鮮的CRC癌組織及相應的癌旁組織標本,用Trizol法提取相組織及癌旁組織的RNA,采用qRT-PCR方法檢測FBXL19-AS1的相對表達....
圖3-2FBXL19-AS1在細胞株中的定位
圖注:A:qRT-PCR檢測,B:FISH檢測圖3-2FBXL19-AS1在細胞株中的定位3.4FBXL19-AS1在結(jié)直腸癌細胞株中的生物功能學研究3.4.1CRC細胞株中FBXL19-AS1的相對表達量培養(yǎng)正常人腸黏膜上皮細胞NCM460及四種人腸癌細胞....
圖3-3:FBXL19-AS1在CRC細胞株中相對表達量檢測
圖注:A:qRT-PCR檢測,B:FISH檢測圖3-2FBXL19-AS1在細胞株中的定位9-AS1在結(jié)直腸癌細胞株中的生物功能學研胞株中FBXL19-AS1的相對表達量腸黏膜上皮細胞NCM460及四種人腸癌細胞系1,提取這5種細胞株的RNA,通過qRT-....
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