目的探討長鏈非編碼RNA(long noncoding RNA,antisense lnc RNA)FBXL19-AS1在結(jié)直腸癌(colorectal cancer,CRC)組織中的表達及其潛在的臨床價值;探討FBXL19-AS1對CRC細(xì)胞生物學(xué)功能的影響;探討FBXL19-AS1與其正義鏈FBXL19相互作用的關(guān)系及其在Wnt信號通路中的作用機制。方法使用熒光定量PCR(qRT-PCR)的方法檢測FBXL19-AS1在59例CRC患者癌組織及相應(yīng)癌旁組織的表達量,分析FBXL19-AS1在CRC組織中的表達與臨床病理參數(shù)的相關(guān)性;qRT-PCR及FISH法檢測FBXL19-AS1在細(xì)胞中的定位;檢測CRC細(xì)胞株中FBXL19-AS1的表達水平;構(gòu)建FBXL19-AS1短發(fā)夾RNA干擾載體,以及過表達載體轉(zhuǎn)染入CRC細(xì)胞株,檢測干擾及其過表達效率;通過CCK-8及平板克隆方法檢測CRC細(xì)胞增殖能力;流式細(xì)胞術(shù)檢測FBXL19-AS1對CRC細(xì)胞周期及凋亡的影響;Transwell小室檢測FBXL19-AS1對CRC細(xì)胞遷移與侵襲能力;對FBXL19-AS1在CRC細(xì)胞中的生物學(xué)功能進...

【文章頁數(shù)】：68 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

圖2-1RIP技術(shù)路線圖

圖2-1RIP技術(shù)路線圖2.2.16細(xì)胞免疫熒光實驗（1）將細(xì)胞爬片置于24孔板底，培養(yǎng)適量細(xì)胞，實驗前使細(xì)胞融合度達60%-70%，注意爬片與底板間不能產(chǎn)生細(xì)胞；（2）用1×PBS清洗細(xì)胞2次，每次5min；（3）用4%的固定液固定爬片20min，1×....

圖3-1Real-timePCR檢測FBXL19-AS1在CRC癌組織及癌旁組織中的表達（p<0.05）

通大學(xué)碩士學(xué)位論文第三章結(jié)第三章結(jié)果.1結(jié)直腸癌組織中FBXL19-AS1的相對表達量檢測收集59對新鮮的CRC癌組織及相應(yīng)的癌旁組織標(biāo)本，用Trizol法提取相組織及癌旁組織的RNA，采用qRT-PCR方法檢測FBXL19-AS1的相對表達....

圖3-2FBXL19-AS1在細(xì)胞株中的定位

圖注：A：qRT-PCR檢測，B：FISH檢測圖3-2FBXL19-AS1在細(xì)胞株中的定位3.4FBXL19-AS1在結(jié)直腸癌細(xì)胞株中的生物功能學(xué)研究3.4.1CRC細(xì)胞株中FBXL19-AS1的相對表達量培養(yǎng)正常人腸黏膜上皮細(xì)胞NCM460及四種人腸癌細(xì)胞....

圖3-3：FBXL19-AS1在CRC細(xì)胞株中相對表達量檢測

圖注：A：qRT-PCR檢測，B：FISH檢測圖3-2FBXL19-AS1在細(xì)胞株中的定位9-AS1在結(jié)直腸癌細(xì)胞株中的生物功能學(xué)研胞株中FBXL19-AS1的相對表達量腸黏膜上皮細(xì)胞NCM460及四種人腸癌細(xì)胞系1，提取這5種細(xì)胞株的RNA，通過qRT-....

本文編號：4018571