目的:研究細(xì)胞周期蛋白依賴性激酶4/6（cyclin-dependent protein kinase4/6,CDK4/6）抑制劑帕博西尼（palbociclib,PAL）對乳腺癌MCF-7/多柔比星（doxorubicin,DOX）細(xì)胞耐藥性的逆轉(zhuǎn)作用,并探討藥物轉(zhuǎn)運體ATP結(jié)合盒蛋白B1（ATP binding cassette protein B1,ABCB1）在其中的作用機(jī)制。方法:采用CCK-8法檢測PAL對親本MCF-7及耐藥MCF-7/DOX細(xì)胞DOX敏感性的影響;FCM法檢測PAL對MCF-7及MCF-7/DOX細(xì)胞中DOX蓄積濃度的影響。構(gòu)建穩(wěn)定轉(zhuǎn)入ABCB 1基因的MDCKⅡ細(xì)胞模型,采用藥物跨膜轉(zhuǎn)運實驗檢測PAL對藥物轉(zhuǎn)運體ABCB1介導(dǎo)的DOX外排功能的影響。實時熒光定量PCR和蛋白質(zhì)印跡法檢測PAL對MCF-7及MCF-7/DOX細(xì)胞中ABCB1 mRNA及蛋白表達(dá)水平的影響。結(jié)果:0.2與0.4μmol/L的PAL可使DOX對MCF-7/DOX細(xì)胞的半數(shù)抑制濃度(half maximal inhibitory concentration,IC_50<...

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【文章目錄】：
1 材料與方法
    1.1 質(zhì)粒、試劑和儀器
    1.2 細(xì)胞培養(yǎng)及耐藥MCF-7/DOX細(xì)胞的制備
    1.3 CCK-8法檢測PAL單藥或聯(lián)合DOX對MCF-7和MCF-7/DOX細(xì)胞增殖的影響
    1.4 FCM法檢測PAL對MCF-7和MCF-7/DOX細(xì)胞中DOX蓄積濃度的影響
    1.5 MDCKⅡ-ABCB1細(xì)胞的制備
    1.6 藥物跨膜轉(zhuǎn)運實驗檢測ABCB1對DOX的外排功能
    1.7 實時熒光定量PCR法檢測ABCB1 m RNA的表達(dá)水平
    1.8 蛋白質(zhì)印跡法檢測ABCB1蛋白的表達(dá)水平
    1.9 統(tǒng)計學(xué)方法
2 結(jié)果
    2.1 PAL對MCF-7及MCF-7/DOX細(xì)胞DOX敏感性的影響
    2.2 PAL對MCF-7及MCF-7/DOX細(xì)胞中DOX蓄積濃度的影響
    2.3 PAL對ABCB1介導(dǎo)的DOX外排功能的影響
    2.4 PAL對ABCB1轉(zhuǎn)運體表達(dá)水平的影響
3 討論



本文編號：4019097