目的觀察17β-雌二醇是否通過MAPK信號通路對甲狀腺乳頭狀癌細胞TPC-1增殖遷移產(chǎn)生影響。方法規(guī)范培養(yǎng)人甲狀腺乳頭狀癌細胞TPC-1,在細胞狀態(tài)較好的時候更換無內(nèi)源性雌激素的培養(yǎng)基,加入含有10^-4M～10-9M不同濃度的17β-雌二醇培養(yǎng)基培養(yǎng)24h、48h、72h、96h,通過CCK-8實驗檢測各組細胞的光密度值(optical density,OD值)觀察細胞的增殖情況,根據(jù)OD值確定雌激素的最佳有效濃度及處理時間;將用無內(nèi)源性雌激素的培養(yǎng)基預處理過的人甲狀腺乳頭狀癌細胞分為4組:空白對照組、雌激素組、抑制劑組、雌激素加抑制劑組。通過CCK-8實驗檢測各組細胞光密度值(optical density,OD值)觀察細胞增殖情況;通過劃痕實驗檢測各組細胞的遷移能力;通過蛋白質(zhì)印跡法檢測MAPK信號通路下游蛋白Erk1/2活性。結(jié)果1預處理后的人甲狀腺乳頭狀癌細胞更換不同濃度17β-雌二醇的培養(yǎng)基,利用CCK-8實驗檢測各組細胞的OD值,確定10^-7M的17β-雌二醇在處理96h時細胞增殖效果最佳,后續(xù)實驗均選用此濃度處理;2 CCK-8...

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圖1不同濃度雌激素刺激后各時間點的吸光度

華北理工大學碩士學位論文

圖2雌激素、抑制劑刺激后不同時段吸光度

第1章實驗研究-19-圖2雌激素、抑制劑刺激后不同時段吸光度1.2.3劃痕實驗檢測細胞遷移能力細胞劃痕24h時，雌激素組較空白組、抑制劑組和雌激素+抑制劑組細胞劃痕面積明顯縮小，細胞表現(xiàn)出遷移能力較其他各組比較明顯增強（P<0.05）。表5各組劃痕24小時后細胞遷移率（%）(n=....

圖324h后各組細胞的遷移情況（×400）

華北理工大學碩士學位論文-20-圖324h后各組細胞的遷移情況（×400）1.2.4雌激素對MAPK信號通路下游蛋白Erk1/2活性的作用Erk1/2蛋白表達量為0.743±0.031、0.780±0.036、0.747±0.025、0.783±0.093經(jīng)單因素方差分析，差異無....

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