第一部分:抑制DHFR和BRD4引起的協(xié)同致死效應(yīng)在胰腺癌細胞中的應(yīng)用目的:研究DHFR的選擇性抑制劑MTX和BRD4的選擇性抑制劑JQ-1,在胰腺癌細胞和裸鼠移植瘤模型中探索抑制兩種基因是否具有協(xié)同致死效應(yīng)。方法:(1)利用TCGA數(shù)據(jù)庫中胰腺癌和癌旁組織的測序結(jié)果,分析DHFR與BRD4在胰腺癌和癌旁組織中表達的差異及對胰腺癌預(yù)后的影響,明確DHFR與BRD4及MYC三者之間表達的相關(guān)性;(2)收集胰腺癌及癌旁組織的標(biāo)本,利用免疫組化檢測胰腺癌和癌旁組織中DHFR蛋白的表達差異;(3)采用細胞增殖、克隆形成、細胞死亡、LDH釋放和線粒體膜電位染色實驗檢測JQ-1聯(lián)合MTX處理對細胞死亡的影響,采用裸鼠異位移植瘤模型在體內(nèi)水平驗證兩藥聯(lián)合對細胞死亡的影響。結(jié)果:(1)DHFR、BRD4和MYC mRNA在胰腺癌中的表達較正常胰腺組織中高,高表達DHFR或MYC基因的胰腺癌患者生存期明顯縮短,BRD4對胰腺癌患者的生存期無明顯影響,DHFR與BRD4、BRD4與MYC mRNA的表達呈現(xiàn)正相關(guān)性。(2)免疫組化的結(jié)果表明,DHFR蛋白在胰腺癌中的表達較正常胰腺組織高。(3)JQ-1聯(lián)合...

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【學(xué)位級別】：博士

【部分圖文】：

圖1.協(xié)同致死效應(yīng)的模式圖

Luo等研究表明，2004-2009年上生存期為3.9月(3)。手術(shù)切除目前仍癌的解剖位置深在，早期往往缺乏特生物學(xué)行為，故僅20%的臨床確診病愈，而且這部分病人術(shù)后5年總體的證據(jù)表明，胰腺癌是一種系統(tǒng)性的的生存。美國腫瘤學(xué)會臨床實踐指南指以放療和化療為主(2)。近....

圖2.CRISPR–Cas9篩選得知DHFR和BRD4可能具有協(xié)同致死效應(yīng)

CRISPR–Cas9篩選得知DHFR和BRD4可能具有協(xié)同致死還原酶（DihydrofolateReductase,DHFR）是葉酸（Fol。DHFR可以催化葉酸生成二氫葉酸，并可以催化二氫葉酸代謝是人體非常重要的代謝過程，與遺傳物質(zhì)的合成，翻譯息息相關(guān)。四氫葉酸....

圖3.葉酸循環(huán)和葉酸功能溴結(jié)構(gòu)域蛋白4(bromodomain-containingprotein4,BRD4)屬于溴化結(jié)構(gòu)和ET

圖3.葉酸循環(huán)和葉酸功能溴結(jié)構(gòu)域蛋白4(bromodomain-containingprotein4,BRD4)屬于溴化結(jié)構(gòu)和bromodomainandextraterminal）家族蛋白的一員，同一家族還包括BRD2、BRBRDT(16)。BRD4蛋白具....

圖4.BRD4功能示意圖

HFR與BRD4抑制劑對胰腺癌的協(xié)同致死效應(yīng)及機制研究前MC腫瘤具有較好的治療作用，JQ-1可以引起NMC腫瘤細胞的凋亡并可以增瘤小鼠的存活時間(26)。2011年，ChrisVakoc課題組采用RNA干擾文庫篩RNAiScreen）的方法鑒定出BRD4....

本文編號：3976031