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CacyBP/SIP在肝細胞癌惡性行為中的作用及其機制研究

發(fā)布時間:2024-05-17 19:36
  目的肝細胞癌(HCC)在我國有著極高的發(fā)病率和致死率,同時具有起病隱匿、發(fā)現(xiàn)晚、切除率低、根治后容易復發(fā)轉移等特點,對我國人民的健康造成嚴重的危害并給社會帶來沉重的負擔,因此精準診斷及預后預警標記物、新型治療靶標的尋找是目前HCC診治中急需解決的問題。CacyBP/SIP蛋白是鈣結合素結合蛋白,已知其在細胞分化、細胞周期調控、細胞骨架重建、蛋白質泛素化降解、腫瘤發(fā)生發(fā)展中發(fā)揮著重要作用。然而,CacyBP/SIP在肝細胞癌中的表達譜及其發(fā)揮的分子生物學作用卻未曾有人探究。故此,本研究將圍繞CacyBP/SIP蛋白在肝細胞癌中的表達譜和臨床意義、對肝癌惡性生物學行為的影響及其分子機制做相應的探索。方法首先,我們分別采用免疫組化、熒光實時定量PCR、以及Western免疫印跡法檢測若干肝細胞癌臨床樣本中CacyBP/SIP的表達情況,總結其表達譜并分析其臨床意義。接著,我們利用慢病毒荷載shRNA構建穩(wěn)定敲低的肝細胞癌細胞系,通過體外克隆形成、體內(nèi)皮下成瘤、肝原位種植、以及尾靜脈注射等方法檢驗CacyBP/SIP蛋白對肝癌細胞生長以及遷移侵襲的影響。其次,我們利用慢病毒荷載ORF構建穩(wěn)定過...

【文章頁數(shù)】:118 頁

【學位級別】:博士

【部分圖文】:

圖1-1?CacyBP/S丨P在肝細胞癌肝切除樣本中的mRNA表達水平

圖1-1?CacyBP/S丨P在肝細胞癌肝切除樣本中的mRNA表達水平

的臨床標本。研磨提取肝癌組織和相應癌旁組織中的mRNA后逆轉錄為cDNA,??分別進行q-PCR檢測。結果顯示,在肝癌組織中,CacyBP/SIP?mRNA的表達水平??較癌旁組織明顯升高,p值小于0.01?(圖1-1)。在這30對臨床標本中,27例結??果顯示肝癌姐織中mRNA....


圖1-2?CacyBP/SIP在肝細胞癌肝切除樣本中的蛋白表達水平

圖1-2?CacyBP/SIP在肝細胞癌肝切除樣本中的蛋白表達水平

癌組織和相應癌旁組織中的蛋白,之后行Western免疫印跡檢測,結果顯示,在這??20對臨床樣本中,腫瘤組織中CacyBP/SIP蛋白的表達量較癌旁的正常組織明顯增??高(圖1-2)。在這20對肝癌腫瘤和癌旁組織中,19例顯示腫瘤組織中CacyBP??升高,僅有1例顯示癌旁組織較....


圖1-3免疫組化檢測CacyBP/SIP在肝細胞肝切除樣本中的表達水平

圖1-3免疫組化檢測CacyBP/SIP在肝細胞肝切除樣本中的表達水平

重新排布包埋后制做成組織芯片。采用免疫組化的方法檢測CacyBP/SIP在??肝細胞癌腫瘤組織和癌旁組織中的表迗情況,結果同前一致:在這90例臨床樣本??中,CacyBP/SIP在肝癌腫瘤組織中比癌旁組織明顯高表達。(圖1-3)??IHC:?CacyBP/SIP??patient....


圖1-4?CacyBP/SIP表迗與肝細胞癌肝切除患者總體生存率之間的關系

圖1-4?CacyBP/SIP表迗與肝細胞癌肝切除患者總體生存率之間的關系

論文?第一部分CacyBP/SIP在肝細胞癌中的表達及-?*■??-



本文編號:3975959

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