目的:探討長(zhǎng)鏈非編碼RNA H19/miR-29b-3p/HMGB1信號(hào)通路對(duì)肺癌細(xì)胞生長(zhǎng)的影響。方法:構(gòu)建雙熒光素酶確定LncRNA H19/miR-29b-3p/HMGB1的靶向關(guān)系,熒光定量PCR篩選合適的細(xì)胞進(jìn)行研究。實(shí)驗(yàn)分為:1)對(duì)照組(Control);2)干擾空載組(sh-LncRNA H19 NC);3)LncRNA H19干擾組(sh-LncRNA H19)。qRT-PCR檢測(cè)各組細(xì)胞中LncRNA H19的表達(dá),篩選干擾效率較好的序列進(jìn)行后續(xù)實(shí)驗(yàn)。CCK8檢測(cè)細(xì)胞增殖能力,流式檢測(cè)細(xì)胞凋亡與周期,劃線檢測(cè)細(xì)胞遷移能力,Transwell檢測(cè)細(xì)胞侵襲能力,熒光定量PCR檢測(cè)lncRNA H19、miR-29b-3p、HMGB1、TLR4和MMP9表達(dá),各組HMGB1、TLR4和MMP9表達(dá)用Western blot檢測(cè)。結(jié)果:1.IncRNA H19與miR-29b-3p具有靶向關(guān)系,miR-29b-3p與HMGB1也具有靶向關(guān)系。2.細(xì)胞系的選擇:與正常細(xì)胞系2BS細(xì)胞相比,三種肺癌細(xì)胞系中,NCI-H1975細(xì)胞系LncRNA H19表達(dá)最高,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(...

【文章頁數(shù)】：41 頁

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
abstract
縮略詞
第1章 前言
第2章 實(shí)驗(yàn)內(nèi)容
    2.1 實(shí)驗(yàn)材料
    2.2 實(shí)驗(yàn)方法
    2.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析
第3章 結(jié)果
    3.1 雙熒光素酶的結(jié)果
    3.2 細(xì)胞的選擇
    3.3 干擾序列的篩選
    3.4 CCK8 檢測(cè)細(xì)胞增殖
    3.5 各組細(xì)胞周期結(jié)果
    3.6 各組細(xì)胞凋亡結(jié)果
    3.7 各組細(xì)胞遷移結(jié)果
    3.8 各組細(xì)胞侵襲結(jié)果
    3.9 各組細(xì)胞lncRNA H19和miR-29b-3p表達(dá)結(jié)果
    3.10 各組細(xì)胞HMGB1、TLR4和MMP9 表達(dá)結(jié)果
第4章 討論
第5章 結(jié)論與展望
    5.1 結(jié)論
    5.2 展望
致謝
參考文獻(xiàn)
攻讀學(xué)位期間研究成果
綜述
    參考文獻(xiàn)



本文編號(hào)：3913999