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GP73通過調(diào)控Rab23影響肝癌細胞自噬的分子機制研究

發(fā)布時間:2024-02-27 04:44
  目的:我們前期通過分析我們發(fā)現(xiàn)GP73具有TBC樣GAP基序。在此基礎上探討GP73是否具有的GAP酶活性,初步探索GP73與Rab23相互作用的分子機制,進一步研究GP73是否通過其GAP酶活性影響Rab23的水解,從而揭示GP73的GAP酶活性的主要生物學功能,為GP73臨床應用研究以及臨床治療研究提供理論基礎。方法:1、通過Western blot、Co-IP實驗技術,篩選出與GP73有相互作用的Rab蛋白。2、通過基因重組技術構建GP73TBC結構樣突變體載體,確認其在真核細胞中表達。3、通過GAP水解酶實驗和GTP活性測定實驗,研究GP73的及其突變體對Rab23的水解作用。4.通過Western blot實驗方法、細胞熒光免疫共聚焦實驗的方法研究GP73和GP73的Rab-GAPs突變體對自噬的影響。結果:1、通過對15種Rab家族分子的篩選,發(fā)現(xiàn)GP73與Rab23有相互作用。2、通過基序分析,發(fā)現(xiàn)GP73具有非常保守的TBC樣GAP酶基序。突變GP73氨基酸序列第248位和310位氨基酸,構建GP73GAPs酶突變體,突變體GP73(R248K)和GP73(Q310A)...

【文章頁數(shù)】:74 頁

【學位級別】:碩士

【文章目錄】:
個人簡歷
中文摘要
英文摘要
1 前言
2 材料與儀器
3 實驗方法
4 結果
5 討論
6 結論
參考文獻
附錄
綜述
    參考文獻
致謝
在讀碩士學位期間科研情況



本文編號:3912392

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