目的:我們前期通過分析我們發(fā)現(xiàn)GP73具有TBC樣GAP基序。在此基礎(chǔ)上探討GP73是否具有的GAP酶活性,初步探索GP73與Rab23相互作用的分子機(jī)制,進(jìn)一步研究GP73是否通過其GAP酶活性影響Rab23的水解,從而揭示GP73的GAP酶活性的主要生物學(xué)功能,為GP73臨床應(yīng)用研究以及臨床治療研究提供理論基礎(chǔ)。方法:1、通過Western blot、Co-IP實(shí)驗(yàn)技術(shù),篩選出與GP73有相互作用的Rab蛋白。2、通過基因重組技術(shù)構(gòu)建GP73TBC結(jié)構(gòu)樣突變體載體,確認(rèn)其在真核細(xì)胞中表達(dá)。3、通過GAP水解酶實(shí)驗(yàn)和GTP活性測定實(shí)驗(yàn),研究GP73的及其突變體對Rab23的水解作用。4.通過Western blot實(shí)驗(yàn)方法、細(xì)胞熒光免疫共聚焦實(shí)驗(yàn)的方法研究GP73和GP73的Rab-GAPs突變體對自噬的影響。結(jié)果:1、通過對15種Rab家族分子的篩選,發(fā)現(xiàn)GP73與Rab23有相互作用。2、通過基序分析,發(fā)現(xiàn)GP73具有非常保守的TBC樣GAP酶基序。突變GP73氨基酸序列第248位和310位氨基酸,構(gòu)建GP73GAPs酶突變體,突變體GP73(R248K)和GP73(Q310A)...

【文章頁數(shù)】：74 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
個(gè)人簡歷
中文摘要
英文摘要
1 前言
2 材料與儀器
3 實(shí)驗(yàn)方法
4 結(jié)果
5 討論
6 結(jié)論
參考文獻(xiàn)
附錄
綜述
    參考文獻(xiàn)
致謝
在讀碩士學(xué)位期間科研情況



本文編號：3912392