發(fā)布時(shí)間：2024-02-21 09:21

　　背景:多發(fā)性骨髓瘤(MM)是一種惡性漿細(xì)胞腫瘤,其特征是骨髓中漿細(xì)胞異常增生,并引起造血抑制和溶骨性病變。隨著高劑量化療和造血干細(xì)胞移植的發(fā)展,以及蛋白酶體抑制劑和免疫調(diào)節(jié)劑等新藥的應(yīng)用,治療緩解率提高、患者生存期延長。而微小殘留的骨髓瘤細(xì)胞是其逃脫傳統(tǒng)化療、MM復(fù)發(fā)和進(jìn)展的重要因素。因而仍需選擇有效的高特異性抗原靶點(diǎn),以減少微殘、鞏固維持治療是MM目前的研究重點(diǎn)之一。紐約食管鱗狀上皮癌抗原1(New York esophageal squamous cell carcinoma 1,NY-ESO-1)是癌-睪丸抗原(cancer-testis antigens,CTA)家族中的重要一員,是迄今發(fā)現(xiàn)的最具免疫原性的腫瘤抗原之一,能誘導(dǎo)細(xì)胞和體液免疫應(yīng)答。NY-ESO-1在MM、神經(jīng)母細(xì)胞瘤、黑色素瘤、卵巢癌等多種類型腫瘤中廣泛表達(dá),并且在腫瘤中的表達(dá)情況與腫瘤類型、惡性程度及預(yù)后有一定的相關(guān)性。研究發(fā)現(xiàn),MM患者細(xì)胞遺傳學(xué)異�；蝾A(yù)后較差時(shí)NY-ESO-1表達(dá)增高。在腫瘤進(jìn)展期和復(fù)發(fā)期,患者體內(nèi)NY-ESO-1特異性抗體滴度也顯著增高,且這種抗體能介導(dǎo)殺傷MM細(xì)胞。由此可見,NY-ESO...

【文章頁數(shù)】：60 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

圖1-1人MM細(xì)胞系U266、RPMI8226中NY-ESO-1表達(dá)鑒定（A）q-PCR檢測NY-ESO-1mRNA的表達(dá)；（B）WB檢測NY-ESO-1蛋白的表達(dá)

的穩(wěn)定感染LV-shNC的U266細(xì)胞和未感染的U266細(xì)胞作為對照組，操作方法同本章實(shí)驗(yàn)方法4。10．統(tǒng)計(jì)學(xué)處理實(shí)驗(yàn)中所有結(jié)果用均值±標(biāo)準(zhǔn)差表示，并通過GraphPadPrism5.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)處理。實(shí)驗(yàn)組與對照組組間差異及不同實(shí)驗(yàn)組組間差異比較用t....

圖1-2重組質(zhì)粒測序結(jié)果圖

進(jìn)行重組質(zhì)粒DNA基因測序，所得測序結(jié)果與插入序列比對，如圖1-2所示，可查得完整所需序列，說明重組質(zhì)粒構(gòu)建成功。3.慢病毒包裝及感染U266細(xì)胞將構(gòu)建成功的慢病毒重組質(zhì)粒分別與慢病毒輔助包裝質(zhì)粒psPAX2、pMD2.G一起共轉(zhuǎn)染293T細(xì)胞，轉(zhuǎn)染后48....

圖1-3慢病毒感染U266細(xì)胞后72h（上排為普通顯微鏡，下排為熒光顯微鏡，放大倍數(shù)：200×）

染U266細(xì)胞后72h（上排為普通顯微鏡，下排為熒光顯微鏡，放染細(xì)胞株的篩選及鑒定釋法將感染成功的U266細(xì)胞接種至96孔板篩選陽性感染獲得穩(wěn)定感染株（圖1-4A）。隨后通過qPCR和WB分別Y-ESO-1的下調(diào)效果，qPCR檢測結(jié)果顯示：與未感染組相....

圖1-4慢病毒穩(wěn)定感染細(xì)胞株的篩選及鑒定（A）篩選穩(wěn)定感染的U266細(xì)胞株克�。ǚ謩e攝于篩選后第4天、第20天，左側(cè)視野為普通顯微鏡鏡下觀，右側(cè)視野為熒光顯微鏡鏡下觀，放大倍數(shù)：200×）；（B）q-PCR檢測NY-ESO-1mRNA

圖1-4慢病毒穩(wěn)定感染細(xì)胞株的篩選及鑒定（A）篩選穩(wěn)定感染的U266細(xì)胞株克隆（分別攝于篩選后第4天、第20天，左側(cè)視野為普通顯微鏡鏡下觀，右側(cè)視野為熒光顯微鏡鏡下觀，放大倍數(shù)：200×）；（B）q-PCR檢測NY-ESO-1mRNA的表達(dá)；（C）WB檢測....

本文編號：3905282