嵌合抗原受體T(CAR-T)細(xì)胞療法是腫瘤免疫學(xué)發(fā)展最快的領(lǐng)域之一。近年來,其徹底改變了癌癥治療的模式,并憑借在B細(xì)胞白血病和淋巴瘤治療中出色的臨床數(shù)據(jù),成為癌癥治療的新突破,為免疫細(xì)胞治療打開了一扇新的大門。但是隨著因嚴(yán)重細(xì)胞因子釋放綜合征和脫靶效應(yīng)而死亡的病例報導(dǎo),對CAR-T安全性問題的思考也隨之而來。關(guān)鍵科學(xué)問題是如何進(jìn)一步提高CAR-T的可控性和安全性。一個可實現(xiàn)的策略是使用自殺基因系統(tǒng)在副作用發(fā)生時能夠?qū)Ⅲw內(nèi)的CAR-T細(xì)胞清除從而降低甚至避免副作用對機體的傷害。本論文選用一段截短的人CD38分子作為“開關(guān)”標(biāo)記,與CAR共表達(dá)于CAR-T細(xì)胞上,建立了一個新型的CAR-T自殺基因系統(tǒng)。另外還對CAR-T構(gòu)建過程中獲得高滴度病毒的濃縮方式優(yōu)劣做了比較和探討。主要研究內(nèi)容如下:首先對人CD38分子進(jìn)行裁剪,與CAR基因拼接,構(gòu)建兩種結(jié)構(gòu)不同的表達(dá)模式。具體步驟為通過分析CD38抗體藥達(dá)木雷單抗(Daratumumab)的抗體識別表位,裁剪掉CD38胞內(nèi)段和胞外非結(jié)合區(qū)段,獲得截短的CD38序列(CD38t)。第一種種設(shè)計可以實現(xiàn)CD38t分子與CAR分別在細(xì)胞膜上共表達(dá),將C...

【文章頁數(shù)】：59 頁

【學(xué)位級別】：碩士

圖1.1CAR的發(fā)展（ZhenguangWang等，2017）

圖1.2大樣本量的CAR-T治療毒副作用臨床研究（JulianeGust等，2017；KevinAHay

圖1.3增強CAR-T安全性設(shè)計的示意圖（張昂等，2017）

圖1.4通過ADCC（CDC）清除CAR-T細(xì)胞的自殺基因系統(tǒng)（SarwishRafiq等，2020）

本文編號：3889379