發(fā)布時(shí)間：2017-05-21 17:20

  本文關(guān)鍵詞：PARP抑制劑在AR陽性三陰性乳腺癌細(xì)胞增殖中的作用，，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：研究背景與目的：三陰性乳腺癌(triple-negative breast cancer, TNBC)是指雌激素受體(estrogen receptor, ER)、孕激素受體(progesterone receptor, PR)及人類表皮生長因子受體2((human epidermal growth factor receptor-2, HER-2)表達(dá)均為陰性的一類乳腺癌,約占所有乳腺癌的15%左右。與其他類型乳腺癌相比,三陰性乳腺癌不能從內(nèi)分泌治療和抗HER-2治療中獲益,有著更高的死亡率、復(fù)發(fā)風(fēng)險(xiǎn)以及轉(zhuǎn)移發(fā)生率。因此,尋找新的治療策略,對提高三陰性乳腺癌患者預(yù)后至關(guān)重要。在三陰性乳腺癌中,雄激素受體(androgen receptor, AR)陽性的表達(dá)率為10%-15%,目前已有臨床研究證明抗雄治療在三陰性乳腺癌中的肯定效果。乳腺癌易感基因1 (breast cancer susceptibility gene 1, BRCA1)在三陰性乳腺癌中的突變率為10.6%-19.8%,在散發(fā)型三陰性乳腺癌中聚腺苷二磷酸核糖聚合酶1(poly (ADP-ribose) polymerase 1, PARP1)抑制劑的治療效果不明顯,但在BRCA1突變的三陰性乳腺癌中取得了陽性結(jié)果。本研究目的是利用體內(nèi)、外模型及臨床組織標(biāo)本,探討在AR陽性的三陰性乳腺癌中,BRCA1和PARP1的關(guān)系,并且初步探討其作用的相關(guān)調(diào)控機(jī)制,最后在臨床患者中驗(yàn)證其相互關(guān)系,并為臨床上AR陽性三陰性乳腺選擇靶向聯(lián)合內(nèi)分泌治療提供基礎(chǔ)理論依據(jù)。材料和方法：本實(shí)驗(yàn)選取兩株不同類型的三陰性乳腺癌細(xì)胞株MDA-MB-231 (AR陽性,BRCA1野生型)和HCC1937 (AR陽性,BRCA1突變型)。28例三陰性乳腺癌患者組織芯片為研究對象。1.通過MTT、克隆形成、流式細(xì)胞術(shù)檢測比卡魯胺和ABT-888聯(lián)合用藥對AR陽性的TNBC細(xì)胞增殖、凋亡影響。2.通過基因轉(zhuǎn)染、qPCR以及蛋白免疫印跡實(shí)驗(yàn)檢測BRCA1對AR和PARP1表達(dá)水平的影響。3.通過qPCR和蛋白免疫印跡實(shí)驗(yàn)檢測AR和PARP1的相互作用。4.構(gòu)建裸鼠皮下移植瘤模型,繪制腫瘤生長曲線,檢測比卡魯胺和ABT-888聯(lián)合作用與單藥作用抑制腫瘤增殖效果的差異,并通過免疫組化染色檢測AR、PARP1、Ki67的表達(dá)差異。5.通過對28例TNBC患者組織芯片的免疫組化染色實(shí)驗(yàn),檢測乳腺癌組織中BRCA1、AR和PARP1的表達(dá)情況,利用相關(guān)統(tǒng)計(jì)學(xué)分析法分析BRCAl與AR、PARP1之間的表達(dá)關(guān)系。結(jié)果：1.在AR陽性的TNBC中,與比卡魯胺或ABT-888單藥組相比,聯(lián)合用藥組可以更有效的抑制細(xì)胞增殖,誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡。2.瞬時(shí)轉(zhuǎn)染BRCA1過表達(dá)質(zhì)粒,通過qPCR以及蛋白免疫印跡實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)AR和PARP1在mRNA和蛋白水平的表達(dá)均下調(diào)。3.利用瞬時(shí)轉(zhuǎn)染和藥物誘導(dǎo)或抑制,AR可以上調(diào)PARP1的mRNA和蛋白表達(dá),同時(shí)PARP1也可以上調(diào)AR的mRNA和蛋白表達(dá)水平。4.在HCC1937構(gòu)建的裸鼠皮下移植瘤模型中,與比卡魯胺或ABT-888單藥組相比,聯(lián)合用藥組可以更有效的抑制腫瘤增殖。5.在AR陽性的TNBC中,比卡魯胺和ABT-888的聯(lián)合作用可能與BRCA1的狀態(tài)有關(guān),在BRCA1突變時(shí),聯(lián)合作用抑制腫瘤增殖的效果更明顯。6.在28例TNBC患者組織芯片的免疫組化結(jié)果顯示,BRCA1的表達(dá)與AR (r=-2.694,P=0.011)和PARP1 (r=-2.324, P=0.046)表達(dá)呈負(fù)相關(guān)關(guān)系。結(jié)論：綜上所述,本研究證明了BRCA1的過表達(dá)可以下調(diào)AR和PARP1的mRNA和蛋白水平。而AR作為一個(gè)上游的調(diào)控因子上調(diào)PARP1,同時(shí)PARP1也可以上調(diào)AR。并且TNBC患者中,驗(yàn)證了BRCA1的表達(dá)與AR和PARP1的表達(dá)呈負(fù)相關(guān)關(guān)系。研究表明在AR陽性的TNBC中,比卡魯胺和ABT-888的聯(lián)合用藥可以增強(qiáng)抗腫瘤增殖作用,為臨床AR陽性的TNBC患者靶向聯(lián)合內(nèi)分泌治療的潛在治療策略提供了基礎(chǔ)理論依據(jù)。
【關(guān)鍵詞】：雄激素受體 聚腺苷酸二磷酸核糖轉(zhuǎn)移酶1 乳腺癌易感基因1 聯(lián)合治療 三陰性乳腺癌
【學(xué)位授予單位】：南京大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號】：R737.9
【目錄】：

• 縮略詞表(Abbreviations)6-7
• 摘要7-10
• Abstract10-13
• 前言13-15
• 第一章 實(shí)驗(yàn)材料15-18
• 1.1. 細(xì)胞株15
• 1.2. 質(zhì)粒15
• 1.3. 乳腺癌組織芯片15
• 1.4. 材料與儀器15-16
• 1.5. 藥品與試劑16-18
• 第二章 實(shí)驗(yàn)方法18-28
• 2.1. 細(xì)胞培養(yǎng)方法及藥物配制18
• 2.2. 質(zhì)粒的擴(kuò)增及提取18-19
• 2.3. MTT法檢測細(xì)胞增殖19
• 2.4. ANNEXINV/PI染色檢測細(xì)胞凋亡19-20
• 2.5. 平板克隆形成實(shí)驗(yàn)20
• 2.6. 瞬時(shí)轉(zhuǎn)染20-21
• 2.7. 總蛋白質(zhì)的提取與濃度測定21
• 2.8. RT-PCR21-23
• 2.9. 蛋白質(zhì)免疫印跡(WESTERN BLOTTING)23-26
• 2.10. 免疫組化26-27
• 2.11. 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析27-28
• 第三章 實(shí)驗(yàn)結(jié)果28-38
• 3.1 體外實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證在AR陽性的TNBC中比卡魯胺和ABT-888聯(lián)合作用抑制細(xì)胞增殖、促進(jìn)細(xì)胞凋亡28-30
• 3.2 BRCA1過表達(dá)下調(diào)AR和PARP1的表達(dá)30-32
• 3.3 AR可以上調(diào)PARP1,同時(shí)PARP1也可以上調(diào)AR的表達(dá)32-34
• 3.4 比卡魯胺和ABT-888聯(lián)合作用抑制腫瘤增殖34-36
• 3.5 比卡魯胺和ABT-888的聯(lián)合作用可能與BRCA1的狀態(tài)相關(guān),在BRCA1突變時(shí),聯(lián)合作用抑制腫瘤增殖的效果更好36
• 3.6 在TNBC病人中,BRCA1的表達(dá)與AR和PARP1負(fù)相關(guān)36-38
• 第四章 討論38-41
• 第五章 結(jié)論和展望41-42
• 參考文獻(xiàn)42-45
• 綜述一45-54
• 參考文獻(xiàn)51-54
• 綜述二54-61
• 參考文獻(xiàn)58-61
• 作者簡介及攻讀取成果61-62
• 致謝62-63

【相似文獻(xiàn)】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 黃河;曹陽;吳英理;閻驊;;PARP抑制劑聯(lián)合化療藥物治療惡性腫瘤的研究進(jìn)展[J];腫瘤;2013年04期

2 韓煒;鐘俊;王永峰;王國成;尤啟冬;;PARP抑制劑用于腫瘤治療的研究進(jìn)展[J];中國新藥雜志;2011年12期

3 郭偉;張木勛;;PARP抑制劑對早期糖尿病大鼠腎臟的保護(hù)作用[J];中國醫(yī)師雜志;2006年05期

4 丁煥;孫穎;黎曉晴;黎莉;;PARP抑制劑聯(lián)合吉西他濱或多西他賽對雄激素非依賴性前列腺癌PC3細(xì)胞增殖的影響[J];山東大學(xué)學(xué)報(bào)(醫(yī)學(xué)版);2014年01期

5 王書博;潘文婧;李委佳;劉巍;譚文華;;PARP抑制劑在上皮性卵巢癌中的研究進(jìn)展[J];中國優(yōu)生與遺傳雜志;2012年09期

6 劉志學(xué);;默克與百濟(jì)神州再度攜手 雙方在京簽署PARP抑制劑全球共同開發(fā)和商業(yè)化協(xié)議[J];中國醫(yī)藥導(dǎo)報(bào);2013年34期

7 郭偉;張木勛;;PARP抑制劑對糖尿病大鼠早期神經(jīng)病變的影響[J];天津醫(yī)藥;2006年10期

8 秦艷;王婭蘭;李圓圓;;PARP抑制劑對小鼠結(jié)腸腺癌CT26細(xì)胞肝轉(zhuǎn)移的影響[J];第三軍醫(yī)大學(xué)學(xué)報(bào);2008年14期

9 馬強(qiáng);郝吉慶;;PARP抑制劑對非小細(xì)胞肺癌A549及H460細(xì)胞增殖及凋亡的影響[J];現(xiàn)代腫瘤醫(yī)學(xué);2013年04期

10 ;[J];;年期

中國博士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫 前1條

1 謝江嬌;PARP抑制劑延緩高同型半胱氨酸血癥誘導(dǎo)ApoE-/-小鼠動脈粥樣硬化斑塊進(jìn)展[D];華中科技大學(xué);2009年

中國碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫 前6條

1 駱佳艷;PARP抑制劑在AR陽性三陰性乳腺癌細(xì)胞增殖中的作用[D];南京大學(xué);2016年

2 張文婷;PARP抑制劑的設(shè)計(jì)、合成與神經(jīng)保護(hù)活性研究[D];華中科技大學(xué);2007年

3 王哲;PARP抑制劑對卵巢癌C13*細(xì)胞增殖、侵襲的影響及其機(jī)制探討[D];山東大學(xué);2013年

4 余芳;PARP抑制劑在阿霉素誘導(dǎo)的多發(fā)性骨髓瘤細(xì)胞自噬發(fā)生中的功能研究[D];第四軍醫(yī)大學(xué);2011年

5 郭偉;PARP抑制劑對糖尿病大鼠早期神經(jīng)病變的影響[D];華中科技大學(xué);2006年

6 丁煥;轉(zhuǎn)染INPP4B基因聯(lián)合PARP抑制劑對雄激素抵抗型前列腺癌PC3細(xì)胞的影響[D];山東大學(xué);2014年

  本文關(guān)鍵詞：PARP抑制劑在AR陽性三陰性乳腺癌細(xì)胞增殖中的作用，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

本文編號：384321