肺癌是最常見的惡性腫瘤之一,對人類的健康造成極大的威脅。肺癌可分為小細胞肺癌(SCLC)和非小細胞肺癌(NSCLC),而非小細胞肺癌約占肺癌的80%-85%,所以尋找新型的非小細胞肺癌靶點刻不容緩。酮體,由肝臟產(chǎn)生,由血液運輸?shù)缴眢w的其他組織和器官,在機體饑餓的情況下作為細胞的燃料。琥珀酰輔酶A轉(zhuǎn)移酶1(OXCT1)是酮體分解代謝的限速酶,定位在肝外組織的線粒體。據(jù)文獻報道,在肝癌細胞中,OXCT1在血清饑餓的條件下可以被mTORC2-AKT-SP1通路重新激活,以維持肝癌細胞的生長。并且,已有多篇文獻報道,OXCT1在多種腫瘤中呈上調(diào)趨勢。我們研究發(fā)現(xiàn),OXCT1的蛋白水平在非小細胞肺癌細胞系及組織中均呈高表達。敲低OXCT1的表達可抑制NSCLC細胞的生長和遷移,并誘導(dǎo)細胞發(fā)生凋亡。同時我們發(fā)現(xiàn)敲低OXCT1的表達使細胞中ATP水平降低,線粒體的數(shù)量也有所減少。通過對其中的分子機制的研究,我們發(fā)現(xiàn)沉默OXCT1使得磷酸化IKKα/β及磷酸化IκBα蛋白水平降低,IκBα的蛋白水平升高,磷酸化p65的蛋白水平降低,由p65轉(zhuǎn)錄的遷移相關(guān)基因MMP2和MMP9的表達水平也下降。這表明O...

【文章頁數(shù)】：44 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
abstract
第1章 前言
    1.1 研究肺癌的社會和經(jīng)濟意義
    1.2 OXCT1在肺癌中的研究現(xiàn)狀與動態(tài)分析
    1.3 NF-κB在肺癌中的研究現(xiàn)狀與動態(tài)分析
第2章 OXCT1在非小細胞肺癌中的表達以及對生長的影響
    2.1 引言
    2.2 材料
        2.2.1 實驗儀器
        2.2.2 試劑和材料
        2.2.3 試劑的配制
    2.3 實驗方法
        2.3.1 細胞培養(yǎng)
        2.3.2 蛋白質(zhì)免疫印跡
        2.3.3 熒光定量PCR
        2.3.4 siRNA(以6孔板為例)
        2.3.5 飽和密度實驗(24孔板)
        2.3.6 克隆集落形成實驗(6孔板)
        2.3.7 細胞凋亡檢測實驗
        2.3.8 ATP檢測實驗
        2.3.9 線粒體染色實驗
    2.4 實驗結(jié)果
        2.4.1 OXCT1在非小細胞肺癌中高表達
        2.4.2 OXCT1促進NSCLC細胞生長
        2.4.3 干擾OXCT1基因促進了NSCLC細胞凋亡
    2.5 討論
第3章 OXCT1對非小細胞肺癌細胞遷移影響
    3.1 引言
    3.2 材料(部分同前文)
        3.2.1 實驗儀器
        3.2.2 試劑和材料
    3.3 實驗方法(部分同前文)
        3.3.1 劃痕實驗
        3.3.2 Transwell實驗
        3.3.3 鬼筆環(huán)肽染色實驗
    3.4 實驗結(jié)果
        3.4.1 干擾OXCT1基因表達抑制了非小細胞肺癌的遷移
    3.5 討論
第4章 OXCT1能夠激活NF-κB通路及其轉(zhuǎn)錄活性
    4.1 前言
    4.2 材料(部分同前文)
        4.2.1 實驗儀器
        4.2.2 試劑和材料
    4.3 實驗方法(部分同前文)
        4.3.1 質(zhì)粒構(gòu)建
        4.3.2 質(zhì)粒轉(zhuǎn)染(6孔板)
        4.3.3 免疫熒光
        4.3.4 核質(zhì)分離實驗
    4.4 實驗結(jié)果
        4.4.1 干擾OXCT1的表達對NF-κB通路及其下游信號通路的影響
    4.5 討論
第5章 主要的結(jié)論和展望
    5.1 主要的結(jié)論
    5.2 展望
致謝
參考文獻
攻讀學(xué)位期間的研究成果



本文編號：3838796