肺癌是最常見的惡性腫瘤之一,對(duì)人類的健康造成極大的威脅。肺癌可分為小細(xì)胞肺癌(SCLC)和非小細(xì)胞肺癌(NSCLC),而非小細(xì)胞肺癌約占肺癌的80%-85%,所以尋找新型的非小細(xì)胞肺癌靶點(diǎn)刻不容緩。酮體,由肝臟產(chǎn)生,由血液運(yùn)輸?shù)缴眢w的其他組織和器官,在機(jī)體饑餓的情況下作為細(xì)胞的燃料。琥珀酰輔酶A轉(zhuǎn)移酶1(OXCT1)是酮體分解代謝的限速酶,定位在肝外組織的線粒體。據(jù)文獻(xiàn)報(bào)道,在肝癌細(xì)胞中,OXCT1在血清饑餓的條件下可以被mTORC2-AKT-SP1通路重新激活,以維持肝癌細(xì)胞的生長(zhǎng)。并且,已有多篇文獻(xiàn)報(bào)道,OXCT1在多種腫瘤中呈上調(diào)趨勢(shì)。我們研究發(fā)現(xiàn),OXCT1的蛋白水平在非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞系及組織中均呈高表達(dá)。敲低OXCT1的表達(dá)可抑制NSCLC細(xì)胞的生長(zhǎng)和遷移,并誘導(dǎo)細(xì)胞發(fā)生凋亡。同時(shí)我們發(fā)現(xiàn)敲低OXCT1的表達(dá)使細(xì)胞中ATP水平降低,線粒體的數(shù)量也有所減少。通過對(duì)其中的分子機(jī)制的研究,我們發(fā)現(xiàn)沉默OXCT1使得磷酸化IKKα/β及磷酸化IκBα蛋白水平降低,IκBα的蛋白水平升高,磷酸化p65的蛋白水平降低,由p65轉(zhuǎn)錄的遷移相關(guān)基因MMP2和MMP9的表達(dá)水平也下降。這表明O...

【文章頁數(shù)】：44 頁

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
abstract
第1章 前言
    1.1 研究肺癌的社會(huì)和經(jīng)濟(jì)意義
    1.2 OXCT1在肺癌中的研究現(xiàn)狀與動(dòng)態(tài)分析
    1.3 NF-κB在肺癌中的研究現(xiàn)狀與動(dòng)態(tài)分析
第2章 OXCT1在非小細(xì)胞肺癌中的表達(dá)以及對(duì)生長(zhǎng)的影響
    2.1 引言
    2.2 材料
        2.2.1 實(shí)驗(yàn)儀器
        2.2.2 試劑和材料
        2.2.3 試劑的配制
    2.3 實(shí)驗(yàn)方法
        2.3.1 細(xì)胞培養(yǎng)
        2.3.2 蛋白質(zhì)免疫印跡
        2.3.3 熒光定量PCR
        2.3.4 siRNA(以6孔板為例)
        2.3.5 飽和密度實(shí)驗(yàn)(24孔板)
        2.3.6 克隆集落形成實(shí)驗(yàn)(6孔板)
        2.3.7 細(xì)胞凋亡檢測(cè)實(shí)驗(yàn)
        2.3.8 ATP檢測(cè)實(shí)驗(yàn)
        2.3.9 線粒體染色實(shí)驗(yàn)
    2.4 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
        2.4.1 OXCT1在非小細(xì)胞肺癌中高表達(dá)
        2.4.2 OXCT1促進(jìn)NSCLC細(xì)胞生長(zhǎng)
        2.4.3 干擾OXCT1基因促進(jìn)了NSCLC細(xì)胞凋亡
    2.5 討論
第3章 OXCT1對(duì)非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞遷移影響
    3.1 引言
    3.2 材料(部分同前文)
        3.2.1 實(shí)驗(yàn)儀器
        3.2.2 試劑和材料
    3.3 實(shí)驗(yàn)方法(部分同前文)
        3.3.1 劃痕實(shí)驗(yàn)
        3.3.2 Transwell實(shí)驗(yàn)
        3.3.3 鬼筆環(huán)肽染色實(shí)驗(yàn)
    3.4 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
        3.4.1 干擾OXCT1基因表達(dá)抑制了非小細(xì)胞肺癌的遷移
    3.5 討論
第4章 OXCT1能夠激活NF-κB通路及其轉(zhuǎn)錄活性
    4.1 前言
    4.2 材料(部分同前文)
        4.2.1 實(shí)驗(yàn)儀器
        4.2.2 試劑和材料
    4.3 實(shí)驗(yàn)方法(部分同前文)
        4.3.1 質(zhì)粒構(gòu)建
        4.3.2 質(zhì)粒轉(zhuǎn)染(6孔板)
        4.3.3 免疫熒光
        4.3.4 核質(zhì)分離實(shí)驗(yàn)
    4.4 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
        4.4.1 干擾OXCT1的表達(dá)對(duì)NF-κB通路及其下游信號(hào)通路的影響
    4.5 討論
第5章 主要的結(jié)論和展望
    5.1 主要的結(jié)論
    5.2 展望
致謝
參考文獻(xiàn)
攻讀學(xué)位期間的研究成果



本文編號(hào)：3838796