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B7-H1通過調(diào)節(jié)腫瘤免疫微環(huán)境促進(jìn)AML腫瘤細(xì)胞免疫逃逸的實(shí)驗(yàn)研究

發(fā)布時(shí)間:2023-07-25 04:29
  目的探究B7-H1在介導(dǎo)急性髓性白血病(AML)腫瘤免疫逃逸中的作用及機(jī)制。方法培養(yǎng)M1~M7型AML細(xì)胞,采用乳酸脫氫酶(LDH)釋放法檢測NK細(xì)胞對AML細(xì)胞的殺傷活性,ELISA法檢測IL-2、IFN-γ的含量。通過皮下和尾靜脈注射C1498-GFP細(xì)胞構(gòu)建小鼠AML皮下和轉(zhuǎn)移模型,設(shè)對照組、IgG抗體組及抗-B7-H1抗體組。對于皮下模型,記錄小鼠腫瘤體積變化,第27天取出腫瘤并稱重,檢測腫瘤中T細(xì)胞數(shù)量及IFN-γ和TNF-α水平。對于轉(zhuǎn)移模型,每天記錄小鼠的體質(zhì)量,當(dāng)體質(zhì)量減少>10%時(shí)記為死亡,檢測全血、肝、脾和骨髓中AML細(xì)胞數(shù)量和肝組織中CD4+T和CD8+T細(xì)胞的水平。結(jié)果 NK細(xì)胞對M5型AML細(xì)胞的殺傷率最低(P<0. 05)。施加抗-B7-H1抗體后,NK細(xì)胞對M1、M2、M5、M6型細(xì)胞的殺傷率明顯增加(P<0. 05),共培養(yǎng)上清液中IL-2和IFN-γ的水平亦升高。在皮下AML模型中,抗-B7-H1抗體組小鼠第27天的腫瘤體積和瘤體質(zhì)量均顯著低于對照組和IgG組(P<0. 01),Tre...

【文章頁數(shù)】:6 頁

【文章目錄】:
1 材料與方法
    1.1 試劑
    1.2 細(xì)胞株和小鼠
    1.3 細(xì)胞培養(yǎng)
    1.4 NK細(xì)胞的提取和培養(yǎng)
    1.5 NK細(xì)胞對AML細(xì)胞的殺傷活性測定
    1.6 NK細(xì)胞與AML細(xì)胞共培養(yǎng)后免疫因子的表達(dá)水平測定
    1.7 腫瘤模型的構(gòu)建和療效檢測
    1.8統(tǒng)計(jì)學(xué)分析
2 結(jié)果
    2.1 NK細(xì)胞對AML細(xì)胞的殺傷活力
    2.2 NK細(xì)胞和不同AML細(xì)胞共培養(yǎng)后的免疫因子水平
    2.3 抗-B7-H1抗體對皮下AML小鼠的治療效果及對免疫功能的影響
    2.4 抗-B7-H1抗體對轉(zhuǎn)移性AML小鼠的治療效果及對免疫功能的影響
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本文編號:3837163

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