多種納米材料,包括氧化鋅納米顆粒,可誘導(dǎo)促進(jìn)細(xì)胞死亡的自噬效應(yīng)。但其中具體機(jī)制還未完全闡明。本文我們使用水熱合成法合成了氧化鋅納米顆粒(ZONs),驗(yàn)證了氧化鋅納米顆粒在HeLa細(xì)胞以及GFP-LC3/HeLa細(xì)胞中能夠誘導(dǎo)完整的細(xì)胞自噬效應(yīng);小分子自噬抑制劑和自噬相關(guān)蛋白Atg5表達(dá)的沉默,均能顯著抑制氧化鋅納米顆粒引起的細(xì)胞死亡,這進(jìn)一步揭示了氧化鋅納米顆粒引起的細(xì)胞死亡與細(xì)胞自噬的相關(guān)性。與此同時,我們證明了游離鋅離子的釋放是導(dǎo)致細(xì)胞死亡的原因。氧化鋅納米顆粒對HeLa細(xì)胞內(nèi)部溶酶體的酸性及降解能力具有一定的促進(jìn)作用,內(nèi)化的氧化鋅納米顆粒在胞內(nèi)酸性環(huán)境(溶酶體)下釋放大量鋅離子,順序上調(diào)胞內(nèi)氧自由基(Reactive Oxygen Species,ROS)的產(chǎn)生,誘發(fā)細(xì)胞死亡。進(jìn)一步地,我們也發(fā)現(xiàn)小分子自噬抑制劑及自噬相關(guān)蛋白Atg5表達(dá)的沉默,能夠顯著降低胞內(nèi)游離鋅離子的釋放以及ROS的產(chǎn)生。因此,ZONs通過誘發(fā)細(xì)胞自噬效應(yīng),加速內(nèi)化ZONs納米顆粒的溶解、釋放鋅離子,進(jìn)而上調(diào)胞內(nèi)ROS產(chǎn)生,最終導(dǎo)致細(xì)胞死亡,揭示了氧化鋅納米顆粒在HeLa細(xì)胞中誘導(dǎo)促進(jìn)細(xì)胞死亡的自噬的初步機(jī)...

【文章頁數(shù)】：115 頁

【學(xué)位級別】：博士

【文章目錄】：
摘要
ABSTRACT
第1章 緒論
    1.1 納米材料
        1.1.1 納米材料的概述
        1.1.2 納米材料在生物醫(yī)藥領(lǐng)域中的應(yīng)用
        1.1.3 納米材料與蛋白質(zhì)的相互作用
    1.2 細(xì)胞自噬
        1.2.1 細(xì)胞自噬的概括
        1.2.2 細(xì)胞自噬的過程及形成機(jī)制
        1.2.3 細(xì)胞自噬的調(diào)控
        1.2.4 細(xì)胞自噬的檢測方法
        1.2.5 自噬與癌癥
        1.2.6 納米材料引發(fā)細(xì)胞自噬
            1.2.    6.1 引發(fā)自噬是納米材料的一種普遍效應(yīng)
                1.2.6.1.1 無機(jī)納米材料
                1.2.6.1.2 有機(jī)納米材料
    1.3 本論文的選題思路及內(nèi)容
        1.3.1 納米材料引起促進(jìn)細(xì)胞死亡的自噬效應(yīng)
        1.3.2 增強(qiáng)化療藥物對癌細(xì)胞的殺傷是癌癥治療的發(fā)展趨勢
        1.3.3 納米材料可用于增強(qiáng)化療藥物對癌細(xì)胞的殺傷
        1.3.4 調(diào)控細(xì)胞內(nèi)突變型p53蛋白的水平可以用于癌癥治療
        1.3.5 本論文的主要研究內(nèi)容及意義
第2章 氧化鋅納米材料在化療增敏中的應(yīng)用及初步機(jī)制研究
    2.1 實(shí)驗(yàn)結(jié)果和討論
        2.1.1 氧化鋅納米材料的合成和表征
        2.1.2 氧化鋅納米顆粒誘導(dǎo)細(xì)胞發(fā)生自噬
        2.1.3 氧化鋅納米顆粒誘導(dǎo)細(xì)胞發(fā)生完整的細(xì)胞自噬
        2.1.4 氧化鋅納米顆粒處理提高了溶酶體降解能力
        2.1.5 氧化鋅納米顆粒誘導(dǎo)細(xì)胞自噬通路探究
        2.1.6 氧化鋅納米顆粒誘導(dǎo)的細(xì)胞自噬促進(jìn)癌細(xì)胞死亡
        2.1.7 鋅離子釋放促進(jìn)氧化鋅納米顆粒誘導(dǎo)的癌細(xì)胞死亡
        2.1.8 鋅離子釋放導(dǎo)致的ROS產(chǎn)生促進(jìn)氧化鋅納米顆粒誘導(dǎo)的癌細(xì)胞死亡
        2.1.9 自噬促進(jìn)氧化鋅納米顆粒引起的鋅離子釋放
        2.1.10 氧化鋅納米顆粒誘導(dǎo)的細(xì)胞自噬和鋅離子釋放增強(qiáng)癌細(xì)胞對低劑量化療藥物的敏感性
    2.2 實(shí)驗(yàn)結(jié)果和討論
第3章 氧化鋅納米材料誘導(dǎo)突變型p53蛋白的自噬性降解
    3.1 實(shí)驗(yàn)結(jié)果和討論
        3.1.1 氧化鋅納米材料加速突變型p53蛋白異聚體的降解
        3.1.2 氧化鋅納米材料與鋅離子對突變型p53蛋白的降解和對癌細(xì)胞殺傷對比
        3.1.3 氧化鋅納米材料誘導(dǎo)突變型p53蛋白異聚體的自噬性降解
        3.1.4 抑制自噬能抑制氧化鋅納米材料介導(dǎo)的含突變型p53蛋白癌細(xì)胞死亡
    3.2 實(shí)驗(yàn)結(jié)果和討論
參考文獻(xiàn)
致謝
縮略語
在讀期間發(fā)表的學(xué)術(shù)論文與取得的其他研究成果
附錄 實(shí)驗(yàn)原理及方法
    1.1 實(shí)驗(yàn)材料
    1.2 實(shí)驗(yàn)方法



本文編號：3834954