促甲狀腺激素(TSH)對(duì)裸鼠甲狀腺乳頭狀癌組織的影響及意義
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【摘要】:目的:甲狀腺乳頭狀癌術(shù)后患者長(zhǎng)期服用超生理需要量的甲狀腺素會(huì)產(chǎn)生主要針對(duì)心血管和骨骼的不良影響。長(zhǎng)期促甲狀腺激素抑制會(huì)使患者心率加快,頻發(fā)的房性期前收縮。而絕經(jīng)后婦女促甲狀腺激素≤0.03m U/L,骨質(zhì)疏松導(dǎo)致骨折的風(fēng)險(xiǎn)增加2倍[1]。甲狀腺乳頭狀癌中約有10%的患者出現(xiàn)復(fù)發(fā),其中只有一小部分會(huì)因復(fù)發(fā)而死亡,甲狀腺乳頭狀癌患者的促甲狀腺激素水平到底應(yīng)該抑制到多少能夠使患者受益還尚未有明確的研究可以說(shuō)明。本研究旨在探討不同濃度的促甲狀腺激素對(duì)甲狀腺乳頭狀癌生長(zhǎng)的作用,為促甲狀腺激素抑制的臨床用藥提供理論依據(jù)。方法:35只體重在7~9克直間的雄性BALB/c-nu/nu裸小鼠按照完全隨機(jī)化原則分為7組。取人乳頭狀甲狀腺癌細(xì)胞系TPC-1,以1×10~6細(xì)胞數(shù)制成100ul細(xì)胞懸液接種于35只裸小鼠皮下,并分別給予不同濃度的TSH:對(duì)照組(0m U/L)、2m U/L、4m U/L、8m U/L、12m U/L、16m U/L、20m U/L。觀察并測(cè)量各組瘤體大小,并用放射免疫分析法測(cè)定瘤體組織勻漿中甲狀腺球蛋白(TG)的含量。結(jié)果:1甲狀腺乳頭狀癌細(xì)胞的培養(yǎng)將培養(yǎng)瓶放于37℃,5%濃度的CO_2的培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng)。4-5d后,大量細(xì)胞貼壁。進(jìn)入甲狀腺乳頭狀癌細(xì)胞的潛伏期,期間細(xì)胞的偽足進(jìn)一步伸長(zhǎng),細(xì)胞呈多角形,細(xì)胞核及細(xì)胞體積逐漸增大。5-7d后,細(xì)胞進(jìn)入生長(zhǎng)較快增殖期,細(xì)胞繼續(xù)伸長(zhǎng)且向四周生長(zhǎng),彼此連接,呈長(zhǎng)梭形,幾乎無(wú)圓形及橢圓形細(xì)胞,已貼滿培養(yǎng)瓶底一半以上。7-8d后,于培養(yǎng)瓶中形成單層細(xì)胞。每天定時(shí)觀察細(xì)胞生長(zhǎng)情況,細(xì)胞生長(zhǎng)密度大于90%,進(jìn)行細(xì)胞的傳代。在顯微鏡下計(jì)數(shù)并記錄,然后制備成細(xì)胞懸液,每只小鼠注射細(xì)胞數(shù)為1×10~6個(gè)。2不同濃度的TSH組裸小鼠的生長(zhǎng)狀況TPC-1細(xì)胞頸背部皮下注射接種35只雄性BALB/c-nu/nu裸小鼠,16天后均成瘤。所有裸小鼠均成活。移植瘤生長(zhǎng)情況良好,35只裸小鼠在16天內(nèi)生長(zhǎng)狀態(tài)良好,活動(dòng)量與進(jìn)食飲水量無(wú)明顯異常。3不同濃度TSH組裸鼠瘤體體積大小的比較運(yùn)用公式(體積=長(zhǎng)×寬×寬÷2)計(jì)算出腫瘤的體積(單位:mm3),計(jì)量資料采用方差分析,最終結(jié)果用(均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差)表示:1組:97.00±25.25、2組:209.70±96.91、3組:520.81±184.86、4組:1398.98±97.24、5組:2196.81±162.39、6組:2764.33±228.29、7組:3024.00±199.87。通過(guò)統(tǒng)計(jì)軟件SPSS13.0,根據(jù)測(cè)定數(shù)據(jù),P0.05,說(shuō)明各組之間有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。體積呈增大趨勢(shì)。計(jì)算多個(gè)樣本均數(shù)間的多重比較采用SNK-q檢驗(yàn),1組和2組差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,繪制折線圖。測(cè)體積與TSH濃度分組的Pearson相關(guān)性R2=0.973,相關(guān)性良好且呈正相關(guān)。4不同濃度TSH組裸鼠瘤體組織勻漿甲狀腺球蛋白濃度含量的比較經(jīng)蛋白校正后,最終結(jié)果用(均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差)表示,測(cè)出各組甲狀腺球蛋白(TG)濃度含量(單位:ng/mgpro):1組:1.50±0.01、2組:1.50±0.02、3組:1.68±0.11、4組:1.91±0.10、5組:2.02±0.03、6組:2.15±0.05、7組:2.26±0.13.通過(guò)統(tǒng)計(jì)軟件SPSS13.0,計(jì)量資料采用方差分析,計(jì)算多個(gè)樣本的F檢驗(yàn),P0.05,說(shuō)明各組之間有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。TG呈增高趨勢(shì)。計(jì)算多個(gè)樣本均數(shù)間的多重比較采用SNK-q檢驗(yàn),1組和2組差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,繪制折線圖。測(cè)TG與TSH濃度分組的Pearson相關(guān)性R~2=0.956,相關(guān)性良好且呈正相關(guān)。結(jié)論:1 TSH可以提高構(gòu)建甲狀腺乳頭狀癌裸鼠模型的成功率。2 TSH對(duì)皮下接種甲狀腺乳頭狀癌細(xì)胞(TPC-1系)裸鼠的成瘤具有促進(jìn)作用,隨著TSH濃度的增加,腫瘤體積呈增大趨勢(shì)。3 TSH對(duì)皮下接種甲狀腺乳頭狀癌細(xì)胞(TPC-1系)裸鼠的甲狀腺球蛋白(TG)的分泌具有促進(jìn)作用,隨著TSH濃度的增加,TG濃度含量呈增高趨勢(shì)。4 TG的濃度含量與腫瘤體積的大小呈正相關(guān)趨勢(shì)。5動(dòng)態(tài)觀察TSH對(duì)裸鼠在體甲狀腺乳頭狀癌腫瘤組織生長(zhǎng)的作用,為臨床上個(gè)體化TSH抑制治療提供參考依據(jù)。
【關(guān)鍵詞】:甲狀腺乳頭狀癌 促甲狀腺激素 內(nèi)分泌治療 細(xì)胞培養(yǎng) 甲狀腺球蛋白
【學(xué)位授予單位】:河北醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2016
【分類(lèi)號(hào)】:R736.1
【目錄】:
- 中文摘要4-7
- 英文摘要7-11
- 前言11-13
- 材料與方法13-20
- 結(jié)果20-22
- 附圖22-28
- 附表28-29
- 討論29-32
- 結(jié)論32-33
- 參考文獻(xiàn)33-36
- 綜述 甲狀腺乳頭狀癌的術(shù)后輔助治療36-48
- 參考文獻(xiàn)43-48
- 致謝48-49
- 個(gè)人簡(jiǎn)歷49
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,本文編號(hào):380879
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