目的明確DNMT1和EZH2在mi R-200b/a/429啟動(dòng)子區(qū)域相互作用協(xié)同調(diào)控啟動(dòng)子甲基化機(jī)制的存在,研究其調(diào)控mi R-200b/a/429表達(dá)下調(diào)機(jī)制,并探討表觀遺傳學(xué)藥物5-氮雜胞苷(5-Azacytidine)和DZNep對于腫瘤生長的影響。方法第一部分是選取胃腺癌細(xì)胞(MGC-803和BGC-823細(xì)胞)和膠質(zhì)瘤細(xì)胞(U87細(xì)胞)作為研究對象,應(yīng)用5-氮雜胞苷(5-Azacytidine)或DZNep分別作用于上述細(xì)胞系,提取各細(xì)胞株總RNA應(yīng)用RT-PCR技術(shù)檢測mi R-200b/a/429在處理前后的表達(dá)情況;將EZH2 si RNA或DNMT1 si RNA應(yīng)用細(xì)胞轉(zhuǎn)染技術(shù)導(dǎo)入細(xì)胞,提取各細(xì)胞株總RNA采用RT-PCR技術(shù)檢測mi R-200b/a/429在處理前后的表達(dá)情況,提取經(jīng)上述四種處理(5-氮雜胞苷、DZNep、EZH2 si RNA和DNMT1 si RNA)的各細(xì)胞株總蛋白采用免疫印跡(Western Blot)技術(shù)檢測相關(guān)蛋白在蛋白水平的表達(dá)情況。第二部分應(yīng)用co-IP技術(shù)檢測EZH2和DNMT1在體內(nèi)相互作用情況,CHIP分析DNMT1與mi...

【文章頁數(shù)】：66 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
中文摘要
Abstract
縮略語/符號說明
前言
    研究現(xiàn)狀、成果
    研究目的、方法
一、DZNep（si-EZH2）及 5-AZa（si-DNMT1）影響甲基化及mi R-200b/a/429的研究
    1.1 對象和方法
    1.2 結(jié)果
    1.3 討論
    1.4 小結(jié)
二、DNMT1與EZH2共同調(diào)控mi R-200b/a/429表達(dá)的研究
    2.1 對象和方法
    2.2 結(jié)果
    2.3 討論
    2.4 小結(jié)
三、裸鼠模型的建立及表觀遺傳學(xué)藥物（DZNep、5-AZa）對于腫瘤生長的研究
    3.1 對象和方法
    3.2 結(jié)果
    3.3 討論
    3.4 小結(jié)
結(jié)論
參考文獻(xiàn)
發(fā)表論文和參加科研情況說明
綜述
    綜述參考文獻(xiàn)
致謝



本文編號：3804688