目的觀察游離脂肪酸(FFA)對(duì)人前列腺癌細(xì)胞PC-3生物學(xué)行為的影響,并探討其可能的分子機(jī)制。方法將油酸(OA)和棕櫚酸(PA)2:1混合后,作用于體外培養(yǎng)的人前列腺癌細(xì)胞PC-3,q RT-PCR、Western Blot及免疫組織化學(xué)技術(shù)檢測(cè)前列腺癌細(xì)胞FABP4、PPARγ、VEGF-A、m TOR、Vimentin和AMPK的m RNA及蛋白表達(dá)水平;流式細(xì)胞儀檢測(cè)對(duì)細(xì)胞周期的影響,Transwell法檢測(cè)對(duì)PC-3細(xì)胞遷移和侵襲能力的影響;運(yùn)用細(xì)胞轉(zhuǎn)染和RNA干擾技術(shù)上/下調(diào)PPARγ,以及FFA作用于PC-3細(xì)胞的同時(shí),下調(diào)PPARγ,檢測(cè)VEGF-A、m TOR和Vimentin的m RNA表達(dá)水平,檢測(cè)對(duì)PC-3細(xì)胞內(nèi)脂質(zhì)含量的影響,檢測(cè)對(duì)細(xì)胞周期的影響,檢測(cè)對(duì)細(xì)胞遷移和侵襲能力的影響。運(yùn)用細(xì)胞轉(zhuǎn)染和RNA干擾技術(shù)上/下調(diào)AMPK,以及FFA作用于PC-3細(xì)胞的同時(shí),下調(diào)AMPK,檢測(cè)對(duì)PC-3細(xì)胞生物學(xué)行為的影響。結(jié)果1.1.5 m M FFA作用于PC-3細(xì)胞48小時(shí)后,FABP4、PPARγ、VEGF-A的m RNA及蛋白表達(dá)水平顯著高于空白對(duì)照組,差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)...

【文章頁數(shù)】：64 頁

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
abstract
中英文縮略詞對(duì)照表
前言
實(shí)驗(yàn)材料
    1.1 細(xì)胞系和質(zhì)粒
    1.2 相關(guān)試劑及儀器
    1.3 各種引物序列表
實(shí)驗(yàn)方法
    2.1 細(xì)胞培養(yǎng)
    2.2 細(xì)胞生物學(xué)行為實(shí)驗(yàn)
    2.3 細(xì)胞生化指標(biāo)檢測(cè)
    2.4 細(xì)胞系RNA提取
    2.5 cDNA合成及逆轉(zhuǎn)錄
    2.6 實(shí)時(shí)定量PCR
    2.7 細(xì)胞系的蛋白提取
    2.8 蛋白濃度測(cè)定(BCA法)
    2.9 Western Blot
    2.10 活化菌株
    2.11 質(zhì)粒提取
    2.12 統(tǒng)計(jì)方法
結(jié)果
    3.1 FFA對(duì)PC-3細(xì)胞生物學(xué)行為的影響
    3.2 上調(diào)PPARγ對(duì)PC-3細(xì)胞生物學(xué)行為的影響
    3.3 下調(diào)PPARγ對(duì)PC-3細(xì)胞生物學(xué)行為的影響
    3.4 FFA干預(yù)的同時(shí)下調(diào)PPARγ,對(duì)PC-3細(xì)胞生物學(xué)行為的影響
    3.5 AMPK對(duì)PC-3細(xì)胞生物學(xué)行為的影響
討論
    4.1 高濃度FFA可導(dǎo)致PC-3細(xì)胞增殖、侵襲、遷移能力增加
    4.2 FABP4/PPARγ在高濃度FFA促進(jìn)PC-3細(xì)胞生物學(xué)行為改變過程中的作用
    4.3 AMPK對(duì)PC-3細(xì)胞生物學(xué)行為的影響
    4.4 AMPK和PPARγ之間的作用
結(jié)論
參考文獻(xiàn)
綜述
    參考文獻(xiàn)
致謝
作者簡介
導(dǎo)師評(píng)閱表



本文編號(hào)：3803339