背景:乳腺癌是女性最常見的惡性腫瘤之一,嚴(yán)重危害女性健康。發(fā)病率占全身各種惡性腫瘤的7%¹0%,死亡率約占確診率的34.17%。早期診斷和有效治療可降低乳腺癌的死亡率。藥物化療在乳腺癌的治療中起著重要作用。然而腫瘤細(xì)胞耐藥性的產(chǎn)生常常導(dǎo)致腫瘤化療失敗。腫瘤細(xì)胞對化療藥物的耐藥可分為內(nèi)在性和獲得性兩類。內(nèi)在性耐藥是指腫瘤細(xì)胞固有的對抗癌藥物不敏感,而獲得性耐藥是指腫瘤細(xì)胞在藥物治療初始時對化療藥物敏感,但經(jīng)過幾個周期的藥物治療后,逐漸產(chǎn)生藥物療效下降,對藥物越來越耐受。根據(jù)耐藥表型的不同,細(xì)胞耐藥可分為原藥耐藥(primary drug resistance,PDR)和多藥耐藥(multidrug resistance,MDR)。PDR是指僅對誘導(dǎo)藥物產(chǎn)生耐藥。而MDR是指腫瘤細(xì)胞對一種抗腫瘤藥物產(chǎn)生耐藥的同時,對其他結(jié)構(gòu)不同和作用機(jī)制不同的抗腫瘤藥物也產(chǎn)生交叉耐藥。MDR是腫瘤化療失敗的主要原因,也是腫瘤化療亟待解決的問題。目前,MDR的機(jī)制主要分為外排(Pump)和非外排(Non-pump)耐藥兩個方面。藥物外排的產(chǎn)生主要是因?yàn)锳BC轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白家族成員蛋白表達(dá)異常...

【文章頁數(shù)】：53 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
中文摘要
英文摘要
前言
材料和方法
    1.實(shí)驗(yàn)材料
        1.1細(xì)胞株
        1.2 主要儀器
        1.3 主要試劑
        1.4 主要試劑配制
    2.實(shí)驗(yàn)方法
        2.1 細(xì)胞復(fù)蘇、培養(yǎng)、傳代、凍存
        2.2 MTT法檢測MCF-7 和MCF-7/ADR細(xì)胞的藥物敏感性
        2.3 Western-blot方法檢測MCF-7 和MCF-7/ADR細(xì)胞中膜聯(lián)蛋白A5蛋白水平的表達(dá)
        2.4 MCF-7 和MCF-7/ADR細(xì)胞RNA提取和qRT-PCR
        2.5 流式細(xì)胞儀檢測細(xì)胞表面P-gp蛋白的表達(dá)
        2.6 熒光共聚焦顯微鏡分別檢測細(xì)胞內(nèi)阿霉素的紅色熒光強(qiáng)度和羅丹明123的綠色熒光強(qiáng)度
        2.7 293T細(xì)胞的轉(zhuǎn)染、病毒收獲與病毒滴度測定
        2.8 嘌呤霉素（Puromycin）最優(yōu)濃度篩選
        2.9 慢病毒感染細(xì)胞
        2.10 Western-blot方法檢測PARP蛋白及其水解片段CleavedPARP的蛋白表達(dá)水平
        2.11 統(tǒng)計學(xué)分析
結(jié)果
    1.人乳腺癌耐阿霉素細(xì)胞株MCF-7/ADR細(xì)胞中膜聯(lián)蛋白A5的表達(dá)高于敏感株MCF-7 細(xì)胞
    2.人乳腺癌耐阿霉素細(xì)胞株MCF-7/ADR對阿霉素耐藥，順鉑、多西他賽的敏感性低于敏感株MCF-7
    3. 膜聯(lián)蛋白A5敲低序列的構(gòu)建及下調(diào)MCF-7/ADR細(xì)胞中膜聯(lián)蛋白A5基因的表達(dá)
    4.下調(diào)MCF-7/ADR細(xì)胞中膜聯(lián)蛋白A5的表達(dá)可以增加其藥物敏感性
    5.下調(diào)MCF-7/ADR細(xì)胞中膜聯(lián)蛋白A5的表達(dá)可以增加細(xì)胞內(nèi)阿霉素的熒光強(qiáng)度
    6.下調(diào)MCF-7/ADR細(xì)胞中膜聯(lián)蛋白A5的表達(dá)減弱乳腺癌耐藥細(xì)胞對藥物的外排能力
    7.下調(diào)MCF-7/ADR細(xì)胞中膜聯(lián)蛋白A5的表達(dá)可以促進(jìn)細(xì)胞凋.28（四）討論
討論
結(jié)論
參考文獻(xiàn)
綜述
    參考文獻(xiàn)
致謝



本文編號：3790865