目的:探索RASSF1A在正常的胃黏膜上皮細(xì)胞及不同的胃癌細(xì)胞株蛋白含量差異,分析RASSF1A在胃癌的表達(dá)與生存預(yù)后的相關(guān)性。并通過體外實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證RASSF1A影響順鉑在胃癌細(xì)胞中的藥物敏感度,及進(jìn)一步探索RASSF1A通過調(diào)控JNK通路介導(dǎo)胃癌EMT的機(jī)制,為胃癌的靶向治療提供理論依據(jù)。方法:1.首先通過生物信息庫,分析RASSF1A基因在胃癌和正常組織中表達(dá)差異及生存預(yù)后。然后以體外培養(yǎng)的胃黏膜細(xì)胞株GES-1,胃癌細(xì)胞株MGC-803、SGC-7901、HGC-27及AGS作為研究對象,將實(shí)驗(yàn)分成5組,以正常的胃黏膜上皮細(xì)胞株GES-1作為對照組,利用蛋白免疫印跡實(shí)驗(yàn)(Western Blot,WB)技術(shù)檢測RASSF1A在不同的胃黏膜上皮細(xì)胞株中的蛋白表達(dá)水平;2.將攜帶NC和RASSF1A質(zhì)粒的慢病毒,轉(zhuǎn)染MGC-803和SGC-7901胃癌細(xì)胞株,并用Western Blot技術(shù)檢測RASSF1A蛋白表達(dá)水平驗(yàn)證轉(zhuǎn)染效率,然后進(jìn)行CCK8實(shí)驗(yàn)證明RASSF1A影響順鉑對胃癌細(xì)胞的毒性;3.以體外培養(yǎng)的胃癌細(xì)胞株MGC-803、SGC-7901作為研究對象,將實(shí)驗(yàn)分成4組,D...

【文章頁數(shù)】：70 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
主要中英文縮略詞表
第1章 前言
第2章 實(shí)驗(yàn)材料
    2.1 實(shí)驗(yàn)材料
    2.2 研究對象
    2.3 實(shí)驗(yàn)儀器和設(shè)備
    2.4 主要試劑的配制
        2.4.1 細(xì)胞培養(yǎng)基
        2.4.2 細(xì)胞凍存液
        2.4.3 Anisomycin溶液
        2.4.4 Western blot.所用溶液
第3章 實(shí)驗(yàn)方法
    3.1 數(shù)據(jù)資料收集
    3.2 細(xì)胞復(fù)蘇
    3.3 細(xì)胞換液
    3.4 細(xì)胞傳代
    3.5 細(xì)胞凍存
    3.6 細(xì)胞計(jì)數(shù)
    3.7 慢病毒轉(zhuǎn)染胃癌細(xì)胞的方法
    3.8 CCK8實(shí)驗(yàn)
    3.9 細(xì)胞分組培養(yǎng)及干預(yù)
    3.10 細(xì)胞蛋白的提取
    3.11 BCA蛋白的測定
    3.12 Western Blot
    3.13 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理
第4章 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
第5章 討論
第6章 結(jié)論
參考文獻(xiàn)
綜述
    參考文獻(xiàn)
攻讀碩士學(xué)位期間科研成果
致謝



本文編號：3781026