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融合基因重組卡介苗對腫瘤的抑制作用

發(fā)布時間:2022-12-18 05:45
  目的研究EB病毒基因BZLF1和LMP2融合基因重組卡介苗(recombinant BCG, rBCG)對腫瘤的抑制作用。方法建立EB病毒陽性腫瘤(NPRC18)荷瘤小鼠(C57BL/6J)模型,根據(jù)注射的藥物不同,分為rBCG組、BCG組、轉(zhuǎn)pMV261載體BCG組(pMV261+BCG)、PBS組。采取頸背部皮下多點注射方式進行免疫,對荷瘤小鼠腫瘤重量、成瘤時間、存活情況進行分析,C57BL/6J小鼠腫瘤抑瘤實驗結(jié)束后,將小鼠的腫瘤裂解后用流式檢測CD4+T、CD8+T細胞增殖情況,HE染色分析小鼠腫瘤組織中淋巴細胞浸潤情況;使用統(tǒng)計學軟件SPSS 19.0對rBCG抑瘤效果進行單因素方差分析(One-way ANOVA)。結(jié)果重組BCG組分別用BZLF1和LMP2一抗雜交后,出現(xiàn)雜交目的蛋白,其蛋白質(zhì)分子量約為70 KD,與對照相比,重組卡介苗對腫瘤抑制作用明顯,小鼠成瘤時間延遲,平均成瘤時間約22 d,與對照PBS注射組8 d相比,其差異均有統(tǒng)計學意義(P≤0.01);PBS組腫瘤重量為6.8 g,重組BCG組腫瘤重量為1.01 g,抑瘤率約為81%。經(jīng)流式分析,重組BCG組產(chǎn)... 

【文章頁數(shù)】:5 頁

【文章目錄】:
1 材料與方法
    1.1 材料
    1.2 方法
        1.2.1 目的蛋白的檢測
        1.2.2 rBCG抗腫瘤實驗
        1.2.3 抑瘤實驗
        1.2.4 腫瘤的生長
        1.2.5 流式檢測
        1.2.6 腫瘤組織的HE染色
    1.3 統(tǒng)計學分析
2 結(jié)果
    2.1 蛋白印跡分析
    2.2 重組BCG抗腫瘤分析
    2.3 重組BCG的抑瘤作用
    2.4 CD4+T細胞、CD8+T細胞增殖情況分析
    2.5 腫瘤組織形態(tài)學
3 討論


【參考文獻】:
期刊論文
[1]重組卡介苗對EB病毒陽性腫瘤的抑制作用研究[J]. 薛慶節(jié),李運清,楊春青,楊媛媛,陳廷,李士根.  中華實驗和臨床病毒學雜志. 2017 (02)
[2]人IFN-γ與GM-CSF融合基因重組BCG表達與鑒定[J]. 尹國才,李運清,楊媛媛,譚文彬,薛慶節(jié),陳廷.  中國熱帶醫(yī)學. 2017(02)
[3]GM-CSF與BZLF1融合基因修飾的重組BCG的構(gòu)建與表達[J]. 薛慶節(jié),楊媛媛,胡文潔,呂厚東,李士根,陳廷.  中國熱帶醫(yī)學. 2014(09)

博士論文
[1]LMP1靶向嵌合抗原受體T細胞對EBV相關惡性腫瘤殺傷作用的實驗研究[D]. 唐小軍.南京醫(yī)科大學 2014



本文編號:3721466

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