研究背景與目的:非小細(xì)胞肺癌（non-small cell lung cancer,NSCLC）是世界上最常見(jiàn)的惡性腫瘤,總的5年生存率僅15%,已成為惡性腫瘤首位死亡原因。近年來(lái)小分子靶向藥物的發(fā)展,對(duì)NSCLC的治療產(chǎn)生了重大影響。然而,由于靶點(diǎn)局限性及耐藥性等問(wèn)題,大多數(shù)NSCLC病人并沒(méi)有合適靶向藥物可選用。為改變NSCLC的治療現(xiàn)狀,迫切需要尋找新的治療靶點(diǎn)。神經(jīng)囊泡膜蛋白Neurensin-2（NRSN2）是新近發(fā)現(xiàn)的基因,編碼一種多通道囊泡膜蛋白,主要參與囊泡運(yùn)輸和神經(jīng)信號(hào)傳導(dǎo)。針對(duì)NRSN2的以往研究主要集中在神經(jīng)信號(hào)傳導(dǎo)。近年研究顯示NRSN2表達(dá)異常與腫瘤發(fā)生有關(guān)。有趣的是,在肝癌和惡性黑色素瘤的研究中發(fā)現(xiàn),NRSN2承擔(dān)著截然相反的功能——抑癌和或促癌。我們?cè)跈z索Oncomine數(shù)據(jù)庫(kù)（基因芯片數(shù)據(jù)庫(kù)）中發(fā)現(xiàn)NRSN2在NSCLC呈中高表達(dá)。研究也表明NSCLC（尤其是肺腺癌）與神經(jīng)內(nèi)分泌失調(diào)緊密相關(guān)。因此,我們推測(cè)NRSN2可能與NSCLC密切關(guān)聯(lián)。磷脂酰肌醇3-激酶/蛋白激酶B/和哺乳動(dòng)物雷帕霉素靶蛋白（PI3K/AKT/m TOR）信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路是重要的細(xì)胞內(nèi)... 

【文章頁(yè)數(shù)】：85 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：博士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
中英文縮略詞表
第1章 引言
    1 概述
    2 NRSN2的研究進(jìn)展
        2.1 NRSN2的特征、表達(dá)
        2.2 NRSN2在細(xì)胞中的功能
        2.3 NRSN2與腫瘤
    3 本課題的研究背景、研究目的和研究?jī)?nèi)容
第2章 NRNS2在非小細(xì)胞肺癌組織及細(xì)胞中的表達(dá)
    1 材料與方法
        1.1 組織標(biāo)本
        1.2 實(shí)驗(yàn)細(xì)胞
        1.3 主要試劑
        1.4 實(shí)驗(yàn)主要儀器和設(shè)備
        1.5 實(shí)驗(yàn)方法
    2 數(shù)據(jù)處理
    3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
        3.1 基因數(shù)據(jù)庫(kù)檢索結(jié)果
        3.2 NRSN2mRNA肺癌組織及癌旁組織中表達(dá)
        3.3 NRSN2蛋白在肺癌組織及相應(yīng)癌旁組織中的表達(dá)水平
        3.4 NRSN2蛋白在3種肺癌細(xì)胞株中的表達(dá)
        3.5 免疫組化檢測(cè)NRSN2蛋白在肺癌組織及正常肺組織中表達(dá)
        3.6 NRSN2表達(dá)與肺癌各臨床因素的相關(guān)性
    4 討論
    5 本章小結(jié)
第3章 NRSN2在非小細(xì)胞肺癌中作用及機(jī)制
    第1節(jié) NRSN2過(guò)表達(dá)及沉默的肺癌細(xì)胞模型建立
        1 材料與方法
            1.1 實(shí)驗(yàn)細(xì)胞
            1.2 主要試劑
            1.3 實(shí)驗(yàn)主要儀器和設(shè)備
            1.4 實(shí)驗(yàn)方法
        2 結(jié)果
            2.1 重組質(zhì)粒pCDH-CMV/NRSN2的提取純化及酶切鑒定
            2.2 重組質(zhì)粒pCDH-CMV/NRSN2的測(cè)序鑒定
            2.3 lenti-NRSN2重組質(zhì)粒在A(yíng)549肺癌細(xì)胞的表達(dá)
            2.4 轉(zhuǎn)染si-RNA后A549肺癌細(xì)胞NRSN2的表達(dá)水平
        3 討論
            3.1 基因克隆技術(shù)
            3.2 RNA干擾
        4 小結(jié)
    第2節(jié) NRSN2在NSCLC中生物學(xué)功能及作用機(jī)制
        1 材料與方法
            1.1 實(shí)驗(yàn)細(xì)胞
            1.2 主要試劑
            1.3 實(shí)驗(yàn)主要儀器和設(shè)備
            1.4 實(shí)驗(yàn)方法
        2 數(shù)據(jù)處理
        3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
            3.1 外源性增加NRSN2表達(dá)對(duì)A549肺癌細(xì)胞生物學(xué)行為的影響
            3.2 沉默NRSN2表達(dá)對(duì)A549肺癌細(xì)胞生物學(xué)行為的影響
            3.3 NRSN2促進(jìn)NSCLC生長(zhǎng)的機(jī)制
        4 討論
            4.1 NRSN2在NSCLC中的生物學(xué)功能
            4.2 NRSN2促進(jìn)NSCLC生長(zhǎng)的機(jī)制
        5 小結(jié)
第4章 結(jié)論與展望
    4.1 結(jié)論
    4.2 進(jìn)一步工作的方向
致謝
參考文獻(xiàn)
攻讀學(xué)位期間的研究成果
綜述
    參考文獻(xiàn)
附錄


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]囊泡運(yùn)輸?shù)墓δ芘c調(diào)控機(jī)制[J]. 張程,牛洋,劉佳佳.  中國(guó)細(xì)胞生物學(xué)學(xué)報(bào). 2014(09)
[2]分子伴侶介導(dǎo)的自噬與腫瘤的關(guān)系及前景展望[J]. 解世洋.  山西醫(yī)藥雜志. 2014(16)
[3]信號(hào)肽與蛋白質(zhì)的分選轉(zhuǎn)運(yùn)[J]. 彭佳師,龔繼明.  植物生理學(xué)報(bào). 2011(01)
[4]內(nèi)體—溶酶體運(yùn)輸及其細(xì)胞功能[J]. 郝振華,李巍.  生命科學(xué). 2010(11)
[5]Decreased expression of Neurensin-2 correlates with poor prognosis in hepatocellular carcinoma[J]. Hai-Qing Ma, Xiao-Ting Liang, Jing-Jing Zhao, Hui Wang, Jian-Cong Sun, Yi-Bing Chen, Ke Pan, Jian-Chuan Xia, State Key Laboratory of Oncology in Southern China and Department of Experimental Research, Sun Yat-sen University Cancer Center, Guangzhou 510060, Guangdong Province, China.  World Journal of Gastroenterology. 2009(38)
[6]慢病毒載體的設(shè)計(jì)及應(yīng)用進(jìn)展[J]. 王淑艷,張愚.  中國(guó)生物工程雜志. 2006(11)
[7]肺癌多階段發(fā)病過(guò)程中的分子機(jī)制簡(jiǎn)述[J]. 母新華,陳照麗,赫捷.  中國(guó)肺癌雜志. 2006(02)



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