本文關(guān)鍵詞：極性蛋白Par3對宮頸癌細胞增殖、侵襲和遷移作用研究，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：目的:探討Par3蛋白在宮頸癌中的表達以及對宮頸癌細胞增殖與轉(zhuǎn)移的作用。方法:通過免疫組織化學方法檢測Par3蛋白在89例宮頸鱗癌中的表達水平。采用實時熒光定量PCR檢測PARD3在HPV陽性宮頸癌SiHa細胞和HPV陰性宮頸癌C33A細胞中的本底表達。采用基因過表達和RNA干擾技術(shù)轉(zhuǎn)染宮頸癌細胞系。運用實時熒光定量PCR和蛋白印跡技術(shù)檢測PARD3 mRNA和Par3蛋白水平變化。Transwell小室體外實驗檢測其對SiHa細胞侵襲、遷移能力的影響。流失細胞術(shù)研究其對SiHa細胞周期及凋亡的影響。結(jié)果:實時熒光定量PCR檢測PARD3基因在SiHa和C33A細胞中的表達差異無統(tǒng)計學意義。免疫組化實驗顯示Par3蛋白在正常宮頸組織強表達,宮頸鱗癌組織中弱表達。QRT-PCR和Western blot檢測提示SiHa細胞轉(zhuǎn)染基因PARD3過表達質(zhì)粒后mRNA和蛋白質(zhì)表達水平顯著增高,PARD3siRNA干擾SiHa細胞后PARD3mRNA和蛋白表達水平顯著降低;Par3蛋白低表達誘導了EMT相關(guān)基因(N-cadherin,E-cadherin andβ-Catenin)的表達變化;Transwell小室體外實驗表明Par3過表達組細胞侵襲、遷移能力明顯低于對照組(P0.05),而低表達組(干擾組)細胞侵襲、遷移能力明顯高于對照組(P0.01);流式細胞術(shù)結(jié)果顯示與空白對照相比,PARD3基因被干擾后細胞被阻滯在S期,干擾組細胞凋亡率明顯降低(P0.01);然而,上調(diào)PARD3的表達后細胞被阻滯在G0/G1期,過表達組細胞凋亡率明顯增高(P0.01)。結(jié)論:Par3在宮頸癌中的缺失表達促進了癌細胞的增殖、侵襲及遷移的能力。
【關(guān)鍵詞】：宮頸癌 Par3蛋白 遷移 侵襲
【學位授予單位】：新疆醫(yī)科大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2016
【分類號】：R737.33
【目錄】：

• 中英文縮略詞對照表5-9
• 摘要9-10
• ABSTRACT10-11
• 前言11-13
• 內(nèi)容與方法13-28
• 1. 研究對象13-16
• 1.1 組織標本及細胞系來源13
• 1.2 干擾序列13
• 1.3 主要試劑13-14
• 1.4 相關(guān)試劑配制14-15
• 1.5 主要儀器15-16
• 2. 研究內(nèi)容與方法16-27
• 2.1 免疫組織化學方法16-18
• 2.2 Si Ha細胞的培養(yǎng)18-19
• 2.3 PARD3 si RNA細胞轉(zhuǎn)染19
• 2.4 PARD3基因過表達質(zhì)粒的制備及轉(zhuǎn)染19-21
• 2.5 轉(zhuǎn)染后PARD3蛋白的Western blotting檢測21-24
• 2.6 RT-PCR檢測細胞轉(zhuǎn)染后PARD3基因m RNA的表達24
• 2.7 流式細胞凋亡檢測24-25
• 2.8 流式細胞周期檢測25
• 2.9 Transwell小室體外遷移能力的測定25-26
• 2.10 Transwell小室體外侵襲能力的測定26
• 2.11 統(tǒng)計學分析26-27
• 3.技術(shù)路線圖27-28
• 結(jié)果28-45
• 討論45-49
• 小結(jié)49-50
• 致謝50-51
• 參考文獻51-55
• 綜述55-63
• 參考文獻59-63
• 攻讀碩士學位期間發(fā)表的學位論文63-64
• 導師評閱表64

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1 盧美松;鄧鎖;王澤華;;體外模擬二氧化碳人工氣腹對宮頸癌細胞生長的影響[J];中國實用婦科與產(chǎn)科雜志;2007年01期

2 周晨慧;;干擾素-γ對宮頸癌細胞免疫分子表達的影響[J];現(xiàn)代醫(yī)藥衛(wèi)生;2007年01期

3 潘惠艷;趙群;詹陽;趙麗紅;張衛(wèi)華;吳玉梅;;電壓門控鈉離子通道表達對宮頸癌細胞增殖侵襲轉(zhuǎn)移作用的研究[J];中國腫瘤臨床;2012年04期

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本文編號：371260