腫瘤已經(jīng)有近5000年的歷史,從第一例腫瘤病人被診斷至今漫長的歲月中,它一直是威脅人類健康的重大疾病之一,超過90%的腫瘤病人死亡是由腫瘤轉(zhuǎn)移造成的。腫瘤細胞從原位腫瘤脫落后會進入血液循環(huán)和淋巴循環(huán),在遇到合適的生存環(huán)境時增殖形成遠端病灶,研究從原位腫瘤轉(zhuǎn)移出來的腫瘤細胞對于探索腫瘤轉(zhuǎn)移機制、促進臨床檢測和腫瘤預(yù)后具有非常重要的意義。近些年來,隨著腫瘤檢測技術(shù)的發(fā)展,人類對腫瘤轉(zhuǎn)移的理解越來越深入。傳統(tǒng)的腫瘤細胞病理檢測技術(shù)多為體外檢測,需要進行采血或者制作病理切片對腫瘤細胞進行檢測。這在很大程度上改變了腫瘤細胞的生理環(huán)境,增加了檢測結(jié)果的誤差,而且無法長時間連續(xù)檢測。本論文研究課題的目標是發(fā)展利用活體流式細胞術(shù)和受激拉曼散射成像技術(shù)檢測血液和淋巴結(jié)中與腫瘤轉(zhuǎn)移相關(guān)的腫瘤細胞的方法,并用這些方法研究腫瘤轉(zhuǎn)移過程中循環(huán)腫瘤細胞團塊比例的動態(tài)變化、循環(huán)腫瘤細胞的時間分布規(guī)律,以及淋巴結(jié)中的腫瘤細胞的無標記光學檢測。目前尚沒有可行的技術(shù)手段檢測活體小動物血液中的循環(huán)腫瘤細胞團塊,因此我們首先搭建了用于實驗的活體流式細胞儀,利用它檢測小鼠原位肝癌模型和皮下前列腺癌模型血液中的循環(huán)腫瘤細胞團塊。... 

【文章頁數(shù)】：149 頁

【學位級別】：博士

【文章目錄】：
摘要
ABSTRACT
中英文對照表
第一章 緒論
    1.1 引言
    1.2 血液與淋巴循環(huán)中的腫瘤細胞
    1.3 腫瘤細胞檢測方法現(xiàn)狀概述
        1.3.1 傳統(tǒng)檢測技術(shù)在腫瘤細胞檢測上的局限
        1.3.2 腫瘤細胞的體外檢測方法
        1.3.3 腫瘤細胞的活體檢測方法
    1.4 流式細胞術(shù)
        1.4.1 體外流式細胞術(shù)
        1.4.2 活體流式細胞術(shù)
    1.5 受激拉曼散射成像技術(shù)
        1.5.1 拉曼散射與拉曼光譜
        1.5.2 受激拉曼散射成像技術(shù)
    1.6 本課題研究內(nèi)容與意義
第二章 活體流式細胞術(shù)在循環(huán)腫瘤細胞團塊檢測中的應(yīng)用
    2.1 引言
        2.1.1 循環(huán)腫瘤細胞團塊研究現(xiàn)狀
        2.1.2 循環(huán)腫瘤細胞團塊檢測方法概述
        2.1.3 本章研究問題
    2.2 實驗材料與方法
        2.2.1 實驗細胞和動物
        2.2.2 動物模型構(gòu)建
        2.2.3 活體流式細胞術(shù)
        2.2.4 數(shù)據(jù)處理方法
        2.2.5 統(tǒng)計方法
    2.3 實驗結(jié)果
        2.3.1 根據(jù)信號峰形狀判別循環(huán)腫瘤細胞團塊
        3.3.2 原位肝癌模型與前列腺皮下模型中循環(huán)腫瘤細胞團塊的數(shù)量和比例變化
    2.4 本章小結(jié)與討論
        2.4.1 本章小結(jié)
        2.4.2 討論
第三章 活體流式細胞術(shù)在研究循環(huán)腫瘤細胞時間分布中的應(yīng)用
    3.1 引言
        3.1.1 腫瘤時間分布研究背景
        3.1.2 本章研究問題
    3.2 實驗材料與方法
        3.2.1 實驗細胞與動物
        3.2.2 實驗數(shù)據(jù)獲取與處理
        3.2.3 統(tǒng)計分析過程
    3.3 實驗結(jié)果
        3.3.1 通過直接觀察發(fā)現(xiàn)循環(huán)腫瘤細胞時間分布不均
        3.3.2 肝癌模型中的循環(huán)腫瘤細胞時間分布不均
        3.3.3 前列腺癌模型中的循環(huán)腫瘤細胞時間分布不均
    3.4 本章小結(jié)與討論
        3.4.1 本章小結(jié)
        3.4.2 討論
第四章 受激拉曼成像技術(shù)用于檢測淋巴結(jié)中的腫瘤細胞
    4.1 引言
        4.1.1 淋巴結(jié)與腫瘤轉(zhuǎn)移
        4.1.2 TNM腫瘤分期系統(tǒng)
        4.1.3 本章研究內(nèi)容
    4.2 受激拉曼成像系統(tǒng)搭建
        4.2.1 光路部分
        4.2.2 實驗附件部分
    4.3 實驗材料與方法
        4.3.1 實驗細胞和動物
        4.3.2 動物實驗協(xié)議(Animal Protocol)
        4.3.3 圖像處理方法
    4.4 實驗結(jié)果
        4.4.1 正常小鼠淋巴結(jié)結(jié)構(gòu)成像
        4.4.2 皮下前列腺癌模型中的淋巴結(jié)檢測
        4.4.3 自發(fā)腫瘤小鼠中的淋巴結(jié)檢測
    4.5 本章小結(jié)與討論
        4.5.1 本章小結(jié)
        4.5.2 討論
第五章 研究總結(jié)與展望
    5.1 循環(huán)腫瘤細胞團塊的活體流式信號形狀與細胞數(shù)量和形狀的關(guān)系
    5.2 利用受激拉曼成像技術(shù)對淋巴結(jié)結(jié)構(gòu)進行無標記成像
    5.3 利用受激拉曼成像技術(shù)研究年齡增長對淋巴結(jié)的影響
    5.4 利用受激拉曼成像技術(shù)檢測黑色素瘤
    5.5 受激拉曼散射成像技術(shù)檢測靈敏度的提升
參考文獻
附錄 :程序代碼
致謝
攻讀博士學位期間學術(shù)成果



本文編號：3699048