目的 在非小細(xì)胞肺癌中,放射治療抵抗降低患者生仔率,是NSCLC治療的重要挑戰(zhàn)。已有研究表明,自分泌會(huì)影響腫瘤的輻射敏感性,但在非小細(xì)胞肺癌中,自分泌物的主要作用目前尚不明確。本研究通過觀察NSCLC細(xì)胞系（H460、H1299、A549）自分泌物對(duì)其輻射敏感性的影響,并從整體角度探尋自分泌因子增強(qiáng)細(xì)胞輻射抵抗作用的主要機(jī)制。方法采用人肺癌細(xì)胞系H460、H1299、A549體外培養(yǎng)作為研究對(duì)象,采用克隆形成實(shí)驗(yàn)聯(lián)合Transwell共培養(yǎng)比較自分泌對(duì)非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞（H460、H1299、A549）輻射敏感性的影響及293T細(xì)胞對(duì)非小細(xì)胞肺癌H460細(xì)胞輻射敏感性的影響;克隆形成實(shí)驗(yàn)比較自分泌條件培養(yǎng)基對(duì)H460細(xì)胞輻射敏感性的影響;MTT法觀察條件培養(yǎng)基對(duì)照射后H460細(xì)胞增殖情況的影響;流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)條件培養(yǎng)基對(duì)照射后H460細(xì)胞活性氧的表達(dá)情況和細(xì)胞周期的影響;qRT-PCR檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)SOD1mRNA水平的變化,蛋白免疫印跡實(shí)驗(yàn)檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)SOD1蛋白水平的變化;采用細(xì)胞免疫熒光法觀察照射后H460細(xì)胞經(jīng)條件培養(yǎng)基培養(yǎng)不同時(shí)間的γH2AX變化;蛋白免疫印跡實(shí)驗(yàn)檢測(cè)H460細(xì)胞經(jīng)條... 

【文章頁數(shù)】：66 頁

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
第一部分 自分泌物通過非外泌體依賴途徑增強(qiáng)非小細(xì)胞肺癌輻射抵抗作用的研究
    摘要
    Abstract
    前言
    實(shí)驗(yàn)材料
        1. 細(xì)胞系
        2. 主要實(shí)驗(yàn)試劑
        3. 主要實(shí)驗(yàn)耗材
        4. 主要實(shí)驗(yàn)儀器設(shè)備
        5. 主要溶液的配制
        6. 實(shí)驗(yàn)方法
        7. 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析
    實(shí)驗(yàn)結(jié)果
        1. 自分泌增強(qiáng)非小細(xì)胞肺癌輻射抗性的研究
        2. 自分泌增加照射后H460細(xì)胞ROS水平的研究
        3. 自分泌增強(qiáng)照射后H460細(xì)胞DNA修復(fù)能力的研究
        4. 外泌體對(duì)H460細(xì)胞輻射敏感性影響的研究
    討論
    參考文獻(xiàn)
第二部分 旁分泌在非小細(xì)胞肺癌輻射耐受能力傳遞中的作用研究
    摘要
    Abstract
    前言
    實(shí)驗(yàn)材料與方法
        1.1 細(xì)胞系
        1.2 試劑
        1.3 主要儀器
        1.4 細(xì)胞培養(yǎng)
        1.5 實(shí)驗(yàn)分組
        1.6 條件培養(yǎng)基的收集
        1.7 克隆形成實(shí)驗(yàn)
        1.8 細(xì)胞周期檢測(cè)
        1.9 細(xì)胞免疫熒光實(shí)驗(yàn)
        1.10 蛋白免疫印跡實(shí)驗(yàn)檢測(cè)DNA修復(fù)相關(guān)蛋白的表達(dá)情況
        1.11 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法
    實(shí)驗(yàn)結(jié)果
        2.1 H460與H460R細(xì)胞的輻射敏感性比較
        2.2 H460R細(xì)胞分泌物降低H460細(xì)胞的輻射敏感性
        2.3 H460R細(xì)胞分泌物影響H460細(xì)胞周期的分布
        2.4 H460R細(xì)胞分泌物促進(jìn)H460細(xì)胞的DNA修復(fù)
    討論
    參考文獻(xiàn)
綜述 外泌體在腫瘤化療耐藥中的研究進(jìn)展
    1. 外泌體與腫瘤微環(huán)境
    2. 外泌體與腫瘤化療耐藥
    3. 化療耐藥相關(guān)腫瘤標(biāo)志物
    小結(jié)
    參考文獻(xiàn)
縮略語表
作者簡(jiǎn)介
致謝


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]降低B7-H3蛋白對(duì)受照肺癌細(xì)胞A549細(xì)胞周期和凋亡的影響[J]. 董佳麗,羅丹,李源,肖惠文,路璐,崔明,樊賽軍.  國(guó)際放射醫(yī)學(xué)核醫(yī)學(xué)雜志. 2017 (03)
[2]調(diào)節(jié)腫瘤放射敏感性的miRNAs研究進(jìn)展[J]. 劉佳,高剛,樸春南,劉建香.  國(guó)際放射醫(yī)學(xué)核醫(yī)學(xué)雜志. 2016 (02)



本文編號(hào)：3663436