研究背景與目的乳腺癌是全球范圍內(nèi)女性最常見的惡性腫瘤,是女性癌癥死亡的主要原因之一,嚴(yán)重影響女性身心健康。乳腺癌的治療包括手術(shù)、化療、放療等有效的綜合治療方案,但乳腺癌存在一定的復(fù)發(fā)轉(zhuǎn)移風(fēng)險(xiǎn),腫瘤轉(zhuǎn)移是乳腺癌患者死亡的最重要原因。目前腫瘤轉(zhuǎn)移機(jī)制并未完全闡明,因此進(jìn)一步深入探討乳腺癌轉(zhuǎn)移相關(guān)機(jī)制具有重要意義。神經(jīng)鞘磷脂合成酶2（sphingomyelin synthase 2,SGMS2）定位于細(xì)胞膜,以神經(jīng)酰胺（Ceramide,Cer）和卵磷脂為底物,催化形成甘油二酯和神經(jīng)鞘磷脂（sphingomyelin,SM）。Cer和SM均是細(xì)胞重要的脂質(zhì)成分,相關(guān)研究顯示其與惡性腫瘤發(fā)生密切相關(guān)。但SGMS2作為維持細(xì)胞內(nèi)Cer和SM穩(wěn)態(tài)的關(guān)鍵酶,目前關(guān)于該酶在腫瘤發(fā)生發(fā)展中的作用缺少明確詳細(xì)的報(bào)道,對(duì)于SGMS2是否參與乳腺癌轉(zhuǎn)移以及相關(guān)的分子機(jī)制更是知之甚少。我們的前期研究發(fā)現(xiàn)SGMS2通過Cer相關(guān)通路抑制乳腺癌細(xì)胞凋亡,促進(jìn)細(xì)胞增殖。因此,本課題擬從細(xì)胞脂質(zhì)代謝的角度,探討SGMS2與乳腺癌轉(zhuǎn)移的相關(guān)性,并進(jìn)一步闡明相關(guān)的分子機(jī)制,為乳腺癌轉(zhuǎn)移的研究及治療提供新的科學(xué)依據(jù)。研究方法... 

【文章來源】：南方醫(yī)科大學(xué)廣東省

【文章頁數(shù)】：78 頁

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

圖１－１乳腺癌組織和配對(duì)的癌旁組織的ＳＧＭＳ２?ｍＲＮＡ水平??－－

?第二章?ＳＧＭＳ２對(duì)乳腺癌細(xì)胞侵襲和轉(zhuǎn)移能力的影響???來水流動(dòng)沖洗３ｍｉｎ；??５）蘇木素染色胞核ｌ－５ｍｍ，１％鹽酸酒精分化３ｓ，自來水流動(dòng)沖洗返藍(lán)??２０ｍｉｎ，?１％伊紅染色胞質(zhì)３ｍｉｎ；??６）切片依次按照“２ｍｉｎ７０％乙醇，２ｍｉｎ８０％乙醇，２ｍｉｎ９０％乙醇，２ｍｉｎ無??水乙醇Ｉ，２ｍｉｎ無水乙醇ＩＩ，?５ｍｉｎ二甲苯Ｉ，５ｍｉｎ二甲苯丨１，”進(jìn)行梯度脫水；??７）置于通風(fēng)處自然晾干后中性樹膠封片，顯微鏡下觀察。??３．統(tǒng)計(jì)數(shù)據(jù)分析??同第一章“材料與方法”?３．統(tǒng)計(jì)數(shù)據(jù)分析部分所述??二、實(shí)驗(yàn)結(jié)果??１．瞬時(shí)過表達(dá)和干擾乳腺癌細(xì)胞ＳＧＭＳ２的表達(dá)??為了進(jìn)一步研宄ＳＧＭＳ２對(duì)乳腺癌細(xì)胞的生物學(xué)行為影響，我們分別使用過??表達(dá)ＳＧＭＳ２－０ＲＦ構(gòu)建體、ＳＧＭＳ２?ｓｉＲＮＡ以及相應(yīng)的對(duì)照物轉(zhuǎn)染ＭＣＦ－７和??ＭＤＡ－ＭＢ－２３１細(xì)胞，并通過ＲＴ－ＰＣＲ技術(shù)驗(yàn)證轉(zhuǎn)染效率。結(jié)果表明均成功地上??調(diào)（圖２－１－Ａ）和下調(diào)（圖２－１－Ｂ）兩種癌細(xì)胞的ＳＧＭＳ２表達(dá)，為我們下一■步的??實(shí)驗(yàn)操作奠定基矗??Ａ?Ｂ??｜?Ｃｏｎｔｒｏｌ?１５ｌ?ＭＣＦ７?ＭＤＡ－ＭＢ－２３１??２４０｜｜ｓｇｍｓ２?＊＊?１５??�。保矗�?＿?！１０?ｉ?＊＊：?■＊＊＊，??ＬｌｍＩ?Ｍｍ??圖２－１?ＳＧＭＳ２－０ＲＦ構(gòu)建體過表達(dá)和ＳＧＭＳ２?ｓｉＲＮＡ干擾的效率??Ｆｉｇｕｒｅ?２－１?Ｔｈｅ?ｅｆｆｉｃｉｅｎｃｙ?ｏｆ?ＳＧＭＳ２?ＯＲＦ?ｃｏｎｓｔｒｕｃｔｓ?ａｎｄ?ＳＧＭＳ２?ｓｉＲＮＡ．??＊Ｐ＜?０．０５?ａｎｄ?＊＊Ｐ?＜?０．０１?ｖｓ．?Ｃｏｎｔｒｏｌ??２４??

?第二章?ＳＧＭＳ２對(duì)乳腺癌細(xì)胞＾侵襲和轉(zhuǎn)移能力的影響???Ｃｏｎｔｒｏｌ?ｓｉＲＮＡ－１?ｓｉＲＮＡ－４??卜界闕ｐｐｆｅ??ｕ－?；－Ｃｒ?，■■：％?：＾．?＇?Ｖ，：?；４?？＊．?ｇ?Ｃｏｎｔｒｏｌ??１?／－１?；?２５〇ｌＩ＾Ａ．１??？ｄ?？：?．?＝?■ｓｉＲＮＡ＇４??ｆ?■＊＊?＊＊?ＩＩＩ??１００ｐｍ??圖２－３－Ｂ?Ｔｒａｎｓｗｅｌｌ遷移實(shí)驗(yàn)檢測過表達(dá)ＳＧＭＳ２對(duì)乳腺癌細(xì)胞遷移能力的影響??Ｆｉｇｕｒｅ?２－３－Ｂ?Ｔｒａｎｓｗｅｌｌ?ｍｉｇｒａｔｉｏｎ?ａｓｓａｙ?ｄｅｔｅｃｔｅｄ?ｔｈｅ?ｍｉｇｒａｔｉｏｎ?ａｂｉｌｉｔｙ?ｉｎ?ｂｒｅａｓｔ?ｃａｎｃｅｒ?ｃｅｌｌｓ?ｗｉｔｈ??ＳＧＭＳ２?ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ?ｉｎｔｅｒｆｅｒｅｄ．＊Ｐ＜?０．０５?ａｎｄ?＊＊Ｐ＜?０．０１?ｖｓ．?Ｃｏｎｔｒｏｌ??Ｃｏｎｔｒｏｌ?ｓｉＲＮＡ－１?ｓｉＲＮＡ－４??．？??？?？，廠？?一?：：?？?．ｗ?，、．??ｔ?Ｖ４．?：?：?：??＾?＾?Ｉ?Ｃｏｎｔｒｏｌ??５?ｇ！?５〇１｜?ｓｉＲＮＡ－１??？?？？?＾?Ｉ?ｓｉＲＮＡ－４??＾?，?，?，．．．?，，?，?）ｒ＾?ｇ＿ｌ?廣…■??５１００?■?★★??ｓ?ｉ?■＊＊?咖??ｍ?２?５０?＊?■?｜??＾?．．．ｖ?■?！??ｉｈ＾：＞：－ｄｆ?？?＂－ｄｌ?，??１００ｐｍ?＾??圖２－３－Ｃ?Ｔｒａｎｓｗｅｌｌ侵襲實(shí)驗(yàn)檢測過表達(dá)ＳＧＭＳ２對(duì)乳腺癌細(xì)胞侵襲能力的影響??Ｆｉｇｕｒｅ?２－３－Ｃ?Ｔｒａｎｓｗｅｌｌ?ｉｎｖａｓｉｏｎ?ａｓｓａｙ?ｄｅｔｅｃｔｅｄ?ｔ

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]神經(jīng)鞘磷脂合成酶SMS1和SMS2在人乳腺癌組織中的表達(dá)及與病理的相關(guān)性[J]. 潘云青.  臨床醫(yī)學(xué)研究與實(shí)踐. 2019(32)
[2]神經(jīng)鞘磷脂合成酶2基因沉默對(duì)乳腺癌細(xì)胞凋亡的影響[J]. 杭月,林昌岫,黃成日.  實(shí)用醫(yī)學(xué)雜志. 2019(08)



本文編號(hào)：3590487