發(fā)布時間：2022-01-07 13:13

　　目的:慢性粒細胞白血病（Chronic myeloid leukemia,CML）通過酪氨酸激酶抑制劑（tyrosine kinases inhibition,TKI）的規(guī)范治療已使其療效取得了空前的提升。對CML患者BCR/ABL（P210）表達量的定期監(jiān)測是保證療效的前提,目前臨床上廣泛采用的熒光定量PCR（Real-time fluorescent quantitative PCR,RT-qPCR）技術對此監(jiān)測有檢測敏感度、內參基因影響等方面的局限性。微滴式數字PCR（Droplet Digital PCR,dd-PCR）技術是一種檢測敏感度更高,可實現目的基因絕對定量的一種新方法。本研究旨在建立一種dd-PCR檢測CML患者BCR/ABL（P210）微小殘留病的方法,實現對腫瘤負荷更深層次的監(jiān)測,判斷療效,指導臨床個體化治療。方法:1.在細胞水平,用dd-PCR和RT-qPCR同時檢測K562細胞與正常人單個核細胞（Peripheral blood mononuclear cell,PBMC）依次梯度稀釋的細胞懸液,明確兩種方法的檢測極限以及兩者結果的相關性。2.在患者外周血水... 

【文章來源】：山西醫(yī)科大學山西省

【文章頁數】：52 頁

【學位級別】：碩士

【部分圖文】：

K562細胞與PBMC梯度稀釋細胞懸液RT-qPCR結果

圖 2-2 梯度稀釋細胞懸液 dd-PCR 結果:A02-A08 依次為 1:1，1:10，1:102，1:103,1:104，1:105，1:106細胞懸液結果；A01 為陽性對照，A09 為陰性對照結果（A 圖中藍色微滴為陽性微滴，灰色微滴則為陰性微滴；C 圖中藍色柱狀圖代表陽性微滴數，綠色柱狀圖代表生成的總微滴數）。11

山西醫(yī)科大學碩士學位論文 dd-PCR 與 RT-qPCR 結果的相關性與轉換方程的臨床驗證.1 dd-PCR 與 RT-qPCR 結果的相關性通過用兩種方法對細胞懸液檢測結果分析，得到如表 2-1 的結果，其中 dd-RT-qPCR 的最終結果用均數±標準差表示，經相關性分析得兩種方法結果的R2≥0.99。對 dd-PCR 和 RT-qPCR 的結果進行回歸分析，可得兩種結果之間相方程：Y=33.148X1.222（Y：dd-PCR 結果；X：RT-qPCR 結果）（圖 2-3）。

【參考文獻】：
期刊論文
[1]酪氨酸激酶抑制劑選擇的困惑[J]. 朱煥玲.  臨床血液學雜志. 2017(02)
[2]100例慢性粒細胞白血病染色體核型分析[J]. 王東旭,王喆,王艷.  四川生理科學雜志. 2017(02)
[3]數字PCR與熒光PCR方法鑒別餐廚廢棄植物油的比較[J]. 楊冬燕,楊永存,李浩,劉燕飛,鄧平建.  中國衛(wèi)生檢驗雜志. 2015(19)
[4]BCR-ABL融合基因檢測方法的進展[J]. 王春霞,溫柏平.  醫(yī)學綜述. 2013(01)



本文編號：3574610