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基于雙色熒光傳感器的癌細(xì)胞成像及microRNA的定量檢測

發(fā)布時(shí)間:2021-12-11 17:51
  癌癥是二十一世紀(jì)人口致死率最高的重大疾病之一,它一般由惡性腫瘤發(fā)展而來,具有轉(zhuǎn)移性、不可控性、增殖異常等性質(zhì),目前在醫(yī)學(xué)上廣泛受到關(guān)注。癌癥的臨床檢測方法一般包括腫瘤標(biāo)記物檢測、基因檢測、分子影像學(xué)技術(shù)和病理學(xué)檢查等。癌癥的早期檢測對于預(yù)防腫瘤惡化,提高存活率具有重要意義。MiRNA是一類內(nèi)源性的小分子RNA,一般有18-25個(gè)核苷酸序列,在基因表達(dá)中起著關(guān)鍵的調(diào)控作用,與生命活動(dòng)的生長發(fā)育、新陳代謝、疾病進(jìn)展等過程息息相關(guān)。不同的腫瘤類型可以通過不同種類miRNA的異常表達(dá)反映出來,因此,它通常作為腫瘤生物標(biāo)志物,對癌癥的早期篩查起著預(yù)測與診斷的作用。本文設(shè)計(jì)了一種實(shí)時(shí)光控的納米傳感器,可應(yīng)用于腫瘤細(xì)胞成像與miRNA的定量檢測。該傳感器是將DNA功能化的金納米顆粒和發(fā)射波長分離的兩種熒光染料修飾的DNA,通過含光敏基團(tuán)PC-linker的DNA作為中間介質(zhì)進(jìn)行自組裝構(gòu)建而成。紫外光(302 nm)作為該體系的啟動(dòng)開關(guān),當(dāng)紫外光對其進(jìn)行照射時(shí),光敏基團(tuán)被打開,釋放一種熒光染料DNA,隨后通過兩步熵驅(qū)動(dòng)的作用位點(diǎn)介導(dǎo)的鏈置換反應(yīng),催化檢測癌細(xì)胞內(nèi)的miRNA。其中一種熒光信號強(qiáng)度作為內(nèi)... 

【文章來源】:蘇州大學(xué)江蘇省 211工程院校

【文章頁數(shù)】:85 頁

【學(xué)位級別】:碩士

【部分圖文】:

基于雙色熒光傳感器的癌細(xì)胞成像及microRNA的定量檢測


圖3-3為GDC納米組裝體通過脂質(zhì)體Lipofectamine-2000包裹進(jìn)入細(xì)胞質(zhì)后的??

催化循環(huán),條件


光控納米傳感器的催化循環(huán)與細(xì)胞熒光成像表征及miRNA含量的定量分析?第三章??UV?irradiation?time?(s)??(a)????0?30?60?120?300?600?1200??DNA4??photocleavcd?DNA4??1〇〇t???(b)?一?^??????7?80.?/??^?J??q?60-?!??〇)??i-??〇?20-??.1?I??75?0-?J??CO??^?0?300?600?900?1200??UV?irradiation?time?(s)??Figure?3-4(a)DNA4經(jīng)過不同時(shí)間UV輻射的電泳表征??(b)UV對DNA4的剪切效率表征圖。??隨后,對GDC組裝與催化循環(huán)解組裝過程進(jìn)行了表征(圖3-5),首先GNP-DNA1??逐步連接DNA4,?DNA2,?DNA3,然后在不同條件下進(jìn)行催化循環(huán)解組裝。條帶I??至4是逐漸上移的,說明隨著DNA組裝過程的進(jìn)行,金納米顆粒上的DNA數(shù)量增??多,其粒徑變大,遷移率減小,可證實(shí)GDC組裝過程符合理論設(shè)計(jì)。??在圖3-5中,條帶5與9表明體系中含有F和C’,而不加UV時(shí),組裝體不會解??散。條帶6,9,?10比較可見,在只有UV的條件下不會發(fā)生催化循環(huán),而當(dāng)UV和??43??


本文編號:3535121

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