本文關(guān)鍵詞：二硫鍵穩(wěn)定的人源性抗bFGF雙鏈抗體抑制人肺癌細(xì)胞生長的作用研究，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：目的研究二硫鍵穩(wěn)定的人源性抗b FGF雙鏈抗體(ds-Diabody)對人肺癌A549細(xì)胞的體內(nèi)外增殖抑制作用。方法利用鎳離子親和層析和離子交換層析的方法純化得到ds-Diabody,間接ELISA檢測其抗原結(jié)合活性,CCK-8法檢測ds-Diabody對人肺癌A549細(xì)胞的增殖抑制作用,Western blot分析其作用于腫瘤細(xì)胞的機(jī)制,Transwell檢測其對腫瘤細(xì)胞遷移侵襲的影響。建立裸鼠皮下移植瘤模型,記錄各處理組裸鼠皮下移植瘤的體積及裸鼠體質(zhì)量變化。免疫組化法檢測腫瘤組織CD31和LYVE1的表達(dá)情況,初步探討抗b FGF的人源性ds-Diabody抗體的抗腫瘤機(jī)制。結(jié)果成功純化得到具有抗原結(jié)合活性的ds-Diabody。CCK-8結(jié)果顯示,純化的ds-Diabody可劑量依賴性地抑制人肺癌A549細(xì)胞株的增殖。Western blot結(jié)果表明ds-Diabody能有效阻斷與b FGF相關(guān)的MAPK和Akt通路。Transwell結(jié)果表明ds-Diabody可以顯著抑制A549細(xì)胞的遷移及侵襲。裸鼠體內(nèi)試驗(yàn)中,ds-Diabody抗體顯著地抑制了腫瘤的生長,抑制率為86.54%。免疫組化的結(jié)果顯示ds-Diabody抗體處理組腫瘤組織中微血管密度和淋巴管密度均有下降。結(jié)論抗bFGF的人源性ds-Diabody抗體可有效地抑制人肺癌A549細(xì)胞的生長。
【作者單位】： 暨南大學(xué)生命科學(xué)技術(shù)學(xué)院生物醫(yī)學(xué)轉(zhuǎn)化研究院廣東省分子免疫與抗體工程重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室;
【關(guān)鍵詞】： 堿性成纖維細(xì)胞生長因子 二硫鍵穩(wěn)定的雙鏈抗體 人肺癌細(xì)胞 血管新生 淋巴管新生
【基金】：國家自然科學(xué)基金(81372281) 廣東省科技計劃項(xiàng)目(2015B020211009) 深圳科技計劃(JCYJ20140416085544636)
【分類號】：R734.2
【正文快照】： 腫瘤血管新生對腫瘤的發(fā)生、發(fā)展和轉(zhuǎn)移起著重要的作用。在眾多的血管新生因子中,堿性成纖維細(xì)胞生長因子(b FGF,FGF-2)和血管內(nèi)皮細(xì)胞生長因子(VEGF)是最重要的血管新生因子。b FGF在多種惡性腫瘤中均有高表達(dá),b FGF與其受體FGFR結(jié)合后誘導(dǎo)Erk和Akt信號通路的活化,進(jìn)而誘導(dǎo)腫

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本文編號：345352