本文關(guān)鍵詞：Musashi1基因表達(dá)對(duì)人結(jié)腸癌HCT116細(xì)胞放射增敏作用及其機(jī)制的實(shí)驗(yàn)研究，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：目的:本研究以人結(jié)腸癌HCT116細(xì)胞株為模型,運(yùn)用RNA干擾技術(shù),建立Musashi1(Msi1)穩(wěn)定低表達(dá)的HCT116細(xì)胞株,并接受放射線外照射,研究沉默Msi1對(duì)人結(jié)腸癌HCT116細(xì)胞株放射敏感性的影響,并初步探討其機(jī)制,為臨床治療提供理論依據(jù)。方法:1應(yīng)用慢病毒載體,建立Msi1低表達(dá)的穩(wěn)轉(zhuǎn)細(xì)胞株(HCT116-Musashi1)及陰性對(duì)照組細(xì)胞株(HCT116-negative control)。2通過(guò)克隆實(shí)驗(yàn),測(cè)定沉默Msi1基因?qū)CT116細(xì)胞的放射敏感性的作用。3采用MTS法檢測(cè),沉默組(Silence組)、空白組(Control組)、陰性對(duì)照組(NC組)細(xì)胞接受8Gy照射后的24h、48h、72h各組細(xì)胞的增殖活性及增殖抑制率。4采用流式細(xì)胞技術(shù)檢測(cè)8Gy照射后的24h、48h、72h,沉默組(Silence組)、空白組(Control組)、陰性對(duì)照組(NC組)的細(xì)胞凋亡比例,以及12Gy照射后48h三組細(xì)胞周期分布的變化。結(jié)果:1通過(guò)克隆形成實(shí)驗(yàn),根據(jù)單擊多靶模型擬合出生存曲線,Silence組的細(xì)胞放射敏感性明顯高于NC組和Control組,而NC組與Control組之間放射敏感性未見(jiàn)明顯差異。2細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)研究顯示,與未照射組相比,8Gy劑量組中Silence組,NC組,Control組在照射后24h、48h、72h,細(xì)胞增殖速率均減低,但Silence組細(xì)胞在各時(shí)間點(diǎn)的增殖活性均明顯低于NC組和Control組(P0.001),而NC組和Control組之間未見(jiàn)明顯統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P0.05)。隨著時(shí)間增加,各組增殖抑制率逐步增加(P0.001),呈現(xiàn)時(shí)間依賴(lài)性,而Silence組的抑制率始終高于另外兩組(P0.05),NC組和Control組之間未見(jiàn)明顯統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P0.05)。3細(xì)胞凋亡實(shí)驗(yàn)表明,8Gy照射后24h、48h、72h,Silence組凋亡比例始終高于NC組和Control組,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.001),而NC組和Control組之間未見(jiàn)明顯統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P0.05),并且隨著時(shí)間增加,三組細(xì)胞凋亡比例均增加(P0.001),其中Silence組在各時(shí)間點(diǎn)凋亡比例增加的程度始終高于另外兩組。4細(xì)胞周期實(shí)驗(yàn)表明,12Gy照射后48h時(shí),Silence組細(xì)胞周期中G_2/M期比例較Control組和NC組顯著下降,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.001)。結(jié)論:1降低Musashi1的表達(dá)對(duì)結(jié)腸癌HCT116細(xì)胞具有放射增敏作用;2降低Musashi1的表達(dá)可能通過(guò)促進(jìn)凋亡,解除G_2/M期阻滯,發(fā)揮放射增敏作用。
【關(guān)鍵詞】：結(jié)腸癌 RNA干擾 Musashi1 放射敏感性 凋亡
【學(xué)位授予單位】：河北醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類(lèi)號(hào)】：R735.35
【目錄】：

• 中文摘要4-6
• ABSTRACT6-8
• 英文縮寫(xiě)8-9
• 前言9-11
• 材料與方法11-22
• 結(jié)果22-23
• 附圖23-29
• 附表29-31
• 討論31-35
• 結(jié)論35-36
• 參考文獻(xiàn)36-41
• 綜述 RNA結(jié)合蛋白Musashi1在結(jié)直腸癌中的研究進(jìn)展41-52
• 參考文獻(xiàn)47-52
• 致謝52-53
• 個(gè)人簡(jiǎn)歷53

【參考文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前8條

1 羅其發(fā);楊樺;肖衛(wèi)東;張朝軍;江恩來(lái);李立奇;;結(jié)直腸癌相關(guān)周期蛋白質(zhì)研究進(jìn)展[J];現(xiàn)代生物醫(yī)學(xué)進(jìn)展;2015年29期

2 孟凡榮;陳琛;萬(wàn)海粟;周清華;;慢病毒載體及其研究進(jìn)展[J];中國(guó)肺癌雜志;2014年12期

3 Caterina Fanali;Donatella Lucchetti;Marisa Farina;Maddalena Corbi;Valerio Cufino;Achille Cittadini;Alessandro Sgambato;;Cancer stem cells in colorectal cancer from pathogenesis to therapy: Controversies and perspectives[J];World Journal of Gastroenterology;2014年04期

4 江曼;錢(qián)曉萍;劉寶瑞;;惡性腫瘤放射增敏劑研究進(jìn)展[J];現(xiàn)代腫瘤醫(yī)學(xué);2014年01期

5 伍雯;秦環(huán)龍;;膳食結(jié)構(gòu)改變與結(jié)腸癌風(fēng)險(xiǎn)相關(guān)性的研究進(jìn)展[J];腸外與腸內(nèi)營(yíng)養(yǎng);2014年01期

6 Qi Xue;Kai Sun;Hai-Jun Deng;Shang-Tong Lei;Jing-Qing Dong;Guo-Xin Li;;Anti-miRNA-221 sensitizes human colorectal carcinoma cells to radiation by upregulating PTEN[J];World Journal of Gastroenterology;2013年48期

7 徐俊;毛穎;苗荻;郝佳;;RNA干擾技術(shù)的研究進(jìn)展[J];生物技術(shù)世界;2012年03期

8 劉志坤;祝淑釵;蘇景偉;王玉祥;楊潔;李娟;沈文斌;;靶向沉默人基因MDC1表達(dá)對(duì)食管癌細(xì)胞放射增敏作用的實(shí)驗(yàn)研究[J];南方醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào);2010年08期

  本文關(guān)鍵詞：Musashi1基因表達(dá)對(duì)人結(jié)腸癌HCT116細(xì)胞放射增敏作用及其機(jī)制的實(shí)驗(yàn)研究，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

，

本文編號(hào)：339502