本文關(guān)鍵詞：藍(lán)萼乙素對(duì)宮頸癌細(xì)胞HeLa、SiHa增殖抑制作用及其機(jī)制研究，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：背景:宮頸癌是常見(jiàn)的惡性腫瘤,在全球范圍內(nèi)占女性惡性腫瘤第四位。盡管宮頸疾病的早期診斷篩查策略使宮頸癌發(fā)生率有所下降,但其在發(fā)展中國(guó)家依然是一個(gè)威脅著人們健康的嚴(yán)重問(wèn)題。目前,宮頸癌的治療方案主要是以鉑類(lèi)化療為基礎(chǔ)的放療,此方案能夠明顯提高晚期病人的5年生存時(shí)間。但是由高劑量化療藥物引起的毒副反應(yīng)使化療方案的使用受到一定限制,因此尋找新一代輔助治療方案對(duì)宮頸癌的治療意義重大。傳統(tǒng)中藥因具有其高效性、低毒副作用,在腫瘤治療領(lǐng)域受到日益密切的關(guān)注。藍(lán)萼香茶菜是由唇形科植物分離鑒定的對(duì)映-貝殼杉烷類(lèi)二萜,具有抗微生物、抗炎、抗腫瘤等作用。據(jù)報(bào)道,藍(lán)萼香茶菜有三種同分異構(gòu)體,分別為藍(lán)萼甲素(Glaucocalyxin A,GLA)、藍(lán)萼乙素(Glaucocalyxin B,GLB)、藍(lán)萼丙素(Glaucocalyxin C,GLC)。最近研究表明,藍(lán)萼甲素及藍(lán)萼乙素具有確切的抗腫瘤作用,但其作用機(jī)制復(fù)雜,尚不明確。而藍(lán)萼丙素沒(méi)有確切的抗腫瘤作用。目的:本研究通過(guò)體外培養(yǎng)HeLa及SiHa細(xì)胞,研究GLB對(duì)其凋亡、自噬水平的影響,并探討PTEN/P-Akt相關(guān)信號(hào)通路是否發(fā)揮調(diào)節(jié)作用。嘗試為宮頸癌的中草藥物治療提供一種新的策略。方法:以人宮頸癌HeLa、SiHa細(xì)胞為體外培養(yǎng)模型,分別加入不同濃度(0/0.5/2/4/8/16/32μM)的GLB,分別培養(yǎng)24/48/72h后,使用四甲基偶氮唑鹽(MTT)法檢測(cè)細(xì)胞增殖抑制率及半數(shù)抑制率IC50;根據(jù)IC50確定最適濃度,將不同濃度的GLB加入Hela、Siha細(xì)胞,繼續(xù)培養(yǎng)24h后以流式細(xì)胞技術(shù)(AnnexinV-FITC/PI雙染)檢測(cè)其細(xì)胞凋亡率變化;應(yīng)用免疫印跡方法(Western blot方法)檢測(cè)P-Akt、C-PARP、PTEN、LC3及Beclinl蛋白相對(duì)表達(dá)量。結(jié)果:1.MTT結(jié)果顯示:不同濃度GLB處理腫瘤細(xì)胞后,宮頸癌細(xì)胞HeLa、SiHa的抑制率隨藥物濃度增加和作用時(shí)間延長(zhǎng),與未處理組相比差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05),各組組間比較有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05),GLB抑制Hela、Siha增殖,且呈時(shí)間-效應(yīng)及劑量-效應(yīng)模式。GLB處理HeLa、、Siha 24小時(shí)后,其IC50分別為5.348、8.568μM。2.AnnexinV-FITC/PI雙染顯示:不同濃度的GLB作用HeLa、SiHa細(xì)胞24h后,隨藥物濃度的增高,各組細(xì)胞凋亡比率增加,各組之間比較差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。3.Western-blot結(jié)果顯示:GLB處理宮頸癌細(xì)胞HeLa、SiHa24小時(shí)后,與照組相比,PTEN、C-PARP1蛋白的表達(dá)增高,P-Akt、Beclin1蛋白表達(dá)降低,LC3Ⅱ/LC3Ⅰ比值顯著增加,結(jié)果均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。結(jié)論:藍(lán)萼乙素可抑制Hela、Siha細(xì)胞增殖,且呈劑量-效應(yīng)及時(shí)間-效應(yīng)依賴(lài)趨勢(shì),其機(jī)制可能是通過(guò)負(fù)性調(diào)節(jié)PI3K/Akt信號(hào)通路,誘導(dǎo)凋亡、自噬發(fā)生。自噬與凋亡之間可能通過(guò)becclin1蛋白相互調(diào)節(jié)。
【關(guān)鍵詞】：宮頸癌 藍(lán)萼乙素 凋亡 自噬 PTEN P-Akt PARP Beclin1 LC3
【學(xué)位授予單位】：新鄉(xiāng)醫(yī)學(xué)院
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類(lèi)號(hào)】：R737.33
【目錄】：

• 摘要5-7
• Abstract7-10
• 前言10-14
• 1 材料與方法14-23
• 2 結(jié)果23-36
• 3 討論36-43
• 4 結(jié)論43-44
• 參考文獻(xiàn)44-50
• 綜述50-62
• 參考文獻(xiàn)57-62
• 附錄62-64
• 攻讀學(xué)位期間發(fā)表文章情況64-65
• 致謝65-66
• 個(gè)人簡(jiǎn)歷66

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本文編號(hào)：299660