本文關(guān)鍵詞：Polycomb家族蛋白作為腫瘤異質(zhì)性分子標(biāo)記物在卵巢癌復(fù)發(fā)過程中的作用及相關(guān)調(diào)控機(jī)制，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

《安徽醫(yī)科大學(xué)》 2013年

肝癌干細(xì)胞生物學(xué)特性初步研究及其臨床意義

呂陽  

【摘要】：【目的】（1）研究肝細(xì)胞癌組織中肝癌干細(xì)胞標(biāo)志物的表達(dá)與腫瘤血管計(jì)數(shù)之間的相關(guān)性，并統(tǒng)計(jì)分析肝癌干細(xì)胞標(biāo)志物表達(dá)水平與肝癌臨床病理特征及生存預(yù)后間的關(guān)系，初步探討肝癌干細(xì)胞在肝癌術(shù)后轉(zhuǎn)移、復(fù)發(fā)過程中的作用，對肝癌的預(yù)后判斷進(jìn)行評估。（2）利用流式細(xì)胞儀分選出肝癌細(xì)胞株HepG2中側(cè)群細(xì)胞（Sidepopulation，SP），，探討其生物學(xué)特性并比較其與同代未經(jīng)分選的HepG2細(xì)胞的差異。 【方法】（1）采用免疫組織化學(xué)染色檢測61例原發(fā)性肝癌患者組織中CD90、CD133和CD34的表達(dá)水平，統(tǒng)計(jì)分析兩者間的相關(guān)性及與肝癌臨床病理特征和生存預(yù)后間的關(guān)系。（2）利用流式細(xì)胞儀從肝癌細(xì)胞株HepG2細(xì)胞中分選得到SP細(xì)胞，將分選出的SP細(xì)胞定義為實(shí)驗(yàn)組，同代未經(jīng)分選的HepG2細(xì)胞定義為對照組，用軟瓊脂克隆形成實(shí)驗(yàn)和NOD/SCID小鼠接種實(shí)驗(yàn)分別觀察兩組細(xì)胞體外增殖和體內(nèi)成瘤情況；用細(xì)胞外基質(zhì)粘附實(shí)驗(yàn)比較兩組粘附能力差別；用Transwell小室侵襲實(shí)驗(yàn)和遷移實(shí)驗(yàn)比較兩組細(xì)胞的侵襲和遷移能力；MTT法檢測兩組細(xì)胞的生長曲線；成球培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)檢測兩組細(xì)胞在無血清培養(yǎng)條件下成球能力差異。 【結(jié)果】（1）肝癌組織標(biāo)本中CD90、CD133陽性率分別為29.5%（18/61）31.1%（19/61），CD90和/或CD133表達(dá)陽性率為45.9%（28/61），有血管侵犯、腫瘤分化程度Ⅲ/Ⅳ級、包膜不完整、TNM分期Ⅲ/Ⅳ期的患者CD90和/或CD133表達(dá)陽性率明顯高于無血管侵犯、腫瘤分化程度Ⅰ/Ⅱ級、包膜完整、TNM分期Ⅰ/Ⅱ期患者，CD90和/或CD133表達(dá)與腫瘤血管密度（Microvessel density，MVD）計(jì)數(shù)在肝癌組織中表達(dá)呈正相關(guān)（r=0.5，P0.05）。表達(dá)肝癌干細(xì)胞標(biāo)志物合并MVD計(jì)數(shù)高的患者術(shù)后總體生存率和無瘤生存率明顯低于肝癌干細(xì)胞標(biāo)志物表達(dá)陰性且MVD計(jì)數(shù)低的患者。（2）軟瓊脂克隆形成實(shí)驗(yàn)顯示SP細(xì)胞具有更強(qiáng)的克隆形成能力（31.17±5.95）%vs.（9.50±2.74）%(t=8.106，P＜0.05)，NOD/SCID小鼠接種實(shí)驗(yàn)顯示2×104個(gè)SP細(xì)胞即能在皮下成瘤；兩組細(xì)胞粘附能力（16.19±3.68）%vs.（25.01±13.97）%（t=1.36，p=0.210）和生長曲線差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（t=0.058，P=0.955）；分選出的SP細(xì)胞具有更強(qiáng)的遷移能力（87±10）vs.（47±8）（t=8.646，P0.05）但侵襲性差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（20±4）vs.(16±3）（t=1.462，P=0.175），SP細(xì)胞在無血清條件培養(yǎng)下成球數(shù)較對照組多（54±9）vs.（18±3）（t=8.632，P0.05）。 【結(jié)論】（1）高表達(dá)肝癌干細(xì)胞表面標(biāo)記物和腫瘤微血管密度有一定關(guān)系，結(jié)合兩者可以預(yù)測肝癌患者術(shù)后生存預(yù)后，肝癌干細(xì)胞標(biāo)志物表達(dá)水平是肝癌術(shù)后總生存率和無瘤生存率的獨(dú)立危險(xiǎn)因素。（2）肝癌細(xì)胞株HepG2中SP細(xì)胞具有腫瘤干細(xì)胞特性，肝癌細(xì)胞株HepG2中SP細(xì)胞可能富集了肝癌干細(xì)胞。

【關(guān)鍵詞】：
【學(xué)位授予單位】：安徽醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2013
【分類號】：R735.7
【目錄】：

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本文編號：210939