白蘞抗腫瘤活性部位化學(xué)成分及其含量測(cè)定研究
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《湖北中醫(yī)藥大學(xué)》 2013年
白蘞抗腫瘤活性部位化學(xué)成分及其含量測(cè)定研究
杭佳
【摘要】:惡性腫瘤是目前危害人類健康和生命的最嚴(yán)重疾病之一。目前臨床用于治療腫瘤的藥物多為化學(xué)合成藥,其毒副作用強(qiáng)和產(chǎn)生耐藥性等問(wèn)題嚴(yán)重影響臨床療效。因此,從中藥、天然藥物中發(fā)掘高效、低毒的新抗腫瘤藥物,成為藥物研究工作者關(guān)注的熱點(diǎn)。 中藥白蘞為葡萄科蛇葡萄屬植物白蘞(Ampelopsis japonic(Thumb.)Makino)的干燥塊根,其味苦、辛,微寒,具有清熱解毒、消癰散結(jié)、斂瘡生肌等功效,用于疔瘡,癰疽發(fā)背,瘰疬,燒燙傷等疾病的治療,F(xiàn)代藥理研究表明該藥具有抗菌、免疫調(diào)節(jié)及抗腫瘤等作用,本實(shí)驗(yàn)室前期研究已經(jīng)證實(shí)白蘞有較好的抗腫瘤作用。歷代本草記載白蘞無(wú)毒,本實(shí)驗(yàn)室對(duì)白蘞不同組分的小鼠急性毒性實(shí)驗(yàn)結(jié)果亦顯示其安全性高。因此,白蘞是一種值得關(guān)注的潛在低毒抗腫瘤中藥。本研究采用生物活性指導(dǎo)下的有效成分分離方法,研究了白蘞抗腫瘤活性部位的化學(xué)成分,并對(duì)藥材進(jìn)行了質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)提高研究,為抗腫瘤中藥新藥開(kāi)發(fā)及完善白蘞藥材質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)提供了科學(xué)依據(jù)。本文主要完成了以下工作: 1、采用MTT法,選擇前期研究篩選出的敏感細(xì)胞株人肝癌細(xì)胞株HepG2細(xì)胞,對(duì)白蘞醇提物的石油醚、乙酸乙酯、正丁醇、水溶液部位進(jìn)行體外抗腫瘤活性篩選。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明,白蘞乙醇提取物萃取部位中抑制腫瘤活性最強(qiáng)的為乙酸乙酯部位,石油醚及正丁醇部位也同樣具有一定的抗腫瘤作用。 2、采用硅膠柱層析,依次用四種不同極性的溶劑(石油醚、乙醚、乙酸乙酯、甲醇)作為洗脫劑對(duì)抗腫瘤活性部位進(jìn)行粗分離,得到四個(gè)極性不同組分;钚院Y選結(jié)果顯示,乙醚和乙酸乙酯部分的抗腫瘤活性較其它兩個(gè)部分更好,其中,乙醚部分抗腫瘤活性最佳。 3、利用硅膠柱色譜、葡聚糖凝膠(LH-20型)柱色譜、制備型HPLC等色譜分離技術(shù),以抗腫瘤活性篩選試驗(yàn)結(jié)果為依據(jù),從乙醚和乙酸乙酯洗脫組分物質(zhì)中共分離出9種單體成分(化合物1-9)。通過(guò)1H-NMR、13C-NMR、H-HCOSY、C-H HMBC、MS等現(xiàn)代波譜方法分析其結(jié)構(gòu),鑒定了其中的6個(gè)化合物,,分別為:β-谷甾醇(化合物1,β-sitosterol)、齊墩果酸(化合物2,oleanolic acid)、沒(méi)食子酸(化合物3,gallic acid)、白藜蘆醇(化合物4,resveratrol)、兒茶素(化合物5,Cianidanol)、表兒茶素(化合物6,epicatechin)。 4、采用MTT法,對(duì)分離得到的兒茶素(化合物5)、表兒茶素(化合物6)、化合物7進(jìn)行抗腫瘤活性篩選。結(jié)果顯示化合物7具有較好的抗腫瘤活性,在24、48、72h小時(shí)的IC50分別為46.98mg·L~(-1)、57.79mg·L~(-1)、24.87mg·L~(-1)。結(jié)合前期的研究結(jié)果,白蘞抗腫瘤的活性成分主要有沒(méi)食子酸、白藜蘆醇、齊墩果酸及化合物7。 5、建立了高效液相色譜波長(zhǎng)切換法同時(shí)測(cè)定白蘞中沒(méi)食子酸、原兒茶醛、兒茶素、白藜蘆醇4種成分含量的方法。方法簡(jiǎn)便快速、靈敏度高、重現(xiàn)性好,可用于白蘞的質(zhì)量控制,為完善其質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)提供了科學(xué)依據(jù)。
【關(guān)鍵詞】:
【學(xué)位授予單位】:湖北中醫(yī)藥大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2013
【分類號(hào)】:R284.2
【目錄】:
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9 都紅剛;[N];經(jīng)濟(jì)參考報(bào);2007年
10 劉亦飛;[N];中國(guó)醫(yī)藥報(bào);2007年
中國(guó)博士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條
1 周林;裂褶多糖的制備與理化特性及化學(xué)改性研究[D];華南理工大學(xué);2006年
2 亓立峰;多聚糖納米微粒吸附、殺菌和抗腫瘤活性及其機(jī)理研究[D];浙江大學(xué);2005年
3 陳立;石蟬草化學(xué)成分及抗腫瘤活性的研究[D];中國(guó)人民解放軍軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院;2007年
4 鄭艷波;基于靶向肽的強(qiáng)化融合蛋白和化學(xué)偶聯(lián)物的制備與抗腫瘤作用研究[D];中國(guó)協(xié)和醫(yī)科大學(xué);2007年
5 譚明雄;中藥白花丹活性成分白花丹素金屬配合物的合成、抗腫瘤活性及與DNA作用研究[D];中南大學(xué);2008年
6 林愛(ài)群;三株海洋真菌次級(jí)代謝產(chǎn)物活性成分的研究[D];中國(guó)海洋大學(xué);2008年
7 張霞;希夫堿配合物的合成、表征及抗腫瘤活性研究[D];中國(guó)海洋大學(xué);2009年
8 王慧芳;噸酮衍生物金屬配合物的合成、表征以及與DNA相互作用的研究[D];蘭州大學(xué);2009年
9 劉紅椿;桔霉素三聚體Tricitrinol B的抗腫瘤活性及機(jī)制研究[D];中國(guó)海洋大學(xué);2009年
10 崔巖;Edenia gomezpompae的抗腫瘤活性及其生物學(xué)特性研究[D];吉林大學(xué);2013年
中國(guó)碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條
1 杭佳;白蘞抗腫瘤活性部位化學(xué)成分及其含量測(cè)定研究[D];湖北中醫(yī)藥大學(xué);2013年
2 張夢(mèng)美;白蘞體外抗腫瘤活性成分篩選及作用機(jī)制研究[D];湖北中醫(yī)藥大學(xué);2012年
3 于志斌;利用核糖體工程技術(shù)開(kāi)拓海洋微生物藥用新資源的研究[D];中國(guó)海洋大學(xué);2005年
4 徐仲淼;含氮類黃酮衍生物的設(shè)計(jì)、合成和抗腫瘤活性研究[D];浙江大學(xué);2006年
5 趙荔華;1,3-二氫-1,3-二氧-2H-異吲哚-N-取代衍生物的設(shè)計(jì)合成及其抗腫瘤活性研究[D];第二軍醫(yī)大學(xué);2007年
6 羅海英;納米硒溶膠的抗氧化和抗腫瘤活性的研究[D];暨南大學(xué);2011年
7 閆莉萍;抗腫瘤活性海洋放線菌的分離篩選及其16S rDNA多樣性分析[D];華南熱帶農(nóng)業(yè)大學(xué);2003年
8 孫晶波;多皺軟海綿抗腫瘤活性成分研究[D];延邊大學(xué);2005年
9 高林;MCP多糖的制備、分析鑒定及其抗腫瘤作用的研究[D];天津大學(xué);2005年
10 劉接卿;商陸有效成分的提取分離及其體外抗腫瘤活性的研究[D];吉林大學(xué);2006年
本文關(guān)鍵詞:白蘞抗腫瘤活性部位化學(xué)成分及其含量測(cè)定研究,由筆耕文化傳播整理發(fā)布。
本文編號(hào):155934
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