新型微管蛋白抑制劑的研發(fā)和抗腫瘤機(jī)制研究
本文關(guān)鍵詞：新型微管蛋白抑制劑的研發(fā)和抗腫瘤機(jī)制研究，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。
《南方醫(yī)科大學(xué)》 2013年
新型微管蛋白抑制劑的研發(fā)和抗腫瘤機(jī)制研究
席菁樂
【摘要】：微管是構(gòu)成細(xì)胞骨架的主要成分,存在于所有的真核細(xì)胞中,與其他蛋白共同組裝成紡錘體、中心粒、鞭毛、神經(jīng)管等多種結(jié)構(gòu)。正常條件下,微管的聚合和解聚保持著動(dòng)態(tài)平衡,因此細(xì)胞分裂高度可控,進(jìn)展有序。這種不穩(wěn)定的動(dòng)力學(xué)特性使得微管在維持細(xì)胞形態(tài)、細(xì)胞遷移、細(xì)胞有絲分裂、胞內(nèi)物質(zhì)的輸送及信號傳導(dǎo)等細(xì)胞關(guān)鍵生物學(xué)過程中具有重要調(diào)節(jié)功能。微管在細(xì)胞分裂前期聚合成為紡錘體,而紡錘體在細(xì)胞有絲分裂過程中牽引染色體向兩極移動(dòng)進(jìn)入至兩個(gè)子細(xì)胞中,從而完成細(xì)胞增殖。由于微管在細(xì)胞有絲分裂過程中承擔(dān)的重要作用,微管蛋白逐漸成為醫(yī)藥工作者研究與開發(fā)抗癌藥物的重要靶點(diǎn)之一,而以微管蛋白為靶點(diǎn)的微管蛋白抑制劑也已成為臨床證實(shí)有效的抗腫瘤藥物。該類抑制劑的作用機(jī)制是在快速分裂的腫瘤細(xì)胞中,通過抑制微管蛋白的聚合或者促進(jìn)微管蛋白的聚合而干擾細(xì)胞的有絲分裂過程,使細(xì)胞有絲分裂中斷,停滯于M期,從而導(dǎo)致腫瘤細(xì)胞發(fā)生凋亡,發(fā)揮抗腫瘤作用。 根據(jù)作用機(jī)制的不同,微管蛋白抑制劑可分為兩大類：①抑制微管蛋白聚合的微管蛋白解聚劑,如秋水仙堿類和長春堿類化合物；②促進(jìn)微管蛋白聚合的微管蛋白聚合劑,如紫杉醇及其類似物,埃博霉素及其類似物。根據(jù)微管蛋白抑制劑在微管蛋白上的作用位點(diǎn)的不同,微管蛋白抑制劑又可分為3種類型：①作用于秋水仙堿位點(diǎn)的微管蛋白抑制劑；②作用于長春堿位點(diǎn)的微管蛋白抑制劑；③作用于紫杉醇位點(diǎn)的微管蛋白抑制劑。目前,長春堿和紫杉醇位點(diǎn)微管蛋白抑制劑類藥物已在腫瘤臨床治療方面占據(jù)了重要地位,紫杉醇更是已成為肺癌、乳腺癌和卵巢癌的重要一線治療藥物。然而,和其他抗腫瘤藥物一樣,難以耐受的副作用及用藥后耐藥性的出現(xiàn)限制了微管蛋白抑制劑的臨床使用。因此,開發(fā)新型的具有更強(qiáng)活性、更低毒性、并且對多藥耐藥腫瘤細(xì)胞更有效的新型微管蛋白抑制劑具有很大的應(yīng)用前景。 HA14-1是本博士論文作者的導(dǎo)師之一Ziwei Huang教授等研發(fā)的小分子化合物,是世界上第一例報(bào)道的Bcl-2抑制劑,能夠強(qiáng)有力地誘導(dǎo)乳腺、結(jié)直腸癌、腎癌、宮頸癌、腦膠質(zhì)瘤、白血病等多種腫瘤細(xì)胞系發(fā)生凋亡。在后續(xù)的研究中,我們發(fā)現(xiàn)HA14-1不僅能夠通過誘導(dǎo)活性氧(ROS)產(chǎn)生、細(xì)胞色素C釋放、半胱天冬酶Caspase-9/-3活化這一信號途徑而誘導(dǎo)凋亡,在其藥物濃度大于10μM時(shí),還可以作用于微管蛋白秋水仙堿位點(diǎn)抑制微管蛋白聚合。我們將HA14-1作為母體藥物對其進(jìn)行結(jié)構(gòu)改構(gòu),設(shè)計(jì)并合成了一系列新型HA14-1類似物(2-amino-4-phenyl-4H-chromene-3-carboxylate analogs),命名為mHA1-19,并對其中抗腫瘤活性較強(qiáng)的mHA1,6,11進(jìn)行了后續(xù)的生物學(xué)評價(jià)和抗腫瘤機(jī)制研究。這些新型化合物表現(xiàn)出更強(qiáng)的抗腫瘤活性和更好的穩(wěn)定性。腫瘤細(xì)胞在接受藥物處理后逐漸出現(xiàn)包括細(xì)胞變長、不對稱及出現(xiàn)長偽足等細(xì)胞形態(tài)學(xué)改變,與HA14-1處理細(xì)胞后迅速表現(xiàn)出細(xì)胞縮小、核固縮、凋亡小體出現(xiàn)等細(xì)胞凋亡的典型改變截然不同。這些現(xiàn)象均提示這一系列HA14-1類似物有著不同于母體藥物HA14-1的腫瘤細(xì)胞殺傷機(jī)制,維持細(xì)胞正常形態(tài)的微管蛋白極有可能是其主要作用靶點(diǎn)。雖然秋水仙堿類藥物因?yàn)槎拘暂^大目前還暫未用于腫瘤治療,但秋水仙堿位點(diǎn)作為一個(gè)很有前景的腫瘤藥物靶標(biāo)一直備受關(guān)注,目前已有多個(gè)化合物進(jìn)入了臨床研究。研究及闡明這一系列mHA類似物的作用靶點(diǎn)及其抗腫瘤機(jī)制,將推動(dòng)新型、高效的秋水仙堿位點(diǎn)抑制劑的設(shè)計(jì)和開發(fā),具有重要意義。 方法： 1.化合物合成： 該系列化合物總的合成路徑為采用苯甲醛、酚類似物和氰乙酸乙酯這三種組分和哌啶進(jìn)行一步化反應(yīng)合成�；衔锖铣珊缶�(jīng)過核磁共振氫譜和質(zhì)譜驗(yàn)證。 (1)mHAl的制備 3-溴-4,5-二甲氧基苯甲醛(0.49g,0.002mol)、3-二甲氨基苯酚(0.27g,0.002mol)、氰乙酸乙酯(0.21mL,0.002mol)和哌啶(0.4mL,0.004mol)溶于15ml無水乙醇,室溫下攪拌4小時(shí)。加入80ml二氯甲烷稀釋后用水清洗,硫酸鈉干燥化合物,過濾除去硫酸鈉,蒸發(fā)干燥溶劑。使用色譜分析法(己烷/二氯甲烷)提純粗制品,得到0.6g mHAl,收益率63%。 (2)mHA6的制備 采用3-溴-4,5-二甲氧基苯甲醛、1-萘酚和氰乙酸乙酯作為原料,后續(xù)步驟同上,得到0.45g mHA6,收益率46%。 (3)mHA11的制備 采用3-氯苯甲醛、3-二甲氨基苯酚和氰乙酸乙酯作為原料,后續(xù)步驟同上,得到0.32g mHA11,收益率43%。 2.細(xì)胞培養(yǎng) 人白血病細(xì)胞HL-60/Bcl-2(pZip-Bcl-2質(zhì)粒穩(wěn)定轉(zhuǎn)染)惠贈于Dr. Kapil N. Bhalla(邁阿密大學(xué)醫(yī)學(xué)院,佛羅里達(dá)州,美國)。細(xì)胞培養(yǎng)條件為RPMI1640培養(yǎng)基,10%胎牛血清,2mM谷氨酰胺,100U/ml青霉素,100μg/ml鏈霉素,5%二氧化碳,37℃。 3.小鼠骨髓細(xì)胞收集 小鼠骨髓細(xì)胞樣本來采樣于年齡為3月的C57BL/6雌性小鼠(Charles River Labs)。CO2吸入法處死小鼠,分離取出小鼠的脛骨和股骨,注射器吸取RPMI1640培養(yǎng)基反復(fù)沖洗脛骨和股骨,將骨腔內(nèi)骨髓細(xì)胞沖洗出來,采用淋巴細(xì)胞分離法獲得小鼠骨髓細(xì)胞,接種于96孔細(xì)胞培養(yǎng)板中,每孔1×105細(xì)胞。 4.人正常骨髓細(xì)胞樣本收集 在通過倫理委員會審查及獲得患者知情同意后,取得3例人正常骨髓細(xì)胞樣本。樣本均來自彌漫大B細(xì)胞淋巴瘤患者,已通過病理證實(shí)為正常骨髓。按骨髓穿刺術(shù)操作規(guī)范進(jìn)行操作取得人體骨髓樣本,將肝素化的骨髓細(xì)胞用RPMI-1640培養(yǎng)基稀釋后,采用淋巴細(xì)胞分離法獲得人體骨髓細(xì)胞,接種于96孔細(xì)胞培養(yǎng)板中,每孔1X105細(xì)胞。 5. CellTiter-Blue法測定細(xì)胞活力 HL-60/Bcl-2細(xì)胞或小鼠骨髓細(xì)胞接種于96孔板,分別接受不同濃度的mHAs藥物處理,溫箱孵育72小時(shí)后,采用CellTiter-Blue細(xì)胞活力檢測試劑盒按照使用說明測定細(xì)胞活力。 6. Cell Count Kit-8(CCK-8)法測定細(xì)胞活力 人骨髓細(xì)胞接種于96孔板,24小時(shí)后分別接受不同濃度的mHAs藥物處理,溫箱孵育72小時(shí)后,采用CCK-8細(xì)胞活力檢測試劑盒測定細(xì)胞活力。 7.細(xì)胞集落形成實(shí)驗(yàn) 細(xì)胞接受不同濃度的mHAs藥物及DMSO對照處理24小時(shí)后,收集細(xì)胞,新鮮培養(yǎng)基稀釋后與甲基纖維素半固體培養(yǎng)基混合均勻,接入培養(yǎng)皿使每個(gè)培養(yǎng)皿內(nèi)細(xì)胞數(shù)目為200,體積為2ml。37℃,5%二氧化碳及飽和濕度的培養(yǎng)箱內(nèi)孵育10-14天后倒置顯微鏡下計(jì)數(shù)細(xì)胞克隆數(shù)并計(jì)算細(xì)胞克隆形成率。 8.細(xì)胞形態(tài)學(xué)檢測 1μM mHAs處理細(xì)胞24小時(shí),倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞形態(tài)改變并拍照。 9.計(jì)算機(jī)分子模型 采用微管和DAMA-秋水仙堿復(fù)合物中的微管晶體結(jié)構(gòu)(PDB:1SA0)作為模板,采用Autodock4程序來預(yù)測微管與配體mHAl,6,11的結(jié)合模型。 10.秋水仙堿-微管蛋白競爭結(jié)合試驗(yàn) 1μM放射性標(biāo)記的[3H]秋水仙堿,1%DMSO和不同濃度的待測藥物均溶于50μl G-PEM緩沖液中,與1μM微管蛋白共同孵育1小時(shí),經(jīng)DEAE-纖維素柱層析,采用液體閃爍法(Perkin-Elmer)測定濾液中放射性強(qiáng)度。使用GraphPad Prism對數(shù)據(jù)進(jìn)行非線性回歸分析。 11.微管蛋白聚合實(shí)驗(yàn) 按照試劑盒生產(chǎn)公司提供的說明書進(jìn)行,將微管蛋白溶于G-PEM緩沖液中,得到濃度為3mg/ml的微管蛋白溶液,加入預(yù)先加入50μl待測藥物溶液的96孔板內(nèi),50μl/孔,使用Synergy2酶標(biāo)儀測定吸光度(360nm/420nm),每分鐘一次,共測定1小時(shí)。 12.免疫熒光染色 人肺癌細(xì)胞CRL5908經(jīng)1μMmHAl,6,11處理24h后,4%多聚甲醛4℃固定30分鐘,0.1%Triton X-100透膜處理15min,2%BSA封閉處理30min,1:2000抗-α-微管蛋白單克隆抗體和7：1000羅丹明-鬼筆環(huán)肽標(biāo)記的抗肌動(dòng)蛋白抗體避光處理細(xì)胞1h,1：200抗鼠IgG二抗避光處理30min,1μg/ml DAPI處理1min。免疫熒光顯微鏡下觀察和拍照。 13.細(xì)胞周期測定 1X106HL-60/Bcl-2細(xì)胞分別接受1,3,5μM mHAs藥物處理24h。收集細(xì)胞,PBS清洗2次,重懸于100μlPBS和1ml75%預(yù)冷乙醇內(nèi),-20℃過夜保存。測定當(dāng)天離心細(xì)胞,移去上清,加入500μl PI染色液(含80μg/mL碘化丙啶,100μg/mL核糖核酸酶A,1%曲拉通),避光孵育至少半小時(shí)后流式細(xì)胞儀檢測,FlowJo7.5軟件分析。 14.DNA碎片分析方法測定細(xì)胞凋亡 1X106HL-60/Bcl-2細(xì)胞分別接受不同藥物處理：DMSO對照、陽性對照0.1μM和1μM秋水仙堿,1μM和5μM mHAl,6,11,溫箱孵育24h,按照試劑盒生產(chǎn)公司提供的說明書進(jìn)行提取每個(gè)處理組DNA, DNA經(jīng)2%瓊脂糖凝膠電泳,EB顯色照相。 結(jié)果： 1.mHA系列化合物細(xì)胞毒性測定：測定mHAl-19對人白血病細(xì)胞HL-60/Bcl-2的細(xì)胞毒性并計(jì)算其IC50,結(jié)果顯示該系列化合物中mHA1,6,11具有較強(qiáng)的抗腫瘤活性,選擇這3種化合物進(jìn)行后續(xù)的生物學(xué)評價(jià)和抗腫瘤機(jī)制研究。 2.mHA系列化合物構(gòu)效分析：對該系列化合物進(jìn)行構(gòu)效分析,發(fā)現(xiàn)C6位點(diǎn)上連接二甲氨基與苯基對化合物活性的影響類似但優(yōu)于羥基,羥基優(yōu)于氨基；mHA7,15,17活性均很差,提示C7位點(diǎn)添加任何基團(tuán)均會降低化合物的活性。 3. mHAl,6,11抗腫瘤活性明顯強(qiáng)于其母體藥物HA14-1：分別用不同濃度的HA14-1和mHA1,6,11處理人白血病HL-60/Bcl-2細(xì)胞,24h或72h后測定細(xì)胞活力,結(jié)果顯示mHAl,6,11的ICso均小于1μM,而HA14-1的ICso為9.394±0.18μM, mHAl,6,11抗腫瘤活性明顯強(qiáng)于其母體藥物HA14-1。 4. mHAl,6,11對人白血病細(xì)胞具有較強(qiáng)細(xì)胞毒性,但對正常小鼠骨髓細(xì)胞毒性較低：分別對人白血病HL-60/Bcl-2細(xì)胞及正常小鼠骨髓細(xì)胞進(jìn)行相同濃度的mHAl,6,11藥物處理,72h后分別測定細(xì)胞活力。結(jié)果顯示1μMmHAl,6,11可以殺死約一半的腫瘤細(xì)胞,而1μM藥物處理對正常小鼠骨髓細(xì)胞幾乎無影響。 5. mHAl,6,11對人正常骨髓細(xì)胞幾乎無毒性：采集人正常骨髓細(xì)胞進(jìn)行不同濃度的mHAl,6,11藥物處理,72h后分別測定細(xì)胞活力。結(jié)果顯示3μM mHAs可殺死幾乎全部的惡性HL-60/Bcl-2細(xì)胞,而同樣處理對人正常骨髓細(xì)胞幾乎毫無影響。 6.陽性對照藥物秋水仙堿對正常小鼠骨髓細(xì)胞毒性較大：采用秋水仙堿位點(diǎn)代表藥物秋水仙堿作為陽性對照,對人白血病HL-60/Bcl-2細(xì)胞及正常小鼠骨髓細(xì)胞進(jìn)行相同濃度藥物處理,72h后分別測定細(xì)胞活力,結(jié)果顯示秋水仙堿對腫瘤細(xì)胞及正常骨髓細(xì)胞均有較強(qiáng)的細(xì)胞毒性,盡管其IC50值在人白血病細(xì)胞中僅為33.5±3.5nM,但藥物濃度在25nM時(shí)即可殺傷約30%的正常骨髓細(xì)胞。 7.mHA1,6,11可誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞喪失克隆形成能力：人白血病HL-60/Bcl-2細(xì)胞在接受藥物處理后培養(yǎng)10～14d后計(jì)數(shù)克隆形成數(shù),計(jì)算所得IC50值低于細(xì)胞毒性試驗(yàn),提示藥物處理不僅能在72h內(nèi)迅速殺死腫瘤細(xì)胞,并可引起部分細(xì)胞喪失增殖能力及克隆形成能力。 8.mHA1,6,11引起腫瘤細(xì)胞產(chǎn)生特殊形態(tài)改變：mHA1,6,11可引起腫瘤細(xì)胞產(chǎn)生特殊形態(tài)改變。人白血病HL-60/Bcl-2細(xì)胞由懸浮細(xì)胞典型的球體變?yōu)椴灰?guī)則形、細(xì)胞變長及出現(xiàn)長偽足；人肺癌CRL5908細(xì)胞則由貼壁細(xì)胞典型的梭狀變?yōu)槎噙呅位蝾悎A形。 9.計(jì)算機(jī)模擬對接研究顯示mHA1,6,11可結(jié)合于微管蛋白上的秋水仙堿位點(diǎn)：計(jì)算機(jī)模擬對接研究采用DAMA-秋水仙堿晶體結(jié)構(gòu)作為模板,模擬計(jì)算結(jié)果顯示mHA1,6,11與秋水仙堿均可結(jié)合于微管蛋白上的相同位點(diǎn)-秋水仙堿位點(diǎn),mHA1,6和秋水仙堿結(jié)合模式相似而mHA11結(jié)合模式略有不同。 10.秋水仙堿-微管蛋白競爭結(jié)合試驗(yàn)證實(shí)了mHA1,6,11可與秋水仙堿競爭結(jié)合位點(diǎn)：秋水仙堿-微管蛋白競爭結(jié)合試驗(yàn)顯示mHA1,6,11可與放射性標(biāo)記的秋水仙堿競爭結(jié)合位點(diǎn),抑制其與微管蛋白結(jié)合,其作用呈劑量依賴性方式。 11.微管蛋白聚合實(shí)驗(yàn)顯示mHA1,6,11和秋水仙堿均可抑制微管蛋白聚合,紫杉醇可促進(jìn)微管蛋白聚合：微管蛋白聚合實(shí)驗(yàn)顯示紫杉醇可促進(jìn)微管蛋白聚合,mHA1,6,11和秋水仙堿均可抑制微管蛋白聚合,證實(shí)mHA1,6,11具有強(qiáng)效的抗微管聚合作用。 12.免疫熒光染色實(shí)驗(yàn)證實(shí)mHA1,6,11可降低細(xì)胞內(nèi)微管含量并破壞其網(wǎng)狀分布：人肺癌CRL5908細(xì)胞接受1μMmHA1,6,11處理24h后行免疫熒光檢測,顯示胞漿內(nèi)沿細(xì)胞長軸密集分布的微管變?yōu)閺浬⒎植?且熒光強(qiáng)度明顯降低,提示細(xì)胞內(nèi)微管含量減少。 13.mHAl,6,11可誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞發(fā)生G2/M細(xì)胞周期阻滯：人白血病HL-60/Bcl-2細(xì)胞在接受1μM mHA1,6,11藥物處理24h后經(jīng)流式細(xì)胞儀檢測證實(shí)細(xì)胞發(fā)生特異性G2/M細(xì)胞周期阻滯。 14.DNA碎片分析證實(shí)mHA1,6,11可誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞發(fā)生凋亡：mHA1,6,11及秋水仙堿處理人白血病HL-60/Bcl-2細(xì)胞24h后行DNA碎片分析,出現(xiàn)明顯的凋亡條帶,證實(shí)秋水仙堿及mHAl,6,11均可誘導(dǎo)人白血病HL-60/Bcl-2細(xì)胞發(fā)生凋亡。 結(jié)論： 1.本研究獲得了一系列HA14-1類似物并證實(shí)其為具有高效抗腫瘤活性的微管蛋白抑制劑。 2.對該系列化合物的構(gòu)效分析發(fā)現(xiàn)C6位點(diǎn)上連接二甲氨基與苯基類似但均優(yōu)于羥基,羥基優(yōu)于氨基；C7位點(diǎn)上不宜連接任何側(cè)鏈,為日后繼續(xù)研發(fā)新型微管蛋白抑制劑提供了設(shè)計(jì)思路。 3.本研究結(jié)果證明了mHA1,6,11具有較強(qiáng)的腫瘤細(xì)胞殺傷作用,其IC50為納摩爾級別,大大優(yōu)于其母體藥物HA14-1,而且對正常細(xì)胞毒性較小,具有進(jìn)一步研發(fā)成藥的可能性。 4.計(jì)算機(jī)模擬對接研究及秋水仙堿-微管蛋白競爭結(jié)合實(shí)驗(yàn)證實(shí)mHA1,6,11均結(jié)合于微管蛋白上的秋水仙堿位點(diǎn)并可與秋水仙堿競爭結(jié)合位點(diǎn),為作用于秋水仙堿位點(diǎn)的新型微管蛋白抑制劑。 5.微管蛋白聚合實(shí)驗(yàn)進(jìn)一步證實(shí)mHAl,6,11與紫杉醇作用方式相反,與秋水仙堿作用方式一致,為促微管蛋白解聚劑。 6.免疫熒光染色實(shí)驗(yàn)顯示mHAl,6,11可降低細(xì)胞內(nèi)微管數(shù)量及破壞胞漿內(nèi)正常微管網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)。 7.流式細(xì)胞儀細(xì)胞周期檢測及DNA碎片分析實(shí)驗(yàn)證實(shí)mHAl,6,11通過阻滯腫瘤細(xì)胞于G2/M期而誘導(dǎo)細(xì)胞發(fā)生凋亡。 8.本研究結(jié)果初步探明了該系列化合物殺傷腫瘤細(xì)胞的作用機(jī)制：通過作用于微管蛋白,抑制微管蛋白聚合,從而影響紡錘體形成,使腫瘤細(xì)胞停滯于G2/M細(xì)胞周期,不能完成正常的有絲分裂,從而發(fā)生凋亡。
【關(guān)鍵詞】：
【學(xué)位授予單位】：南方醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】：博士
【學(xué)位授予年份】：2013
【分類號】：R73-36
【目錄】：
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中國博士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫 前10條
1 高金珉;腫瘤抑制因子CYLD調(diào)節(jié)微管組裝及微管相關(guān)細(xì)胞活動(dòng)的分子機(jī)制[D];南開大學(xué);2010年
2 卜強(qiáng);RhoC和ROCK-1在前列腺癌中的表達(dá)及其對MAPK和Akt影響的實(shí)驗(yàn)研究[D];山西醫(yī)科大學(xué);2011年
3 王朝云;利用RNAi干擾PrP及其突變體的研究[D];中國疾病預(yù)防控制中心;2011年
4 盧瑗瑗;結(jié)直腸癌相關(guān)抗原MC3-Ag的鑒定和功能研究[D];第四軍醫(yī)大學(xué);2011年
5 阮菲;PRL-3介導(dǎo)的RhoA/ROCK信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路對異位子宮內(nèi)膜細(xì)胞遷徙的調(diào)控作用研究[D];浙江大學(xué);2012年
6 陶永輝;重組人血管抑素的制備及其作用特異性的研究[D];江南大學(xué);2005年
7 張輝;依地福新抑制粟酒裂殖酵母細(xì)胞胞質(zhì)分裂機(jī)制的研究[D];中南大學(xué);2006年
8 董辰方;PrP對tubulin和GFAP的影響及鏈霉素增加PrP~（Sc）檢測敏感性的研究[D];中國疾病預(yù)防控制中心;2008年
9 王躍明;N-（2，6-二甲氧基吡啶-3-取代）-9-甲基咔唑-3-磺酰胺（IG-105）作為全新小分子微管蛋白配體藥物的抗腫瘤作用，特點(diǎn)及分子機(jī)制[D];中國協(xié)和醫(yī)科大學(xué);2008年
10 蔡同建;tau蛋白磷酸化在錳誘導(dǎo)的神經(jīng)毒性中的作用[D];第四軍醫(yī)大學(xué);2009年
中國碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫 前10條
1 張也頻;人肝癌miR-221、miR-222和miR-92b與p57kip2表達(dá)關(guān)系的研究[D];昆明醫(yī)學(xué)院;2011年
2 陳茜;HAMSC分化過程的生物力學(xué)特性及納米金對血管生成抑制作用的研究[D];暨南大學(xué);2011年
3 涂龍霞;組織蛋白酶B（Cathepsin B）在紫杉醇誘導(dǎo)胃腺癌細(xì)胞凋亡中的作用[D];安徽醫(yī)科大學(xué);2011年
4 楊建峰;PTEN和Survivin在鮑溫病組織中的表達(dá)和臨床意義[D];鄭州大學(xué);2005年
5 葉艷;BH3-only蛋白BIM與紫杉醇誘導(dǎo)的胃腺癌細(xì)胞凋亡的關(guān)系[D];安徽醫(yī)科大學(xué);2006年
6 程碧珍;RNA干擾技術(shù)對食管癌細(xì)胞系Survivin基因表達(dá)的抑制作用及其促凋亡研究[D];汕頭大學(xué);2007年
7 胡德海;丹參酮ⅡA抑制人胃癌細(xì)胞生長及機(jī)制的研究[D];蘇州大學(xué);2007年
8 左巍;丁酸鈉逆轉(zhuǎn)NB4細(xì)胞對As_2O_3耐藥的研究[D];吉林大學(xué);2008年
9 江蓓蕾;Bim在紫杉醇誘導(dǎo)胃腺癌細(xì)胞凋亡中的作用[D];安徽醫(yī)科大學(xué);2008年
10 張夢曦;紫杉醇對胃腺癌細(xì)胞株BGC-823環(huán)氧化酶-2、P-糖蛋白表達(dá)的影響[D];安徽醫(yī)科大學(xué);2009年
【相似文獻(xiàn)】
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2 汪成進(jìn);段成才;胡文浩;;非秋水仙堿、長春堿類微管蛋白阻聚劑的研究進(jìn)展[J];中國藥學(xué)雜志;2013年01期
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8 徐志廣;許旋;袁傳能;;紫杉醚與αβ微管蛋白的分子對接[J];物理化學(xué)學(xué)報(bào);2008年10期
9 郭懷蘭;余宗濤;楊雪鋒;徐健;于東;孫秀發(fā);;碘過量對仔鼠腦α-微管蛋白表達(dá)的影響及硒的干預(yù)作用[J];營養(yǎng)學(xué)報(bào);2007年02期
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2 龍亞秋;薛丁;劉祖龍;周足宇;俞強(qiáng);余龍;;具有體內(nèi)抗腫瘤活性的新型微管蛋白聚合抑制劑:發(fā)現(xiàn)、結(jié)構(gòu)優(yōu)化及機(jī)理研究[A];中國化學(xué)會第28屆學(xué)術(shù)年會第3分會場摘要集[C];2012年
3 任萱;林莉萍;Pui-kai Li;丁健;;Compound 8抗新生血管生成的作用及機(jī)制研究[A];2007醫(yī)學(xué)前沿論壇暨第十屆全國腫瘤藥理與化療學(xué)術(shù)會議論文集[C];2007年
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6 劉翎;劉宗英;李卓榮;;作用于秋水仙堿結(jié)合位點(diǎn)的微管蛋白抑制劑研究進(jìn)展[A];2011年中國藥學(xué)大會暨第11屆中國藥師周論文集[C];2011年
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8 孫啟明;吳茂江;林莉萍;楊春皓;丁健;;抗腫瘤藥CA4衍生物的藥效評價(jià)及機(jī)理研究[A];2007醫(yī)學(xué)前沿論壇暨第十屆全國腫瘤藥理與化療學(xué)術(shù)會議論文集[C];2007年
9 蘇丹;馬勝林;Herbert Yu;;β-微管蛋白Ⅲ mRNA表達(dá)與紫杉醇療效無相關(guān)性[A];2009醫(yī)學(xué)前沿論壇暨第十一屆全國腫瘤藥理與化療學(xué)術(shù)會議論文集[C];2009年
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中國重要報(bào)紙全文數(shù)據(jù)庫 前1條
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中國博士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫 前10條
1 席菁樂;新型微管蛋白抑制劑的研發(fā)和抗腫瘤機(jī)制研究[D];南方醫(yī)科大學(xué);2013年
2 尹云厚;中藥復(fù)方制劑對缺氧大鼠微管蛋白和驅(qū)動(dòng)蛋白表達(dá)影響的研究[D];中國人民解放軍軍需大學(xué);2003年
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6 李耀武;基于微管蛋白小分子抗腫瘤藥物的設(shè)計(jì)與合成研究[D];第二軍醫(yī)大學(xué);2008年
7 李建農(nóng);新型微管蛋白配體3-溴代丙酰胺苯甲酰脲（JIMB01）的抗腫瘤作用與分子機(jī)理[D];中國協(xié)和醫(yī)科大學(xué);2003年
8 懷娟;大鼠TRPV4與膜聯(lián)蛋白A2及微管蛋白β5相互作用研究[D];山東大學(xué);2012年
9 曾紅;腹毛目纖毛蟲皮層微管類細(xì)胞骨架及微管蛋白的研究[D];華東師范大學(xué);2006年
10 王朝云;利用RNAi干擾PrP及其突變體的研究[D];中國疾病預(yù)防控制中心;2011年
中國碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫 前10條
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2 周瑞敏;α-synuclein與微管蛋白相互作用及其對微管形成影響的初步研究[D];中國疾病預(yù)防控制中心;2009年
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4 李明蘭;βⅢ-微管蛋白在耐藥性卵巢癌中的表達(dá)及其臨床價(jià)值的探討[D];蘭州大學(xué);2009年
5 韓超;若干鬼臼類化合物與微管蛋白相互作用的分子動(dòng)力學(xué)研究[D];蘭州大學(xué);2013年
6 李春雷;基于微管蛋白抗腫瘤活性物質(zhì)靶向篩選模型的建立及應(yīng)用[D];昆明醫(yī)學(xué)院;2007年
7 何玉琴;天然植物藥物IHA-01對微管的作用及其機(jī)制研究[D];昆明醫(yī)科大學(xué);2013年
8 王蕭慧;游仆蟲的包囊現(xiàn)象和微管蛋白基因表達(dá)的研究[D];華東師范大學(xué);2014年
9 董月輝;新型苯并磺內(nèi)酰胺類微管蛋白抑制劑的設(shè)計(jì)、合成及活性研究[D];山東大學(xué);2008年
10 王文娜;新型苯并咪唑類微管蛋白抑制劑的設(shè)計(jì)、合成及活性研究[D];吉林大學(xué);2014年
本文關(guān)鍵詞：新型微管蛋白抑制劑的研發(fā)和抗腫瘤機(jī)制研究，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。
本文編號：135378
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