【摘要】:人參(Panax ginseng C.A.Mey.)為五加科(Araliaceae)人參屬(Panax)植物,具有大補(bǔ)元?dú)?生津安神,復(fù)脈固脫,補(bǔ)脾益肺等功效。人參中主要藥效成分為人參皂苷,屬于三萜皂苷類化合物,也是人參屬植物西洋參、三七等的主要藥效成分,F(xiàn)代藥理學(xué)研究證明,人參皂苷具有抗腫瘤、調(diào)節(jié)免疫系統(tǒng)、調(diào)節(jié)中樞神經(jīng)系統(tǒng)、調(diào)節(jié)循環(huán)系統(tǒng)及抗衰老等多種藥理作用。截至目前,國內(nèi)外關(guān)于人參皂苷類化學(xué)成分與藥理作用的研究報(bào)道很多,大部分都集中在中、低極性的常見人參皂苷及稀有人參皂苷,如人參皂苷Rb_1、Rb_2、Rb_3、Rc、Rd、Re、Rg_1、Rg_2、Rg_3、Rh_1、Rh_2、Rk_1、Rg_5、PPD、PPT等等,而關(guān)于高極性人參皂苷如R0、Ra_1、Ra_2、Ra_3等的研究報(bào)道則很少。為填補(bǔ)高極性人參皂苷在人參屬植物中的含量以及生物活性方面的研究空白,本文對人參中高極性人參皂苷進(jìn)行了提取、分離、結(jié)構(gòu)鑒定、含量測定以及生物活性的系統(tǒng)研究。本文首先從人參根80%的乙醇提取物中分離得到6個(gè)高極性人參皂苷單體,根據(jù)1H NMR、13C NMR、MS等波譜數(shù)據(jù)并結(jié)合理化性質(zhì),鑒定了它們的化學(xué)結(jié)構(gòu),它們分別為人參皂苷Ra_1、Ra_2、Ra_3、Rb_1、Rb_2和R0。本文還建立了人參屬植物中人參皂苷Ra_1、Ra_2、Ra_3含量的HPLC測定方法。通過提取溶劑、提取方法、提取時(shí)間以及液料比等影響因素的考察,確立了最佳的提取方法并進(jìn)行了方法學(xué)考察。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明,人參皂苷Ra_1和Ra_2在0.7μg~22.50μg、人參皂苷Ra_3在0.82μg~52.5μg范圍內(nèi),目標(biāo)分析物色譜峰面積(y)與進(jìn)樣量(m)呈良好的線性關(guān)系。方法的日內(nèi)精密度、日間精密度、重復(fù)性、穩(wěn)定性、加樣回收率的RSD均小于2%,說明所建立的含量測定方法具有靈敏度高、精密度好、準(zhǔn)確度高等優(yōu)點(diǎn)。接著利用上述分析方法,對三種人參屬植物中的人參皂苷Ra_1、Ra_2、Ra_3進(jìn)行了含量測定。結(jié)果表明,人參根、莖、葉,西洋參根、葉,三七根、莖、葉中均含有人參皂苷Ra_1、Ra_2、Ra_3。人參皂苷Ra_1在西洋參根中含量最高,為0.56%;.人參皂苷Ra_2在三七葉中含量最高,為0.26%;人參皂苷Ra_3在西洋參根中含量最高,為1.24%。關(guān)于人參皂苷的抗腫瘤活性的研究報(bào)道很多,尤其是低極性的稀有人參皂苷的抗腫瘤活性,但人參皂苷Ra_1、Ra_2、Ra_3的抗腫瘤活性研究報(bào)道則很少,這可能與這些皂苷較難分離純化有關(guān)。因此,本文通過CCK-8法對其抗癌活性進(jìn)行了初步研究,考察了人參皂苷Ra_1、Ra_2、Ra_3對肺癌細(xì)胞(A549)、乳腺癌細(xì)胞(MCF-7)、肝癌細(xì)胞(Hep G2)、黑色素瘤細(xì)胞(A375)的增殖抑制作用。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明,人參皂苷Ra_1、Ra_2、Ra_3對于肺癌細(xì)胞以及肝癌細(xì)胞有一定的增殖抑制作用。綜上,本文從人參根中分離鑒定了6個(gè)高極性皂苷類化學(xué)成分;建立了人參屬植物中人參皂苷Ra_1、Ra_2、Ra_3含量的HPLC測定方法;通過體外實(shí)驗(yàn)對人參皂苷Ra_1、Ra_2、Ra_3的抗腫瘤活性進(jìn)行了初步研究。本文的研究結(jié)果為高極性人參皂苷的醫(yī)藥應(yīng)用以及人參屬藥材質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的完善提供了一定的科學(xué)依據(jù)。
【學(xué)位授予單位】:吉林大學(xué)
【學(xué)位級別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2017
【分類號】:R284.1
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