【摘要】：目的探討內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激(ERS)在同型半胱氨酸(Hcy)介導(dǎo)的APOE~(-/-)小鼠心肌細(xì)胞及H9C2大鼠心肌細(xì)胞凋亡中的作用及枸杞多糖(LBP)的干預(yù)效果。方法1.動(dòng)物:取36只6周齡健康SPF級(jí)雄性APOE~(-/-)小鼠,隨機(jī)分為對(duì)照組(CG)、同型半胱氨酸組(HG)、同型半胱氨酸+枸杞多糖組(HLG),每組12只。CG給予普通飲食,鹽水灌胃;HG給予含1.7%蛋氨酸的AIN-93G飲食,鹽水灌胃;HLG給予含1.7%蛋氨酸的AIN-93G飲食,LBP灌胃。干預(yù)24周后處死小鼠,檢測(cè)血清Hcy濃度,記錄心臟臟器系數(shù),TUNEL染色檢測(cè)各組心肌細(xì)胞凋亡差異,免疫組化及蛋白印跡檢測(cè)ERS相關(guān)因子(BIP、ATF6、IRE1、PERK、ERO1-α、CHOP)表達(dá)情況。2.細(xì)胞:在37℃、5%的CO_2條件下培養(yǎng)H9C2大鼠心肌細(xì)胞,取對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期細(xì)胞分為四組進(jìn)行試驗(yàn):對(duì)照組(CG):4%的胎牛血清、高糖DMEM培養(yǎng)48h;枸杞多糖組(LG):在4%的胎牛血清、高糖DMEM中加入40mg/L的LBP溶液培養(yǎng)48h;同型半胱氨酸組(HG):在4%的胎牛血清、高糖DMEM中加入200 umol/L的Hcy溶液培養(yǎng)48h;同型半胱氨酸+枸杞多糖組(HLG):在4%的胎牛血清、高糖DMEM中分別加入40mg/L的LBP溶液和200 umol/L的Hcy溶液培養(yǎng)48h。按實(shí)驗(yàn)需求分別將上述模型復(fù)制在96孔板、24孔板、6孔板中,以完成CCK8細(xì)胞活力檢測(cè)、TUNEL凋亡檢測(cè)、蛋白印跡等操作,檢測(cè)ERS相關(guān)因子(BIP、ATF6、IRE1、PERK、ERO1-α、CHOP)表達(dá)情況。結(jié)果1.動(dòng)物:與CG相比,HG血清Hcy濃度明顯升高,心臟臟器系數(shù)增加,心肌細(xì)胞凋亡增多。ERS相關(guān)因子的免疫組化及蛋白印跡結(jié)果提示HG較CG的表達(dá)量均明顯增多,HLG較HG有所降低,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。2.細(xì)胞:LG與CG相比,細(xì)胞活力及細(xì)胞凋亡無(wú)明顯差別,ERS相關(guān)因子表達(dá)無(wú)明顯差別;HG與CG相比,細(xì)胞活力下降、凋亡指數(shù)增加、ERS相關(guān)因子表達(dá)升高;HLG與HG相比,細(xì)胞活力有所提升,凋亡指數(shù)減小,ERS相關(guān)因子表達(dá)升高情況有所回調(diào),差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。結(jié)論1.Hcy能經(jīng)ERS介導(dǎo)心肌細(xì)胞凋亡;2.LBP能減輕ERS,減少Hcy介導(dǎo)的心肌細(xì)胞凋亡,對(duì)心肌有保護(hù)作用。
【學(xué)位授予單位】：寧夏醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2019
【分類號(hào)】：R285.5

【相似文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前10條

1 胡志斌;李U喢，

本文編號(hào)：2700036