目的:鄰苯二甲酸二乙基己酯(Di-2-ethylhexyl phthalate,DEHP)作為一種增塑劑被廣泛應(yīng)用于食品包裝和醫(yī)療設(shè)備,且年產(chǎn)量巨大(近三百萬噸)。鄰苯二甲酸酯能夠很輕易地遷入人體體液中,血袋和靜脈輸液管等很可能是人類接觸DEHP的重要途徑。鄰苯二甲酸-單-乙基己酯(Mono-(2-ethylhexyl)phthalate,MEHP)是DEHP的一種活性代謝產(chǎn)物。大量研究表明,MEHP具有生殖系統(tǒng)毒性、泌尿系統(tǒng)毒性、肝臟毒性、生長發(fā)育毒性和致癌性,但是對于心血管毒性的探究卻不多見,其作用機(jī)制也不明確。近年來,隨著對自噬研究的深入,發(fā)現(xiàn)細(xì)胞自噬是細(xì)胞對細(xì)胞器及長半衰期蛋白質(zhì)進(jìn)行降解并予以回收再利用的一種細(xì)胞生存機(jī)制,被稱為Ⅱ型程序性死亡,區(qū)別于細(xì)胞凋亡(Ⅰ型程序性死亡)。雖然二者從形態(tài)學(xué)和代謝途徑等方面存在差別,但是,越來越多的研究表明,自噬和凋亡之間的信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路存在廣泛交聯(lián)。有研究表明,MEHP會引起一些細(xì)胞發(fā)生凋亡。所以本實(shí)驗(yàn)以人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞EA.hy 926為研究對象,探究MEHP是否可以引起溶酶體膜通透性增加(Lysosomal membrane permea...

【文章頁數(shù)】：50 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
中文摘要
英文摘要
(一)前言
(二)材料和方法
    1.材料
        1.1 實(shí)驗(yàn)對象、藥品和主要試劑
        1.2 主要儀器
    2.方法
        2.1 細(xì)胞培養(yǎng)和處理
        2.2 MTT實(shí)驗(yàn)
        2.3 蛋白質(zhì)印跡實(shí)驗(yàn)(Westernblot)
        2.4 AO染色檢測溶酶體膜穩(wěn)定性
        2.5 JC-1檢測線粒體膜電位
        2.6 TUNEL染色檢測細(xì)胞凋亡
        2.7 統(tǒng)計(jì)方法
(三)結(jié)果
    1.MEHP對細(xì)胞活性的影響
    2.MEHP誘導(dǎo)EA.hy926細(xì)胞發(fā)生自噬
    3.MEHP引起LMP
    4.MEHP引起組織蛋白酶B釋放增加
    5.MEHP引起細(xì)胞線粒體膜電位下降
    6.MEHP引起細(xì)胞色素c蛋白表達(dá)量增加
    7.MEHP誘導(dǎo)EA.hy926細(xì)胞自噬依賴性凋亡
    8.CA-074Me對細(xì)胞色素c的釋放和細(xì)胞凋亡的影響
(四)討論
(五)結(jié)論
(六)參考文獻(xiàn)
綜述
    參考文獻(xiàn)
攻讀學(xué)位期間發(fā)表論文情況
致謝



本文編號：3876703