目的:為了探索p70S6K1是否參與肝細(xì)胞癌對(duì)索拉菲尼的耐藥,以及探討索拉菲尼誘導(dǎo)耐藥后p70S6K1對(duì)肝癌細(xì)胞的分子作用機(jī)制,從而明確p70S6K1作為耐藥性肝癌的潛在治療靶標(biāo),豐富肝癌治療手段。方法:1、收集了肝癌患者手術(shù)標(biāo)本及病例資料92例,分析其臨床生化檢驗(yàn)指標(biāo)以及選取其中20例經(jīng)10%福爾馬林固定、取材、包埋、制片后,經(jīng)常規(guī)HE染色后選取典型蠟塊,應(yīng)用免疫組織化學(xué)染色檢測(cè)耐藥性肝細(xì)胞內(nèi)源性p70S6K1,TOPO II,TP53,Ki-67蛋白表達(dá)的變化,另外進(jìn)一步利用RT-PCR檢測(cè)耐藥性肝細(xì)胞內(nèi)源性p70S6K1mRNAs水平在肝癌及癌旁組織種的表達(dá)。2、構(gòu)建索拉菲尼耐藥HepG2細(xì)胞株,采用熒光定量PCR檢測(cè)索拉菲尼耐藥HepG2細(xì)胞內(nèi)p70S6K1mRNAs水平在肝癌及癌旁組織種的表達(dá)。進(jìn)而進(jìn)一步運(yùn)用CCK8細(xì)胞增殖法和免疫熒光染色法探討細(xì)胞生長(zhǎng)與增殖狀況,進(jìn)而評(píng)價(jià)耐藥性對(duì)細(xì)胞存活的影響。3、應(yīng)用shRNA技術(shù)構(gòu)建索拉菲尼耐藥HepG2細(xì)胞株p70S6K1敲低模型,通過(guò)轉(zhuǎn)染后克隆實(shí)驗(yàn)進(jìn)一步驗(yàn)證p70S6K1對(duì)耐藥性肝癌細(xì)胞增殖作用。然后通過(guò)免疫熒光檢測(cè)p70S6K1敲...

【文章頁(yè)數(shù)】：60 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
個(gè)人簡(jiǎn)歷
中英文縮略詞表
中文摘要
英文摘要
前言
第一部分 p70S6K1與臨床索拉菲尼耐藥性肝細(xì)胞癌發(fā)病的相關(guān)性研究
    1 實(shí)驗(yàn)材料
    2 實(shí)驗(yàn)方法
    3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
    4 實(shí)驗(yàn)討論
    5 小結(jié)
第二部分 p70S6K1對(duì)索拉菲尼耐藥性肝癌細(xì)胞的作用及分子機(jī)制的研究
    1 實(shí)驗(yàn)材料
    2 實(shí)驗(yàn)方法
    3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
    4 實(shí)驗(yàn)討論
    5 小結(jié)
參考文獻(xiàn)
綜述
    參考文獻(xiàn)
致謝
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本文編號(hào)：3919800