發(fā)布時間：2023-10-15 14:43

　　目的研究曲格列酮的心肌細胞毒性特征,并從線粒體氧化應(yīng)激和自噬角度探討其潛在的毒作用機制。方法人源心肌細胞AC16給予不同濃度曲格列酮0～40μmol·L^-1孵育24 h。倒置顯微鏡觀察細胞形態(tài),CCK-8法檢測細胞存活率,漏出法檢測乳酸脫氫酶(LDH)釋放量;熒光探針TMRM檢測線粒體膜電位和CM-H₂DCFDA檢測全細胞活性氧的含量;Western印跡法檢測微管相關(guān)蛋白Ⅱ/Ⅰ輕鏈3(LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ)比值和P62蛋白表達水平。結(jié)果與細胞對照組相比,曲格列酮可濃度依賴性地引起細胞質(zhì)皺縮、細胞存活率下降(r=-0.928,P<0.05)和LDH釋放量增加(r=0.746,P<0.05);曲格列酮10和20μmol·L^-1可明顯降低細胞線粒體膜電位(P<0.05),增加全細胞活性氧含量(P<0.05);顯著增加LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ比值,上調(diào)P62蛋白表達(P<0.05)。結(jié)論曲格列酮可引起心肌細胞損傷和線粒體功能障礙,其機制與線粒體氧化應(yīng)激和自噬體降解受阻密切相關(guān)。

【文章頁數(shù)】：6 頁

【文章目錄】：
1 材料與方法
    1.1 主要試劑和儀器
    1.2 細胞培養(yǎng)和分組處理
    1.3 倒置顯微鏡觀察細胞形態(tài)
    1.4 CCK-8法檢測細胞存活率
    1.5 漏出法檢測LDH釋放量
    1.6 高內(nèi)涵活細胞成像法檢測線粒體膜電位和細胞ROS含量
    1.7 Western印跡法檢測LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ比值和P62蛋白表達水平
    1.8 統(tǒng)計學(xué)分析
2 結(jié)果
    2.1 曲格列酮對AC16細胞形態(tài)學(xué)的影響
    2.2 曲格列酮對AC16細胞存活率和LDH漏出的影響
    2.3 曲格列酮對AC16細胞線粒體膜電位的影響
    2.4 曲格列酮對AC16細胞ROS含量的影響
    2.5 曲格列酮對AC16心肌細胞LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ比值和P62蛋白表達的影響
3 討論



本文編號：3854101