表皮生長因子受體(Epidermal Growth Factor Receptor,EGFR),是以表皮生長因子和轉(zhuǎn)化生長因子等生長因子為配體的受體酪氨酸激酶。與配體結合后EGFR會發(fā)生自發(fā)聚合,激活其激酶活性而自磷酸化,并傳導到細胞內(nèi)的多條信號通路,如MAPK、PI3K-Akt信號通路等。自從EGFR被發(fā)現(xiàn)以來,大量的臨床數(shù)據(jù)證明其對多種疾病,尤其是癌癥有重要的影響。EGFR會在癌癥組織中發(fā)生大量的擴增和多位點的突變。近年來,隨著精準醫(yī)療的迅猛發(fā)展,針對EGFR的分子靶向藥物開始進入市場。例如特異性共價結合EGFR T790M等突變的第三代EGFR小分子抑制劑奧希替尼(又名AZD9291)。雖然其可有效地延長病人約8-10個月的生存,但在臨床使用中仍舊會由于EGFR的C797S等突變或旁路信號通路的持續(xù)激活等多種因素而產(chǎn)生耐藥。進一步對EGFR進行各個方面的研究仍舊有很大的需求。新近發(fā)展的以單分子熒光成像為基礎的超高分辨率顯微成像技術,突破了光學衍射極限的限制,能夠獲得高于光學分辨率水平的熒光圖像。一些特定的熒光分子,包括一些熒光蛋白和熒光小分子,在強的激光的照射下能夠在特定的還原性...

【文章頁數(shù)】：86 頁

【學位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
abstract
第1章 引言
    1.1 表皮生長因子受體(EGFR)簡介
        1.1.1 EGFR家族和其基因編碼
        1.1.2 EGFR的結構
        1.1.3 EGFR的信號轉(zhuǎn)導過程和其生物功能
        1.1.4 EGFR在癌癥中的變異和靶向其的藥物
    1.2 超高分辨顯微鏡與單分子成像簡介
        1.2.1 超高分辨顯微鏡和單分子成像發(fā)展簡史
        1.2.2 單分子成像的一般步驟
        1.2.3 單分子成像的一些具體應用
    1.3 EGFR單分子成像的研究進展
    1.4 常用單分子成像的探針與EGFR單分子成像標記方法現(xiàn)狀
    1.5 EGFR小分子熒光探針P48 基本情況和科學問題的提出
第2章 材料與方法
    2.1 材料
        2.1.1 細胞
        2.1.2 質(zhì)粒
        2.1.3 實驗試劑
        2.1.4 實驗儀器
        2.1.5 實驗耗材
        2.1.6 實驗藥物
        2.1.7 實驗所用試劑溶液配制方法
    2.2 實驗方法
        2.2.1 激發(fā)發(fā)射光譜和熒光強度測量方法
        2.2.2 細胞培養(yǎng)、凍存與復蘇和轉(zhuǎn)化
        2.2.3 蛋白樣品聚丙烯酰胺凝膠電泳、熒光掃描和免疫印跡方法
        2.2.4 dSTORM顯微鏡下單分子成像方法
    2.3 計算方法與統(tǒng)計學分析
        2.3.1 計算聚合程度變化的方法
        2.3.2 統(tǒng)計學分析
第3章 實驗結果
    3.1 P48 探針的光物理性質(zhì)
    3.2 P48 探針的結合特性
    3.3 不同細胞EGFR的活性及P48 對其的影響
    3.4 P48 探針單分子成像及單分子性質(zhì)
    3.5 P48 探針單分子成像觀測細胞EGFR聚集
第4章 結論與討論
    4.1 結論
    4.2 討論
第5章 單顆粒追蹤技術記錄分析DNA/PEI納米顆粒進入細胞的過程
    5.1 研究背景
    5.2 研究結果
第6章 抑制G9a促進膀胱癌細胞凋亡作用的免疫印跡研究
    6.1 研究背景
    6.2 研究結果
參考文獻
附錄
致謝
作者簡歷及攻讀學位期間發(fā)表的學術論文與研究成果



本文編號：3821805