慢性炎性疼痛的控制和治療仍然是臨床需要解決的難題之一。以嗎啡和昔布類為代表的傳統(tǒng)鎮(zhèn)痛藥雖然能緩解慢性疼痛,但會產(chǎn)生不可避免的副作用。研究表明,EMs,尤其是EM-1,具有與嗎啡相當?shù)逆?zhèn)痛能力且副作用較嗎啡明顯降低。但其酶解穩(wěn)定性差、生物利用度低,限制了其在臨床的應用。我們以EM-1為模板,設計合成了一系列類似物(MEL-EMs)。與母肽相比,MEL-內(nèi)嗎啡肽類似物酶解穩(wěn)定性和生物利用度均顯著提高。本研究旨在進一步探究MEL-類似物在慢性炎性疼痛模型中的鎮(zhèn)痛效應及作用機制,為評估其作為慢性炎癥候選藥物提供參考。在本研究中,我們以MEL-0614和MEL-N1606為研究代表。首先,通過Von Frey、Hargreaves及溫浴甩尾實驗來評價MEL-類似物的在體鎮(zhèn)痛活性。結(jié)果表明,MEL-類似物均體現(xiàn)出類似或優(yōu)于嗎啡的鎮(zhèn)痛活性。雖然帕瑞昔布也具有鎮(zhèn)痛效應,但明顯弱于嗎啡和MEL-類似物。同時,通過檢測膠質(zhì)細胞特異性標記物探索類似物對過度激活的膠質(zhì)細胞的抑制能力。發(fā)現(xiàn)類似物可以顯著抑制膠質(zhì)細胞的反應性,而嗎啡卻沒有明顯的抑制能力。Real-time PCR實驗進一步探究類似物的作用機制,結(jié)...

【文章頁數(shù)】：71 頁

【學位級別】：碩士

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中文摘要
Abstract
第一章 前言
    1.1 慢性炎性疼痛
    1.2 非神經(jīng)細胞參與慢性炎性疼痛的調(diào)節(jié)
        1.2.1 中樞非神經(jīng)細胞
        1.2.2 外周非神經(jīng)細胞
    1.3 疼痛或損傷刺激后膠質(zhì)細胞的不同反應狀態(tài)
        1.3.1 膠質(zhì)標記物或形態(tài)的變化
        1.3.2 膠質(zhì)細胞MAPKs磷酸化
        1.3.3 膠質(zhì)細胞表面受體、離子通道、轉(zhuǎn)運體的變化
        1.3.4 膠質(zhì)細胞趨化因子、細胞因子、生長因子和蛋白酶的變化
    1.4 神經(jīng)-膠質(zhì)及膠質(zhì)-膠質(zhì)間的相互作用
        1.4.1 神經(jīng)-膠質(zhì)間相互作用
        1.4.2 膠質(zhì)-膠質(zhì)間相互作用
        1.4.3 神經(jīng)膠質(zhì)介質(zhì)調(diào)節(jié)興奮性、抑制性突觸傳遞
    1.5 慢性炎性疼痛治療藥物
    1.6 本章小結(jié)
第二章 實驗材料及方法
    2.1 實驗材料
        2.1.1 實驗動物
        2.1.2 實驗藥品
        2.1.3 抗體及引物序列
        2.1.4 實驗儀器
        2.1.5 基礎緩沖液的配置
    2.2 實驗方法
        2.2.1 CFA模型的構(gòu)建
        2.2.2 給藥方式
        2.2.3 機械刺激痛閾值測定
        2.2.4 熱刺激痛閾值測定
        2.2.5 熱刺激鎮(zhèn)痛作用測定
        2.2.6 蛋白的裂解及免疫印跡
        2.2.7 組織學檢測
        2.2.8 熒光定量PCR實驗
        2.2.9 炎性延長實驗
        2.2.10 實驗數(shù)據(jù)處理
第三章 實驗結(jié)果
    3.1 MEL-類似物可以緩解CFA慢性炎性疼痛
        3.1.1 MEL-類似物劑量依賴的翻轉(zhuǎn)CFA引起的機械刺激痛覺敏感
        3.1.2 MEL-類似物劑量依賴的翻轉(zhuǎn)CFA引起的熱刺激痛覺敏感
        3.1.3 MEL-類似物的熱刺激鎮(zhèn)痛效應
    3.2 MEL-類似物可以抑制過度激活的非神經(jīng)細胞
        3.2.1 CFA足底注射會導致非神經(jīng)細胞的過度激活
        3.2.2 MEL-類似物時間依賴的抑制非神經(jīng)細胞的過度激活
    3.3 MEL-類似物可以抑制過度表達的促炎細胞因子
        3.3.1 CFA足底注射會導致促炎細胞因子的過度表達
        3.3.2 MEL-類似物調(diào)節(jié)促炎細胞因子的過度表達
    3.4 重復給予MEL-類似物不會延長慢性炎性疼痛
        3.4.1 重復給予MEL-類似物不會惡化炎性痛
        3.4.2 重復給予MEL-類似物不會產(chǎn)生耐受
        3.4.3 MEL-類似物可以翻轉(zhuǎn)重復給予嗎啡產(chǎn)生的二次敏化
        3.4.4 重復給予MEL-類似物不會上調(diào)脊髓小膠質(zhì)細胞的表達
        3.4.5 重復給予MEL-類似物不會激活脊髓NLRP3 信號通路
第四章 實驗討論
    4.1 MEL-類似物可以緩解CFA慢性炎性疼痛
    4.2 MEL-類似物可以調(diào)節(jié)過度激活的非神經(jīng)細胞
    4.3 MEL-類似物調(diào)節(jié)促炎性細胞因子的表達
    4.4 重復給予MEL-類似物不會惡化炎性疼痛
    4.5 結(jié)論
參考文獻
在學期間的研究成果
致謝
附錄



本文編號：3782984