非病毒載體具有質(zhì)量可控、攜帶能力高和免疫原性低等優(yōu)點(diǎn),但存在轉(zhuǎn)染效率低的致命缺陷,限制了廣泛應(yīng)用。本研究采用計(jì)算機(jī)模擬設(shè)計(jì)了新型功能性基團(tuán)1,3-間苯二甲酰胍(BGG),并通過(guò)酰胺鍵將其修飾于第5代(G5)聚酰胺-胺樹(shù)枝狀大分子表面,得到新型非病毒載體材料G5-BGG。G5-BGG可將基因壓縮成荷正電的基因復(fù)合物。體外定性和定量轉(zhuǎn)染試驗(yàn)表明,G5-BGG作為基因藥物載體可顯著提高報(bào)告基因在人胃腺癌細(xì)胞(SGC-7901)中的轉(zhuǎn)染效率,同時(shí)具有良好的生物相容性。G5-BGG負(fù)載腫瘤壞死因子相關(guān)凋亡誘導(dǎo)配體(pTRAIL)基因時(shí)可在細(xì)胞水平上誘導(dǎo)SGC-7901細(xì)胞凋亡,抑制腫瘤細(xì)胞生長(zhǎng),具有良好的抗腫瘤作用。本研究表明G5-BGG在胃癌基因治療領(lǐng)域具有潛在的應(yīng)用前景。

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【文章目錄】：
1儀器與試藥
2方法與結(jié)果
    2.1功能性基團(tuán)修飾PAMAM G5載體的合成與表征
        2.1.1 G5-BGG的合成與表征
        2.1.2 G5-BEN的合成與表征
        2.1.3 G5-GUA的合成與表征
    2.2 基因復(fù)合物的制備與表征
        2.2.1 基因復(fù)合物的制備方法、粒徑和ζ電位
        2.2.2 瓊脂糖凝膠電泳分析
    2.3 載體材料的細(xì)胞毒性試驗(yàn)
    2.4 G5-BGG/pDNA復(fù)合物的體外轉(zhuǎn)染試驗(yàn)
        2.4.1 G5-BGG/pGL3復(fù)合物的體外蟲(chóng)熒光素酶定量轉(zhuǎn)染試驗(yàn)
        2.4.2 G5-BGG/pEGFP復(fù)合物的體外綠色熒光蛋白(EGFP)定性轉(zhuǎn)染試驗(yàn)
    2.5 G5-BGG/pDNA復(fù)合物的體外藥效學(xué)試驗(yàn)
        2.5.1 G5-BGG/pTRAIL復(fù)合物誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞凋亡的試驗(yàn)
        2.5.2 G5-BGG/pTRAIL復(fù)合物的抗腫瘤細(xì)胞作用
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